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2017年同济大学生命科学与技术学院631生物化学与分子生物学之现代分子生物学考研题库

  摘要

一、名词解释

1. DNA 的甲基化(DNAmethylation )

【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰,它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体,将胞嘧啶转变为甲基胞嘧啶的一种过程。

2. DNA 解链温度(melting temperature, T m )

【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。

3. YAC

【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体,含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列,可用于基因组大片段库构建。

4. 编码链(coding strand)

【答案】编码链是指DNA 双链中含编码蛋白质序列的那条链,与模板链互补,也称有义链(sensestrand )或正链。其序列与信使核糖核酸相同,只是信使核糖核酸中的U (尿嘧啶)组成与编码链中的T (胸腺嘧啶)组成相区别。

5. Nonsence mutation

【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换,使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种,致使肽链的合成提前终止,肽链缩短,产生无活性的多肽片段的突变。

6. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

7. Transcriptome

【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ,即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。

8. SDS 电泳(SDS-PAGE )

【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。

9. 突变

【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变,主要包括碱基的增添、缺失或改变等,染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。

10.等电聚焦

【答案】

等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

二、填空题

11.除核糖体外含有RNA 的蛋白质有_____、_____和_____等。

【答案】信号识别颗粒(SRP ); 端粒酶; 核微小核糖核蛋白颗粒(snRNP )

【解析】信号识别颗粒RNA 参与和含信号肤的mRNA 的识别,决定分泌的RNA 的功能; 端粒酶的RNA 作为真核染色体末端的模板; snRNP 的RNA 参与前体mRNA 的加工。

12.分子生物学的研究内容主要包含_____、_____、_____三部分。

【答案】DNA 重组技术; 基因表达调控研究; 生物大分子结构功能

【解析】分子生物学研究的四个方面:

(1)DNA 重组技术——基因工程技术;

(2)基因表达调控研究——核酸生物学;

(3)生物大分子结构功能——结构分子生物学;

(4)基因组、功能基因组与生物信急学研究。

13.在反密码子与密码子的相互作用中,反密码子IGA 可识别的密码子有_____,_____和_____。

【答案】UCC ; UCU; UCA

【解析】根据摆动假说,当反密码子的第一位是I 时,可识别3种密码子:

14.测定蛋白质分子质量的方法有_____、_____和_____。

【答案】凝胶过滤;沉降分析法

15.SDS-PAGE 中,凝胶的单体为_____,_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷,肽链越长迁移速度越_____。

【答案】丙烯酰胺;甲叉双丙烯酰胺;负;慢

16.真核生物tRNA 的成熟过程中需要通过拼接去除内含子,这个过程需要a._____和b._____两种酶。

【答案】核酸内切酶; 连接酶

【解析】tRNA 前体的加工包括:

(1)在核酸内切酶RNaseP 作用下,从5' 末端切除多余的核苷酸;

(2)在核酸外切酶RNaseD 作用下,从3' 末端切除多余的核苷酸;

(3)由核苷酸转移酶催化,3' 末端加CC Α-OH ;

(4)核酸内切酶催化进行剪切反应,剪掉内含子,由连接酶连接外显子部分;

(5)化学修饰作用,如甲基化、脱氨基、还原反应等。

三、简答题

17.简述真核生物RNA 聚合酶II 梭基端结构域的功能。

【答案】(1)转录起始时,CTD 的Ser , Thr 的轻基非磷酸化,易与DNA 结合;

(2)转录延伸时,CTD 的Ser , Thr 的轻基磷酸化,松弛与DNA 的结合;

(3)CTD 的磷酸化有利于5' 的带帽反应的发生,CTD 的长度以及表达量也会对带帽和加尾产生影响;

(4)CTD 的变化不仅影响剪接因子在核内的分布,而且还对mRNA 选择性剪接产生一定的影响。

18.简述原核生物和真核生物mRNA 的区别。

【答案】原核生物和真核生物mRNA 的区别表现在:

(1)特异性结构不同:真核生物的5' 端有帽子结构,大部分成熟的mRNA 还同时具有3' 一多聚A 尾巴,而原核生物一般没有这两种结构;

(2)编码能力不同:原核生物的mRNA 可以编码多个多肤,真核生物的只能编码一个; (3)顺反子类型不同:原核生物常以多顺反子的形式存在,真核一般以单顺反子形式存在; (4)起始密码子存在差异:原核生物一般以AUG 作为起始密码,有时以GUG , UUG 作为起始密码,真核几乎永远以AUG 作为起始密码;

(5)半衰期不同:原核生物mRNA 半衰期短,真核生物的mRNA 半衰期长;

(6)转录翻译的时序性不同:原核生物mRNA 的转录与翻译一般是同时进行的,而真核生物转录的mRNA 前体则需在转录后加工,成为成熟的mRNA ,且转录和表达发生在不同的时间和空间范围内。

19.简述双脱氧链终止法进行DNA 测序的原理和方法。

【答案】(1)原理:双脱氧的核苷酸是人造的分子,这种分子糖环的基基团,而在天然分子中糖环的

互补配对原则是天然三磷酸核苷酸,用它的和碳上都没有了轻g 基连接。碳上有一个羟基。在DNA 复制过程中,新掺入的碱基按碱基磷酸基团同生长链的前一个核苷酸的