● 摘要
三叶木通(Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.)为木通科(Lardizabalaceae)木通属(Akebia Decne)落叶木质藤本植物。2010版《中华人民共和国药典》收录三叶木通干燥藤茎和近成熟果实,作为木通和预知子用药,主要药理作用为利尿通淋,通经下乳,疏肝理气,活血止痛。作为木通和预知子的主要药源植物,三叶木通目前主要来源于野生,人工栽培的量极少。三叶木通植物生长缓慢,达到药用标准至少五年以上,目前的采收方式将造成其蕴藏量的迅速降低。不断增长的药用需求与资源量不断下降的矛盾日渐突出。
为了满足市场的需求,我国多个地区正在进行三叶木通人工栽培试验。在人工栽培的过程中,由于病源和虫源的逐年积累,三叶木通的病虫害逐年严重。为了指导三叶木通规范化栽培和提高药材质量,本文对人工栽培的和野生的三叶木通叶斑病和虫害发生情况进行了调查与研究,以期为三叶木通病虫害的综合防治提供科学的理论依据。
本研究调查了人工栽培地三叶木通叶斑病的发生与进程;分离纯化病原菌,确定并进行病原菌鉴定;对叶斑病病原菌的生物学特性进行研究,在实验室内筛选化学防治药剂和生防菌。调查并鉴定了野生的和人工栽培的三叶木通害虫。实验主要结果如下:
1.对三叶木通叶斑病症状及发病进程的调查,结果显示:叶斑病病斑初期为红褐色,后期呈黑褐色。该病原菌也可侵染叶柄,叶柄表现出的症状与叶部症状相同。5月到6月是叶斑病快速发展期,病情指数急剧升高,8月进入该病发展后期。人工栽培的三叶木通叶斑病发病率和病情指数高于野生的叶斑病。
2.采用组织分离法,分离叶斑病病原菌,柯赫氏法则确定病原菌,通过病原菌形态特征和ITS区序列的系统进化分析鉴定病原菌,结果表明:叶斑病病原菌不能刺过成熟叶片的角质层,易侵染幼嫩叶片;病原菌分生孢子呈倒棍棒状或近卵形,淡褐色到黄褐色;病原菌在PCA+滤纸上可形成超过10个孢子连接成的孢子链;该叶斑病病原菌的rDNA-ITS区序列与细极链格孢(Alternaria tenuissima)的ITS区序列相似度最高;结合该叶斑病病原菌的形态和分子特征将其鉴定为半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,暗色孢科,链格孢属的细极链格孢(A. tenuissima)。
3.对三叶木通叶斑病病原菌进行了生物学特性研究,结果表明:该病原菌的最适生长培养基为PCA,最适产孢培养基为CA;最适生长、产孢温度为 30℃;最适生长pH为6.0,最适产孢pH 为7.0;最适生长光照条件为12h光照/12h黑暗,最适产孢光照条件为 24h光照;最适生长碳源为麦芽糖,最适产孢碳源为乳糖;最适生长氮源为苯丙氨酸,最适产孢氮源为甘氨酸。
4.室内筛选化学杀菌剂和生防菌,结果表明:所选6种杀菌剂中的4种对病原菌菌丝的生长有抑制作用。戊唑醇对病原菌的抑菌效果最佳,百菌清和多抗霉素不能抑制病原菌的生长,但可抑制孢子的萌发。枯草芽孢杆菌snnu16菌株对病原菌抑制作用强,snnu1菌株对病原菌的抑制作用弱。
5.通过对三叶木通害虫的调查和形态鉴定,结果表明,人工栽培的三叶木通与野生的相比,害虫数量多、危害严重。将发现的一种害虫初步鉴定为木虱总科(Psylloidea),木虱科(Psyllidae),无齿喀木虱属(Edentatipsylla Li)的一种木虱。