2017年黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院611分子生物学考研导师圈点必考题汇编
● 摘要
一、名词解释
1. SDS 电泳(SDS-PAGE )
【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
2. 转录单位(transcription unit)
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围,可以是单一基因,也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列,是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段,这是转录单位的重要特征。
3. 等电聚焦
【答案】
等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。
4. 简并性(degeneracy )
【答案】简并性是指由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象,对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子 (synonymouscodon ) 。
5. Edman 降解(Edman degradation)
【答案】Edman 降解是指由P . Edman于1950年首先提出来的,最初用于N 端氨基酸残基分析,现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术,
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应,切下与之反应的那个氨基酸残基,这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基,而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基,又可参加第二轮反应,如此重复,就可以测出n 个残基的顺序。
6. 内含子(intron )与外显子(exon )
,只转录,在【答案】内含子(intron )是指真核基因中的非编码序列,又称插入序列(IVS )
前体mRNA 加工时被剪切掉;
外显子(exon )是指真核基因中的编码序列,是一个基因表达为多肤链的部分。
7. 反式作用因子
【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子,对基因表达发挥不同调节作用 (激活或抑制:)的各类蛋内质因子的总称,也称反式作用元件。
8. 转座子
【答案】转座子是指存在于染色体DNA 上可自主复制和移位的基本单位,介导遗传物质的重排,即转座。
9. Non-Watson-Crickbasepairing
【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U,C-G 配对的一些碱基配对现象,如U-G 配对。
10.Nonsence mutation
【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换,使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种,致使肽链的合成提前终止,肽链缩短,产生无活性的多肽片段的突变。
二、填空题
11.研究蛋白质相互作用可以采用_____、_____、_____等方法。
【答案】酵母双杂交;免疫共沉淀;噬菌体展示
12.常见的转录活化域的特征性结构包括:带负电荷的螺旋结构,富含_____的结构和富含_____的结构。
【答案】谷氨酰胺;脯氨酸
【解析】转录激活域是由30〜100个氨基酸残基组成的。根据氨基酸组成特点,转录激活域又有酸性激活域、 谷氨酰胺富含区域及脯氨酸富含区域。
13.人线粒体基因组DNA 长度约为a._____kb,它所编码的基因按功能可分为b._____,e_____和d._____。
等三类。
【答案】17; rRNA基因;tRNA 基因;蛋白质基因
【解析】人线粒体基因组很小(16569bp ), 仅能编码2种rRNA , 22种tRNA 和13种蛋白质。
14.多肽翻译过程中,第一个被加入的氨基酸是_____。
【答案】甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸
【解析】作为多肽合成起始信号的密码子有两个:即甲硫氨酸的密码子(AUG )和缬氨酸的密码子(GUG ) (极少出现)。在大肠杆菌中,起始密码子AUG 所编码的氨基酸并不是甲硫氨酸本身,而是甲酰甲硫氨酸,在真核生物中则是甲硫氨酸。
15.分子生物学的研究内容主要包含_____、_____、_____三部分。
【答案】DNA 重组技术; 基因表达调控研究; 生物大分子结构功能
【解析】分子生物学研究的四个方面:
(1)DNA 重组技术——基因工程技术;
(2)基因表达调控研究——核酸生物学;
(3)生物大分子结构功能——结构分子生物学;
(4)基因组、功能基因组与生物信急学研究。
16.大肠杆菌表达质粒除质粒复制起点外,通常还包括下列组成部分:a._____ 、b._____ 、c._____ 、d. _____和e._____ 。
【答案】具有抗菌素抗性基因;多克隆位点;启动子;前导序列;加尾信号
【解析】一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足如下几个方面的条件:(1)具有复制起点;(2)具有抗菌 素抗性基因;(3)具若干限制酶单一识别位点;(4)具有较小的相对分子质量;(5)较高的拷贝数;(6)还应具 备与宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、増强子、加尾信号等DNA 调控元件。
三、简答题
17.基因、外显子和开放阅读框的区别。
【答案】(1)基因是产生一条多肤链或功能RNA 分子所必需的全部核苷酸序列。
(2)外显子是基因及其转录初级产物上可表达的序列,或转录初级产物上通过拼接作用而保留于成熟的RNA 中的核苷酸序列或基因中与成熟RNA 相对应的DNA 序列。
(3)开放阅读框是基因序列的一部分,包含一段可以编码蛋白的碱基序列,不能被终止子打断,也就是被翻译的区域。
18.请列举3项实验证据来说明为什么染色质中DNA 与蛋白质分子是相互作用的。
【答案】证据一:染色质DNA 的Tm 值(DNA 解链温度)比自由DNA 高,说明染色质中DNA 极可能与蛋白质分子有相互作用。
证据二:DNA 酶I (DNaseI )对染色质DNA 的消化速度远远慢于对纯DNA 的作用。
证据三:在染色质状态下,由DNA 聚合酶和RNA 聚合酶催化的DNA 复制和转录活性大大低于在自由DNA 中的反应。
(证据四:用小球菌核酸酶处理染色质以后进行电泳,可以得到均为200bp 基本单位倍数的DNA 片段)
19.简述全基因组鸟枪测序(whole genome shotgun sequencing)的基本步骤。
【答案】全基因组鸟枪测序法是在获得一定的遗传及物理图谱信息的基础上,将基因组DNA 分解成2kb 左右的数百万个DNA 小片段进行随机测序,辅以一定数量的10kb 的克隆和BAC 克隆的末端测序,利用超级计算机进行整合及序列组装。该方法是一种广泛使用的DNA 测序的方法,比传统的测序法快速,但精确度较差。其具体步骤为:
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