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一、名词解释

1． 穿梭载体（shuttle vector）

【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。

2． 顺式作用元件

【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列，包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。

3． RNA 编辑（RNA editing）

【答案】RNA 编辑是指某些RNA ，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA 所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA 的变化。

4． Gene Family

【答案】基因家族。基因家族是指一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因，可能由某一共同祖先基因（ancestral gene ）经重复和突变产生。基因家族的成员可以串联排列

，如rRNA 、tRNA 在一起，形成基因族（gene cluster）或串联重复基因（tandemly repeated genes）

和组蛋白的基因；有些基因家族的成员也可位于不 同的染色体上，如珠蛋白基因；有些成员不产生功能产物，这种基因称为假基因（Pseudogene ）。

5． Transcriptome

【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。

6． 突变

【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变，主要包括碱基的增添、缺失或改变等，染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。

7． Attenuator

【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时，RNA 合成终止，起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的，其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度，典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。

8． 移码突变（frameshi Kmutation）

【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。

9． polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体，能同时合成若干条蛋白质多肽链。

10．Intein

【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时，通过非酶促的转肽反应被切除，与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。

二、填空题

11．在原核生物蛋白质合成中不能识别任何终止密码子的终止因子是_____，大肠杆菌释放因子1 （RHI ）识别_____与_____。

【答案】RF3; UAG; UAA

12．用于基因克隆载体的质粒都具有_____、_____和_____三种必需条件。

【答案】复制区；选择标记；多克隆位点

13．真核基因表达的调控可以在五种水平上进行，这五个水平是：a._____、b._____ 、c._____、d._____和e._____ ，其中最终决定蛋白质寿命的主要调节途径是f._____ 。

【答案】转录前表达调控；转录水平的调节；转录后水平的调节；翻译水平的调节；翻译后水平的调节；翻译后水平的调节

【解析】基因表达是指遗传信息的转录和翻译过程，它受到不同水平的调节。由于真核生物基因不组成操纵 子，不形成多顺反子mRNA , 所以，真核生物的基因表达受到多级调控系统的调节。

（1）转录前水平的调节主要指染色体DNA 的断裂、删除、扩増、重排、修饰和异染色质化等改变基因结 构和活性的过程。

（2）转录水平的调节包括染色质的活化和基因的活化，增强子通过改变染色质DNA 的结构而促进转录„

（3）转录后水平的调节包括转录产物的加工和转运的调节；通过+同方式的拼接可产生不同的mRNA 。

（4）翻译水平的调节主要是控制mRNA 的稳定性和有选择地进行翻译。

（5）翻译后水平的调节主要控制多肽链的加工和折叠，通过不同方式的加工可产生不同的活性多肽；细胞蛋白质的寿命与其成熟蛋白质N 端的氨基酸有关。

14．真核生物tRNA 的成熟过程中需要通过拼接去除内含子，这个过程需要a._____和b._____两种酶。

【答案】核酸内切酶; 连接酶

【解析】tRNA 前体的加工包括:

（1）在核酸内切酶RNaseP 作用下，从5' 末端切除多余的核苷酸;

（2）在核酸外切酶RNaseD 作用下，从3' 末端切除多余的核苷酸;

（3）由核苷酸转移酶催化，3' 末端加CC Α-OH ;

（4）核酸内切酶催化进行剪切反应，剪掉内含子，由连接酶连接外显子部分;

（5）化学修饰作用，如甲基化、脱氨基、还原反应等。

15．第一个被解析出晶体结构的蛋白是_____。

【答案】胰岛素

16．限制性内切酶的切割方式有三种类型，分别是_____、_____和_____。

【答案】对称轴侧切割；对称轴侧；对称轴处切割

粘端；（3）在对称轴处切割产生平端。 【解析】就切割位点相对于对称轴的位置而言，限制性内切酶切割方式有三种：（1）在对称

轴侧切割产生粘端；（2）在对称轴侧切割产生

三、简答题

17．真核生物蛋白质的翻译后加工有哪些？

【答案】（1）信号肽的切除：蛋白质除游离于胞浆内发挥作用外，还有一部分要分泌到细胞外和定位于膜系统中起作用。每一需要运输的多肽都含有一段氨基酸序列，称为信号肽，引导多肽至不同的转运系统，到达目的地后，信号肽将被切除。

（2）二硫键的形成：在mRNA 分子中，没有胱氨酸的密码子，而不少蛋白质分子中含有胱氨酸二硫键，有的还有多个，且二硫键是蛋白质的功能基团，它是通过两个半胱氨酸的巯基氧化而成的，有的在切除肽段前就已经形成。

（3）蛋白质的折叠：肽链的折叠在肽链合成没有结束时就已经开始。核糖体可保护30〜40个氨基酸长的肽链，当肽链从核糖体中暴露后便开始折叠，使线形多肽呈现一定的空间结构。三级结构的形成几乎和肽链合成的终止同时完成。蛋白质的折叠是从N 端开始的。

（4）糖基化作用使多肽变成糖蛋白：糖蛋白中的糖苷键有两类，一类是肽链上天冬酰胺侧链上的N 原子与寡聚糖核之间构成N-糖苷键；另一类是肽链上丝氨酸、苏氨酸侧链上的氧原子与寡聚糖核之间构成的0-糖苷键。通常在糖蛋白上发现的寡聚糖核是五聚糖。寡聚糖核是通过长萜醇的磷酸酯被带到蛋白质上的。高尔基体能对糖蛋白进行进一步的修饰和调整。

（5）非末端氨基酸残基的修饰：丝氨酸、苏氨酸残基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸等的甲基化；谷氨酸和天冬氨酸的羧基化。