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题目:主要禁用兽药的分子印迹技术的研究

关键词:甲基睾酮;沙丁胺醇;分子印迹;特异性识别;固相萃取

  摘要

兽药的大量使用导致了兽药及其代谢产物在动物体内的滞留或蓄积,并以残留的方式进入人体及生态系统,这使得对于食品中污染物和危害物的检测显得十分重要,因此,急需建立简单、快速、灵敏度高且成本低的检测方法。 本文主要选用了两种具有代表性的禁用兽药,性激素甲基睾酮和β2兴奋剂沙丁胺醇,作为研究对象。运用悬浮聚合、沉淀聚合等方法,来制备对应的分子印迹聚合物,并对其微观形貌,成键情况进行表征,对其特异性识别能力进行研究。用合成的沙丁胺醇分子印迹聚合物制备固相萃取柱,实验确定了淋洗液与洗脱液,测定沙丁胺醇分子印迹聚合物-固相萃取柱在样品中的应用情况。 悬浮聚合方法合成的甲基睾酮分子印迹聚合物为多孔结构,有效的防止溶胀现象的发生,保护印迹分子的功能团作用位点和与模板分子结构相配合的空穴,从而保证分子印迹的效果。通过比表面积和总孔体积的对比发现分子印迹聚合物吸附能力和孔隙的容量都要大于空白聚合物。通过结合性与选择性实验,发现该分子印迹聚合物相比空白聚合物具有高的吸附能力,其识别因子β达到6.1880,显示出良好的结合能力和特异性识别能力。 沉淀聚合方法合成的沙丁胺醇分子印迹聚合物,呈现均匀的球状,微粒的直径为100nm。通过比表面积和总孔体积的对比分子印迹聚合物吸附能力和孔隙的容量都要大于空白聚合物。通过结合性与选择性实验,发现该分子印迹聚合物相比空白聚合物有很强的吸附能力,其识别因子β达到6.8575,解离平衡常数Kd1=84.53mg/L,最大表观结合量Qmax1=224.91mg/g;Kd2=414.94mg/L,Qmax2=641.33mg/g,显示出良好的结合能力和特异性识别能力。 沙丁胺醇分子印迹固相萃取柱选用25 ml/g 1:10(V/V)的甲醇/水溶液作为淋洗液,50 ml/g 1:9(V/V)的甲醇/乙酸溶液作为洗脱液,回收率达到98.60%。通过实际样品的上样,对比MIP-SPE柱和BP-SPE柱的特异性吸附能力,MIP-SPE柱对沙丁胺醇的吸附虽然受到基质的影响,但相比与BP-SPE柱表现出良好的特异性吸附能力。