题目：苯代谢物长期处理对K562细胞红系分化的影响

目的：苯是一种常见的职业危害因素。研究表明，苯对血液系统的危害实际上是由苯的代谢产物引起的。苯接触会导致DNA甲基化状态的改变，而DNA甲基化会抑制基因的表达，进而影响红系祖细胞分化。本课题主要探讨苯代谢物低浓度长期处理对K562细胞红系分化的影响，以及DNA甲基化在这些苯代谢物影响K562细胞红系分化中的作用。方法：取指数生长期K562细胞进行接种，加入不同浓度的苯代谢物（苯酚：0～20μM，1,2,4-苯三醇：0～5μM，氢醌：0～10μM，儿茶酚：0～20μM）处理3周。通过联苯胺染色法测量苯代谢物长期处理对K562细胞的红系分化的影响，采用反转录PCR的方法检测红系分化相关基因的mRNA表达水平，通过定量MassARRAY甲基化检测法测定了红系相关基因甲基化状态。结果：苯代谢物苯酚、1,2,4-苯三醇、氢醌在没有明显细胞毒性的剂量范围内对氯化高铁血红素诱导的K562细胞红系分化率有较明显抑制作用，且这种影响有时间、浓度依赖梯度关系，同时这三种苯代谢物均能不同程度地抑制氯化高铁血红素诱导的K562细胞部分红系相关基因的mRNA表达水平，但5-Aza-CdR可以明显消除这种抑制作用。而儿茶酚的处理能使对K562细胞的红系分化率及部分红系分化的相关基因的mRNA表达水平上升，经氯化高铁血红素诱导后，这种上升作用更加明显。进一步的红系相关基因的CpG位点DNA甲基化水平检测显示，苯酚、1,2,4-苯三醇、氢醌、儿茶酚处理过的细胞中红系相关基因部分CpG位点甲基化程度有明显变化。结论：苯酚、1,2,4-苯三醇、氢醌均能够抑制K562细胞的红系分化，儿茶酚则促进K562细胞的红系分化，而这种影响与其改变相关基因的甲基化程度有关。