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2017年同济大学生命科学与技术学院631生物化学与分子生物学之现代分子生物学考研导师圈点必考题汇编

  摘要

一、名词解释

1. 基因扩増

【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象,结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。

2.

【答案】,是指一种利用非放射即荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization)

性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合

起来,通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。

3. 简并性(degeneracy )

【答案】简并性是指由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象,对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子 (synonymouscodon ) 。

4. YAC

【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体,含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列,可用于基因组大片段库构建。

5. 分子伴侣(molecular chaperone)

【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解,如热休克蛋白。

6.

【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件,它位于特定的mRNA 区域,可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物,继而发生构象重排,影响mRNA 活性。

7. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft

结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

8. 拓扑异构酶(topoisomerase )

【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶,其作用机制是先切断DNA ,让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。

9. 重组修复

【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处,再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程,因为发生在DNA 复制之后,又称复制后修复。

10.核酸分子杂交(hybridization )

【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA (或RNA )片段,按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术,杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间,也可在RNA 与DNA 链之间 形成。

二、填空题

11.SDS-PAGE 中,凝胶的单体为_____,_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷,肽链越长迁移速度越_____。

【答案】丙烯酰胺;甲叉双丙烯酰胺;负;慢

12.真核生物RNA 聚合酶I 、II 和III 分别负责_____和_____基因的转录。

【答案】rRNA ; hnRNA ; tRNA

【解析】真核生物中存在3类RNA 聚合酶,其催化的转录产物及对α-鹅膏覃碱的敏感性见表。

表 真核生物的RNA 聚合酶

13.2004年确定人类基因组含有_____碱基对和_____基因。

【答案】约30亿;约2.5万个

【解析】人类基因组计划于20世纪90年代启动,计划测定人类单倍体染色体组中约30亿碱基对序列,包括约3万个基因。

14.真核生物tRNA 的成熟过程中需要通过拼接去除内含子,这个过程需要a._____和b._____两种酶。

【答案】核酸内切酶; 连接酶

【解析】tRNA 前体的加工包括:

(1)在核酸内切酶RNaseP 作用下,从5' 末端切除多余的核苷酸;

(2)在核酸外切酶RNaseD 作用下,从3' 末端切除多余的核苷酸;

(3)由核苷酸转移酶催化,3' 末端加CC Α-OH ;

(4)核酸内切酶催化进行剪切反应,剪掉内含子,由连接酶连接外显子部分;

(5)化学修饰作用,如甲基化、脱氨基、还原反应等。

15.在分子生物学发展史上,两次获得诺贝尔奖的科学家是英国著名的_____,他的两项贡献分别是_____和_____。

【答案】Sanger ; 蛋白质序列分析; DNA 序列分析法

【解析】Sanger 利用纸电泳及层析技术首次阐明胰岛素的一级结构,开创了蛋白质序列分析的先河,获1958年诺贝尔化学奖; 1980年,Sanger 和Gilbert (英)设计出一种测定DNA 分子内核苷酸序列的方法,而获得诺贝尔化学奖。

16.SOS 应答系统是DNA 损伤修复的一个重要途径,

【答案】LexA 阻遏;DNA 损伤修复

【解析】当细菌DNA 遭到破坏时,细菌会启动一个被称为SOS 的诱导型DNA 修复系统,但由于参与SOS DNA修复系统的许多基因分散在染色体的各个部位,都同时受到LexA 阻遏蛋白的抑制,平时表达水平很低; 而一般情况下

基因表达并不完全受阻遏蛋白的阻遏,

recA 基因的表达产物RecA 蛋白在这里的主要功能是通可以参与细菌中的SOS 体系的诱导表达,

过引起LexA 阻遏蛋白的降解,从而解除它对DNA 损伤修复 相关基因转录的抑制。

蛋白在这里的主要功能是通过引起_____蛋白的降解,从而解除它对_____相关基因转录的抑制。

三、简答题

17.简述双向电泳研究蛋白质组的优缺点。

【答案】(1)优点: ①双向电泳技术,特别是固相pH 梯度等电聚焦为第一向的双向电泳技术是当前分辨率最高,信息 量最大的电泳技术。目前,一次双向电泳最高可达11000个蛋白点的分辨率;

②双向电泳能将组织和细胞中成千上万种蛋白高分辨,高灵敏的分离以满足随后的质谱分析,结合质谱鉴定 技术可査明大型蛋白复合物各组分,与其他生物技术相结合,可以快速准确地发现和鉴定新的蛋白质。

(2)缺点:

①低拷贝蛋白质的鉴定受限;