2018年华北理工大学生命科学学院904分子生物学之现代分子生物学考研核心题库
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一、名词解释
1． SDS 电泳（SDS-PAGE ）
【答案】SDS 电泳（SDS-PAGE ）是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定pH （碱性） 缓冲系统中分离的方法，主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
2． 单核哲酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）
【答案】单核苷酸多态性是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种，占所有已知多态性的90%以上。SNP 所表现的多态性只涉及单个碱基的变异，这种变异一般由单个碱基的转换或颠换引起。
3． 核酸分子杂交（hybridization ）
【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质，使来源不同的DNA （或RNA ）片段，按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术，杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间，也可在RNA 与DNA 链之间 形成。
4． RNA 编辑（RNA editing）
【答案】RNA 编辑是指某些RNA ，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA 所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA 的变化。
5． Transcriptome
【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。
6． Molecular Bescons
【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针，利用荧光标记探针的碱基配对原理，通过观察探针荧光显示或淬灭的现象，确定目的基因的分子标记。
7． DNA 复性（DNA renaturation）
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
8． Non-Watson-Crickbasepairing
【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U，C-G 配对的一些碱基配对现象，如U-G 配对。
二、简答题
9． 什么是SD 序列？其功能是什么？
SD 序列是mRNA 中用于结合原核生物核糖体的序列，【答案】（1）是存在于原核生物mRNA
起始密码子AUG 上游7〜12个核苷酸处的一段富含嘌呤的碱基序列。
（2） SD 序列的功能
①SD 序列与16S rRNA3’端反向互补，将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。
②SD 序列与16S rRNA 序列互补的程度以及从起始密码子AUG 到嘌岭片段的距离也都强烈地影响翻译起 始的效率。由于不同基因的mRNA 有不同的SD 序列，它们与16S rRNA的结合能力也不同，所以它们可以控制单位时间内翻译过程中起始复合物形成的数目，最终控制着翻译的速度。
10．简述原核生物与真核生物mRNA 的主要差别。
【答案】（1）真核生物5’一端有帽子结构，大部分成熟的mRNA 还同时具有3’一多聚A 尾巴，原核一般没有;
（2）原核的mRNA 可以编码几个多肤，真核只能编码一个，原核生物以多顺反子的形式存在，真核以单顺反子形式存在;
（3）原核生物以AUG 作为起始密码，有时以GUG ，UUG 作为起始密码，真核几乎永远以AUG 作为起始密码;
（4）原核生物mRNA 半衰期短，真核生物的mRNA 半衰期长。
11．简述基因定点突变的原理与实验过程。
【答案】（1）基本原理：通过聚合酶链式反应（PCR ）等方法向目的DNA 片段（可以是基因组，也可以是质粒） 中引入所需变化（通常是表征有利方向的变化），包括碱基的添加、删除、点突变等。目前，主要采用两种PCR 方法，重叠延伸技术和大引物诱变法，在基因序列中进行定点突变。
（2）实验过程
由采用的两种不同方法得到不同的实验过程
①重叠延伸技术
首先将模板DNA 分别与引物对（正向诱变引物FM 和反向引物R2）和2 （正向引物F2和反向诱变引物RM ）退火，通过和2反应扩增出两种靶基因片段；FMR2和RMF2片段在重叠区发生退火，用DNA 聚合酶补平缺口，形成全长双链DNA , 进行PCR3扩增；最后，用引物
F2和R2扩增出带有突变位点的全长DNA 片段（PCR4）。
②大引物诱变法
首先用正向突变引物（M ）和反向引物，扩増模板DNA 产生双链大引物（PCR1）, 与野生型DNA 分子混合后退火并使之复性，第二轮PCR 中加入正向引物（F2）, 与PCR1中产生的一条互补链配对，扩增产生带 有突变的双链DNA ; 最后进行DNA 序列分析验证突变位点。
12．简述抗终止子的调控机制。
【答案】抗终止子是能够在特定位点阻止转录终止的一类蛋白质。依赖因子的终止子上游有抗终止信号，抗终
止蛋白、因子均能与RNA 聚合酶结合，但不能同时与之结合。在RNA 聚合酶到达终止子之前遇到抗终止序列， 抗终止蛋白与RNA 聚合酶结合，使得因子不能与RNA 聚合酶结合，从而不能终止RNA
的转录而形成抗终止效应。
13．简述真核生物RNA 聚合酶II 梭基端结构域的功能。
【答案】（1）转录起始时，CTD 的Ser , Thr 的轻基非磷酸化，易与DNA 结合;
（2）转录延伸时，CTD 的Ser , Thr 的轻基磷酸化，松弛与DNA 的结合;
（3）CTD 的磷酸化有利于5' 的带帽反应的发生，CTD 的长度以及表达量也会对带帽和加尾产生影响;
（4）CTD 的变化不仅影响剪接因子在核内的分布，而且还对mRNA 选择性剪接产生一定的影响。
14．不同人感染HIV 和HBV 在人体潜伏的实践存在很大差异，有哪些原因？
【答案】潜伏期是指病原体侵入机体到开始出现症状和体征之间的这段时期。
（1）艾滋病潜伏期一般是1〜14年，平均6年，有的病原携带者甚至长达20年。不同个体的潜伏期之所以 存在如此大的差异，主要与患者的体征、年龄、感染途径、感染病毒的剂量及种类等因素有关。
①抵抗力、免疫功能强的个体，潜伏期相对较长；
②一般儿童潜伏期平均为1.2年，成年人8〜9年，，老年人则介于其间；
③经性接触感染的病毒剂量较小，潜伏期相对较长，经输血感染的病毒剂量较大，潜伏期相对较短；
④ 不同的种类的艾滋病病毒造成的艾滋病潜伏期不同，
如
16〜19年之久。
（2）HBV 潜伏期一般是50〜150天，平均60〜90天，最短的2周，最长的可达9个月，称长潜伏期肝炎。 肝炎的潜伏期长短也取决于病毒感染数量、感染途径及机体状态：经血感染的病毒剂量大，潜伏期较短；抵抗力、 免疫功能强的个体，潜伏期较长。
造成的艾滋病潜伏期长达