2018年第二军医大学北京军区总医院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
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2018年第二军医大学北京军区总医院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题（一） . ... 2
2018年第二军医大学北京军区总医院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题（二） . ... 9
2018年第二军医大学北京军区总医院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题（三） . . 15
2018年第二军医大学北京军区总医院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题（四） . . 21
2018年第二军医大学北京军区总医院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题（五） . . 27
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一、名词解释
1． DNA 损伤（DNAdamage ）。
【答案】DNA 损伤是指发生在DNA 分子上的任何化学改变。
2． 复制子（replicon ）。
【答案】复制子是指能够独立的从复制起点到复制终点所包含的DNA 序列进行复制的基因组单位。
3． 离子载体。
【答案】按照被动转运方式转运离子的小的疏水性分子，可溶于膜脂双层中。大部分离子载体是微生物合成的，其中有些已被用作抗生素。离子载体包括载体性离子载体和通道形成性离子载体。
4． 等电聚焦电泳。
【答案】等电聚焦电泳（IFE , isoelectric focusing electrophoresis）是指利用一种特殊的缓冲液（两性电解质）
在聚丙烯酰胺凝胶内制造一个pH 梯度的电泳方法，电泳时每种蛋白质迀移到它的等电点（pI ）处，即梯度中的某一pH 时，由于表面静电荷为零而停止泳动。
5．
复制叉
【答案】
复制叉是指复制时，
在
链上通过解旋、解链和
解旋，
同时合成新的蛋白的结合等过程形成链。 的Y
型结构。在复制叉处作为模板的双链
6． 复制起点（replication origin）。
列称为复制起点或复制原点。
7．
【答案】
8．
端粒酶
【答案】
端粒酶是指核酸分子在发生热变性的时候，有一半双螺旋被破坏时候的温度。 是一种自身携带模板的逆转录酶，
由
第 2 页，共 32 页 【答案】复制起点是体内DNA 复制具有相对固定的起点。DNA 分子中开始复制的核苷酸序和蛋白质组成，组
分中含有一段短的模板序列与端粒
为模板催化端粒
. 的重复序列互补，而其蛋白质组分具有逆转录酶活性，
以
端，以维持端粒长度及功能。 的合成，
将其加到端粒的
二、问答题
9． 糖酵解与发酵的区别是什么？
【答案】（1）糖酵解:淀粉或己糖在有氧或无氧状态下分解成丙酮酸，伴有少量的生成。（2）发酵：微生物分解糖类产生酒精或乳酸。
10．在大肠杆菌DNA 分子进行同源重组的时候，形成的异源双螺旋允许含有某些错配的碱基对。为什么这些错配的碱基对不会被细胞内的错配修复系统排除？
【答案】大肠杆菌在进行错配修复的时候，根据母链和新生链的甲基化程度不同而识别出新生链上错配的碱基，再将新生链上错误的碱基切除，而不会切掉母链上正确的碱基。在DNA 进行同源重组的时候，形成的异源双螺 旋尽管会含有某些错配的碱基对，但异源双螺旋的两条DNA 链上都是高度甲基化的，因此这些错配的碱基对不 会被细胞内的错配修复系统排除。
11．有一段mRNA
为编码，原黄素能使这一段mRNA 发生单一碱基缺失突变，使肽链变为：
（1）缺失发生在哪一个密码子中？
（2）原来的密码子中缺失的是哪一个碱基？
（3）野生型mRNA 中碱基顺序是怎样的？
（4）如果G 插入到缺失的碱基位置，那么这个mRNA 的顺序是什么？
【答案】（1）首先根据氨基酸顺序排出野生型mRNA 可能的碱基序列：
氨基酸顺序
：
mRNA 喊基序列：
突变后从Thr 开始氨基酸顺序不同于野生型，说明从第二个密码子开始发生框移。
（2）突变后Thr 变为Pro , 而Pro
密码子为
为ACC ，突变是由于第一位碱基A 缺失造成的。
（3）Thr 密码子A 的缺失导致框移突变第二个密码子变为CCU ，编码Pro ; 突变型中Ser 是由Phe 变来的，可据此推测出Phe 的密码子为UUC , 移码后变成UCA 。同理，可推断出野生型中编码He 的密码子为AUA , 移 码后变为编码Tyr 的UAU ; Trp唯一的密码子UGG 变为编码Gly 的GGN 。因此，野生型这一段mRNA 的序列为：AUGACCUUCAUAUGG 。
（4）A 缺失后在该位置插入G , 该序列变为：AUGGCCUUCAUAUGG ，它编码的氨基酸顺序
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推测： 从而可以推断在野生型中编码Thr 的密码子
为：
12．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将
的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，
可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
13．简述膜内外物质是怎样跨膜出入细胞的。
【答案】膜内外物质（分子或离子）顺浓度梯度从高浓度到低浓度转运出细胞，不需要由胞
内水解来供能，这种转运过程称被动运输。被动运输又分三种形式扩散：
（1）简单扩散，物质通过质膜脂双层和质膜小孔进行通透，水和水溶性小分子及易溶于脂的非极性小分子可自由扩散。
（2）易化扩散，非脂溶性或亲水性分子，如氨基酸、糖和金属离子等借助质膜上内在的载体蛋白的协助，顺浓度梯度或电化学浓度运输入细胞，载体蛋白分为分子和离子两种载体，如分子载体运输葡萄糖；
又如离子载体缬氨霉素选择性地运输
（3）通道运输，它有开放的闸门，通道受刺激时打开，有三种即配体门通道、电压门通道和
第 4 页，共 32 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这