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一、名词解释

1． 表达载体（expression vector）。

【答案】表达载体是指为使插入的外源DNA 序列可转录，进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体。

2． 基因内校正（intragenic suppressor）。

【答案】基因内校正是指发生在与起始突变相同的基因内的校正突变。

3． 协同效应（cooperativity ）。

【答案】协同效应是指一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，能影响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象。如果是促进作用则称为正协同效应，如：带氧的Hb 皿基协助不带氧亚基结合氧；如果是抑制作用则称为负协同效应。

4． 密码子（codon ）。

【答案】密码子又称三联体密码子，是由mRNA 上每三个相邻的核苷酸构成的密码子，每一个密码子决定一个 氨基酸。

5． RNA interference （RNA 干扰）。

【答案】RNAinterferenceCRNA 干扰）即RNAi ，是指与靶基因同源的双链RNA 诱导的特异性转录后基因表达 沉默的现象，其作用机制是双链RNA 降解产生的小干扰RNA （siRNA ）与同源的靶mRNA 互补结合，导致mRNA 降解而抑制基因表达。RNAi 技术广泛用于基因功能研宄和重大疾病的基因治疗。

6． 差向异构体。

【答案】差向异构体是指分子之间仅有一个手性碳原子的构型不同的非对映异构体，例如葡萄糖和甘露糖、半乳糖和葡萄糖之间除仅有一个-0H 位置不同外，其余结构完全相同，它们之间称为差向异构体。

7． P/0。

【答案】磷氧比是指经电子与氧结合生成水的过程消耗一个原子的氧所要消耗的无机磷酸的分子数（或者是生成ATP 的分子数）。电子经过呼吸链的传递作用最终与氧结合生成水，在此过程中所释放的能量用于ADP 磷酸化生成ATP 。经此过程消耗一个原子的氧所要消耗的无机磷酸的

分子数（也是生成ATP 的分子数）称为磷氧比值（P/0）。如NADH 的磷氧比值是2.5，磷氧比值是1.5。

8． cAMP

的

环化腺苷酸，是细胞内的第二信使，由于某些激素或其他信号分

【答案】CAMP 即

子刺激，激活腺苷酸环化酶催化A TP 环化而形成。

二、问答题

9． 用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原？如果要打开牛胰核糖核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还必须加入什么试剂？蛋白质变性时为防止生成的入什么试剂来保护？

【答案】最常用的打开二硫键的方法是使用巯基试剂，例如巯基乙酵，可使参与二硫键的2个半胱氨酸还原为带 有游离巯基的半胱氨酸，为了使还原反应能顺利进行，通常加入一些变性剂，如高浓度的尿素等。加入过量的还 原剂可以防止还原所得的疏基被重新氧化。如果不准备使肽链重新氧化，而是进一步进行结构化学结构的研究，可以将巯基转化为其它的修饰形式，例如和羧甲基化等烷化剂反应。

在蛋白质分子中，由于二硫键的作用，可以使两条以上的肽链相连，也可以使肽链卷曲成环状。在进行蛋白质一级结构的测定时，无论是链间或链内的二硫键都必须拆开，使各条肽链彼此分离或伸展，方可测定。拆开二硫键的方法，有氧化法和还原法两种。

（1）氧化法：二硫键的断裂通常用过甲酸（即过氧化氢+甲酸）氧化法将二硫键氧化成磺酸基。

（2）还原法：最普遍的方法，就是答案所使用的方法

10．当胞浆中脂肪酸合成量盛时，线粒体中脂肪酸氧化就会停止，为什么？

【答案】主要是因为脂肪酸合成产生出的丙二酸单酰用，

这样长链的脂酰

的含量就会很多，脂酰

可以抑制肉碱脂肪酰转移酶的作

就不能转入到线粒体中。当脂肪酸的合成旺盛时，

胞浆中的丙二酸卓酰

被阻断在胞浆中，所以氧化就不能进行。

和

活

基重新被氧化，可加

脂肪酸分解代谢与合成代谢是协同受到调控的。脂肪酸分解代谢的调控主要是由线粒体控制脂肪酸进入粒体内。脂肪酸进入细胞后，在细胞溶胶中，在硫激酶的催化下先被乙酰化，形成脂酰

，脂酰

进入线粒体的调节是以脂酰

的抑制。

就会处于一个较高的水平，这样就可以从线粒体

不能进入线粒体为依据，即它必

须先转化为脂酰肉碱，才可以穿越线粒体的内膜，这个反应是在肉碱脂酰转移的催化下完成的，而肉碱脂酰转移强烈地受到丙二酸单酰

而丙二酸单酰

样当胞浆中脂肪酸合成旺盛时，丙二酸单酰

为脂肪酸合成产生的第一个中间体，在脂肪酸合成中担着重要的角色，这

内膜的运送系统上关闭脂肪酸的氧化，如此。可以防止耗能性的无效循环。

11．葡萄糖转变成乳酸，总自由能成相偶联。每有

（1）计算总偶联反应的

。

为在厌氧细胞中，此转变过程与生成。

的合

葡萄糖转变成乳酸就有

（2）计算厌氧细胞中能量的保留率。 （3）在需氧生物中葡萄糖完全氧化成（4）计算与

和

时，

上述两式相加得：

（2）保留效率=保留的能量何被利用的能量×

100%

上述两式相加得：

如果效率为如果合成每摩尔

时，被保留的能量为需要

则合成的

的摩尔数为：

那么每

以外，主

使能量保留率大大地増加。

在需氧细胞中，实际的

在物质氧化过程中，这些总偶联反应

12．蛋白质工程与基因工程的区别是什么？

【答案】基因工程要解决的问题是把天然存在的蛋白质通过克隆基因大量地生产出来；

如果能量的保

留率相同，每摩尔葡萄糖完全氧化时能得到多少摩尔

合成相偶联的总氧化反应的

【答案】（1）葡萄糖-乳酸，

需氧细胞的实际能量保留率要比摩尔葡萄糖彻底氧化时所能保留的能量为

实际保留率

要通过氧化磷酸化作用产生

（4）总偶联反应的

大，每摩尔葡萄糖完全氧化可以产生

可见在有氧条件下，除了葡萄糖生成丙酮酸阶段通过底物磷酸化生成的两分子

在需氧细胞中，按理论计算的

往往以热能的形式放散到周围的环境中。