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一、名词解释

1． 酶的化学修饰调节。

【答案】酶的化学修饰调节是指酶蛋白肽链上某些残基在酶的催化下发生可逆的共价修饰，从而引起酶活性的改变。

2． 复制子（replicon ）。

【答案】复制子是指能够独立的从复制起点到复制终点所包含的DNA 序列进行复制的基因组单位。

3． 回复突变（re verse mutation / back mutation）。

【答案】回复突变是指发生在起始突变位点上，使原来的野生型表型得到恢复的第二次突变。

4． 两用代谢途径。

【答案】两用代谢途径是指既可用于代谢物分解，又可用于合成的代谢途径，往往是物质代谢间的枢纽。如三羧酸循环，既是糖脂蛋白质彻底氧化的最后途径，又可为糖、氨基酸的生物合成提供所需碳骨架和能量。

5． 氨基酸的等电点。

【答案】氨基酸的等电点是指氨基酸所带净电荷为零时所处溶液的

6． 胞吐（作用）。

【答案】胞吐是指分泌的物质被包裹在脂囊泡内，与质膜融合，然后将物质释放到细胞外空间的过程。

7． 转录（transcription ）。

【答案】转录是指以DNA 为模板、合成RNA 的过程。转录由RNA 聚合酶催化，是基因表达的核心步骤。

8． 转移核糖核酸以代表。

【答案】转移核糖核酸是一类携带激活氨基酸，将它带到蛋白质合成部位并将氨基酸整合到生长着的肽链上的RNA 。tRNA 含有能识别模板mRNA 上互补密码的反密码。

二、问答题

9． 有一个五肽，它的一级结构式是DRVYH 。

（1）正确命名此肽。

（2）请在下列结构式中按该肽的一级结构顺序填上氨基酸残基的侧链结构。

【答案】（1）天冬氨酰精氨酰缬氨酰酪氨酰组氨酸

（2）

10．胰脱氧核糖核酸酶可以随机地水解溶液中的DNA 的磷酸二酯键，但是作用于染色体DNA 只能使之有限水解，产生的DNA 片段长度均为200bp 的倍数。请解释。

【答案】真核生物染色体DNA 含有核小体结构，核小体是由大约200bp 的DNA 双链围绕组蛋白核心组成的，彼此相连形成念珠状结构，即染色体DNA 。围绕组蛋白核心的DNA 不被DNaseI 水解，而核小体与核小体之间起连接作用的DNA 的磷酸二酯键对敏感，因此水解产生长约200bp 的DNA 片段。

11．为什么抑制大肠杆菌DNA 旋转酶（gyrase ）的活性，会抑制乳糖操纵子的转录活性？

【答案】乳糖操纵子受到阻遏蛋白和CAP （降解物激活蛋白）的双重调节。CAP 和cAMP 形成的复合物可以与乳糖操纵子基因上游的CAP 结合位点结合，促进基因转录。CAP 是一种二聚体的激活蛋白，与cAMP 结合以后， 其构象发生变化，从而能够与CAP 结合位点结合。CAP 结合位点是DNA 上一段长为30bp 的特殊的回文排列。 CAP-cAMP 复合物结合以后，诱导这段DNA 环绕其上，并弯曲约的角。这种弯曲在刺激RNA 聚合酶活性方面起着重要的作用。作为即旋转酶可能参与调节此处DNA 的弯曲。因此抑制它的DNA 大肠杆菌细胞内的拓扑异构酶

旋转酶的活性会抑制乳糖操纵子的转录。

12．简述下列因素如何影响DNA 的复性过程：（1）阳离子的存在；（2）低于

高浓度的DNA 链。 的温度；（3）

【答案】（1）阳离子的存在可中和DNA 中带负电荷的磷酸基团，减弱DNA 链问的静电作用，促进DNA 的复性；

（2）低于

的温度可以促进DNA 复性； （3）DNA 链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度、机会，从而促进DNA 复性。

13．ApCpCpCpCpApGpGpGpUpUpUpApGpUpCpCp

（1）用牛胰核糖核酸酶完全降解，得到的产物是什么？

（2）用核糖核酸酶完全降解，产物是什么？

和嘧啶碱的与戊糖的形成N-糖苷键。有两种戊糖，磷酸基与（3）用碱完全水解，产物是什么？ 【答案】核酸嘌呤碱的糖可形成磷酸酯键，所有这些糖苷键和磷酸酯键都能被酸、碱和酶产解。

（1）产物是ApGpGpGpUp+ApGpUp+ApCp+5Cp+2Up

牛胰核糖核酸酶简称RNasel , 它只作用于RNA ，是具有极高专一性的酶，其作用点为嘧啶核苷-3’-磷酸与其他核苷酸之间的连键，产物为3’-嘧啶核苷酸，或以3’-嘧啶核苷酸结尾的寡核苷酸。在给定的核苷酸序列中，其作用位点如下所示：

（2）产物是

核糖核酸酶T1具有比RNasel 更高的专一性。它的作用点是用位点如下所示：

（3）产物是四种核苷的解。RNA 的核糖上有和磷酸混合物，

或 核酸用碱水解时，一般来说只是RNA 的磷酸酯键易被水解，而DNA 的磷酸酯键则不易被水基，在碱的作用下形成磷酸三酯。磷酸三酯极不稳定，随即水解，产生核苷环磷酸酯。该环磷酸酯继续水解产生核苷酸和核苷酸。

14．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？

如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？

你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的

种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条

小的条带。这一次染色方法是什么？为什么

会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？

【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物

鸟苷酸与其相邻核苷酸的之间的连键，产物为以鸟苷酸为末端的寡核苷酸，或鸟苷酸，在给定的核苷酸序列中，其作大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这