2017年华侨大学化工学院834生物化学考研冲刺密押题
● 摘要
一、名词解释
1. 竞争性抑制作用、非竞争抑制作用、反竞争性抑制作用。
【答案】竞争性抑制作用是指竞争性抑制剂因具有与底物相似的结构,通常与正常的底物或配体竞争酶的结合部位从而产生的抑制作用。这种抑制使得
复合物的一种酶促反应抑制作用。这种抑制使得
物浓度的方法解除。
反竞争性抑制作用是指抑制剂与酶-底物复合物结合,而不与游离酶结合的一种酶促反应抑制作用。这种抑制作用使得
2. Tollen 试验
质的一种鉴定戊糖的方法。
3. 复制叉
【答案】
复制叉是指复制时,在链上通过解旋、解链和
解旋,同时合成新的蛋白的结合等过程形成链。 的Y 型结构。在复制叉处作为模板的双链
4. 终止子
【答案】终止子是
5. 皂化值(saponification number)。
【答案】皂化值又称皂化价,是皂化lg 脂肪所需的K0H 毫克数,它与脂肪(或脂酸)相对分子质量成反比。
6. 茚三酮(ninhvdrin )反应。
【答案】茚三酮反应是指. 氨基酸与茚三酮中共热,引起氨基酸氧化脱氨、脱羧作用,最后
u 而直接生成亮黄色化合物(最茚三酮与反应产物(氨和还原茚三酮)发生作用生成蓝紫色物质(最大吸收峰在570nm )的应。两个亚氨基酸,即脯氨酸和羟脯氨酸,与茚三酮反应并不释放
第 2 页,共 22 页 增大,而不变。 非竞争抑制作用是指抑制剂与酶活性中心以外的基团结合,形成酶-抑制剂或酶-底物-抑制剂变小,但不变。这种抑制不能通过増加底都变小,但 比值不变。 【答案】Tollen 试验是指戊糖经浓盐酸脱水生成糠醛,后者与间苯三酚作用生成樱桃红色物分子中终止转录的核苷酸序列。
大吸收峰在440nm )。利用茚三酮显色可以定性鉴定并用分光光度法定量测定各种氨基酸。
7. 蛋白质的变性作用。
【答案】蛋白质的变性作用是指天然蛋白质受物理或化学因素的影响,分子内部原有的高度规则性的空间排列发生变化,致使其原有性质和功能发生部分或全部丧失的作用。
8. 稀有氨基酸。
【答案】稀有氨基酸是组成蛋白质中的20种常见氨基酸以外的其他蛋白质氨基酸,它们是正常氨基酸的衍生物,如5-轻赖氨酸。
二、问答题
9. 如何让一个超螺旋的环状病毒DNA 分子处于松弛态? 线形双链DNA 能否形成超螺旋?
【答案】内切核酸酶作用于超螺旋的环状病毒DNA 分子,在其中的一条链上产生“缺刻”(nick ), 释放张力,则超螺旋转变为松弛态,线形DNA 分子只有当两端都被固定时,才能产生超螺旋。
10.依序写出三羧酸循环中的酶。
【答案】柠檬酸合酶、乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、酮戊二酸脱氢酶系、玻珀酰
琥珀酸脱氢酶、延胡索酸酶、苹果酸脱氢酶。
11.利用你所知道的脂酸生物合成的知识,为下列实验结果作一个解释。
(1)均一标记的
碳15和16位上标记加入到肝可溶性部分得到一个均一标记的软脂酸。
被转变成再转变成均一标记的的软脂酸。(2)在过量的丙二酸单酰CoA 中加入微量的均一标记的【答案】(1)均一标记的软脂酸,这是脂酸的从头合成过程。
(2)假如仅微量的均一标记的加入到大大过量的未标记的丙二酸单酰CoA 中,丙二酸单酰CoA 代谢库并没有用14C 标记,因此仅仅形成在位上有标记的软脂酸。
12.某酶制剂的比活力为42单位/毫克蛋白,每毫升含12mg 蛋白质,计算当底物浓度达到饱和时,lmL 反应液中含:(1)酶制剂;(2)酶制剂时的反应初速度(单位为国际活力单位);(3)该酶制剂在使用前是否需要稀释?
【答案】每毫升酶制剂含有42X12=504活力单位
(1
)
(2)_酶制剂含
有
,酶制剂含有活力单位酶促反应速度为
:活力单位酶促反应速度为: 乙酰CoA 并和肝可溶性部分保温得到仅在合成酶、
lOmin —般情况下,(3)酶制剂都应当稀释,以便在适当的试验期间底物不被过分消耗,例如:
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内,lmL 反应液内含5nL 酶制剂,消耗的底物为:
因此,为了保证底物的消耗低于5%, 必须使[S]>0.5mol/L。如此大的底物浓度实际上是很难达到的,所以酶制剂在使用前应当稀释。
13.用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原?如果要打开牛胰核糖核酸酶链内的二硫键,则在反应体系中还必须加入什么试剂?蛋白质变性时为防止生成的
入什么试剂来保护?
【答案】最常用的打开二硫键的方法是使用巯基试剂,例如巯基乙酵,可使参与二硫键的2个半胱氨酸还原为带 有游离巯基的半胱氨酸,为了使还原反应能顺利进行,通常加入一些变性剂,如高浓度的尿素等。加入过量的还 原剂可以防止还原所得的疏基被重新氧化。如果不准备使肽链重新氧化,而是进一步进行结构化学结构的研究,可以将巯基转化为其它的修饰形式,例如和羧甲基化等烷化剂反应。
在蛋白质分子中,由于二硫键的作用,可以使两条以上的肽链相连,也可以使肽链卷曲成环状。在进行蛋白质一级结构的测定时,无论是链间或链内的二硫键都必须拆开,使各条肽链彼此分离或伸展,方可测定。拆开二硫键的方法,有氧化法和还原法两种。
(1)氧化法:二硫键的断裂通常用过甲酸(即过氧化氢+甲酸)氧化法将二硫键氧化成磺酸基。
(2)还原法:最普遍的方法,就是答案所使用的方法
14.结合激素的作用机制,说明肾上腺素如何通过对有关酶类的活性的复杂调控,实现对血糖浓度的调控。
【答案】人体饥饿时,血糖浓度较低,促进肾上腺髓质分泌肾上腺素。肾上腺素与靶细胞膜上的受体结合,活化了邻近的G 蛋白,后者使膜上的腺苷酸环化酶(AC )活化,活化的AC 催化ATP 环化生成cAMP , cAMP 作为激素的细胞内信号(第二信使)活化蛋白激酶A (PKA ),PKA 可以催化一系列的酶或蛋白的磷酸化,改变其生物活性;引起相应的生理反应。一方面,PKA 使无活性的糖原磷酸化酶激酶磷酸化而被活化,后者再使无活性的糖原磷酸化酶磷酸化而被活化,糖原磷酸化酶可以催化糖原磷酸解生成葡萄糖,使血糖浓度升高。另一方面,PKA 使有活性的糖原合成酶磷酸化而失活,从而抑制糖原合成,也可以使血糖浓度升高。
15.外源基因导入动物细胞有哪些常用方法?
【答案】常用的方法有:(1)磷酸钙共沉淀法,用沉淀磷酸离子和DNA , 沉积在细胞质膜上的DNA 被细胞吸收,可能是通过吞嗤作用;(2) DEAD 葡聚糖(DE-AE-dextron )或聚阳离子(polycation )法,它能结合DNA 并促使细胞吸收;(3)脂质体(liposome )法,利用类脂经超声波、机械搅拌等处理,形成双脂层小囊泡, 将DNA 溶液包裹在内,它通过与细胞质膜融合而使DNA 进入细胞;(4)脂质转染法,用人工合成的阳离子类 脂与DNA 形成复合性,借助类脂穿过质膜而将DNA 导入细胞内;(5)电穿孔法,在脉冲高压电场作用下质膜 瞬间被击穿,DNA
第 4 页,共 22 页 基重新被氧化,可加