2018年暨南大学生命科学技术学院836分子生物学之现代分子生物学考研核心题库
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一、名词解释
1． SD 序列（Shine Dalgamo sequence）
【答案】SD 序列是指存在于原核生物mRNA 起始密码子上游7〜12个核苷酸的富含嘌呤的保守片段，能与 16SrRNA3' 端富含嘧啶的区域进行反向互补，所以可将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。
2． Telomerase
【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶，其中RNA 作为模板序列，指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。
3．
【答案】泛素（遍在蛋白）。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中，主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被水解的小蛋白。
4． YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体，含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列，可用于基因组大片段库构建。
二、简答题
5． 简述DNA 结合结构域分类及碱性亮氨酸拉链结构的特点。
【答案】（1）蛋白质与DNA 结合区域存在一些特殊的基序（motif ）结构，主要有：
①螺旋一转角一螺旋（HTH ）基序。两段螺旋被一短的转角结构分开，其中一段螺旋为DNA 识别螺旋。 ②锌指基序。由肽链的保守序列中的一对组氨酸加一对半胱氨酸
或2
对半胱氨酸
与一个锌离子形成配位键，这些氨基酸对之间的多肽链成环状突出并折迭成指形结构，多个指结构常串联重复。 锌指族转录因子以二聚体形式同DNA 上的顺式调控元件结合。含锌指基序的转录因子，与GC 盒结合的SP1、 类固醇激素受体家族，抑癌蛋内
1^11都位于螺
等。 ③亮氨酸拉链基序。由一段每隔6个aa 就有一个Leu 的伸展肽链组成，这些周期性出现的 旋的同一侧面，因此两条均含Leu 拉链基序的蛋白质通过亮氨酸侧链的相互作
第 2 页，共 29 页 用形成二聚体。具有亮氨酸拉链基 序的转录因子，如原癌基因
④螺旋一环一螺旋（HLHt ）基序。由2个a 螺旋间隔一个非螺旋的环（loop ）组成，如原癌基因产物 及其结合蛋白Max 。
⑤同源域（ho-meodomain ）蛋白。来自控制躯体发育的基因，长约60个氨基酸，其中的DNA 结合区与螺旋 一转角一螺旋相似，主要与DNA 大沟相结合。
（2）碱性亮氨酸拉链结构的特点：
①两个蛋白质分子近处C 端肽段各自形成两性a 螺旋, ot 螺旋的肽段每7个氨基酸残基出现一个亮氨酸残基， 两个a 螺旋的疏水面互相靠拢，两排亮氨酸残基疏水侧链排列成拉链状，形成疏水键使蛋白质结合成二聚体；
②亮氨酸拉链区并不能直接结合DNA , 只有肽链氨基端20~30个富含碱性氨基酸结构域与DNA 结合。
6． 简述原核生物DNA 的复制特点。
【答案】（1）原核生物双链DNA 都是以半保留方式遗传的，DNA 的复制在整个细胞周期都能进行;
（2）在复制起始、延伸和终止这三个阶段中主要的变化包括:双链的解开，RNA 引物的合成，DNA 链的延长，RNA 、引物的切除、填补缺口、DNA 片段的连接以及切除和修复错配碱基等;
（3）原核生物通常只有一个复制起点。
其复制起始点（OriC ）是含有3个13bp 的串联重复保守序列，以及4个由9bp 的保守序列组成的能结合DnaA 的起始结合位点;
（4）在起始点处解开形成复制叉，可以连续开始新的DNA 复制，一个复制单元多个复制叉，复制叉移动速度才良快;
（5）需要多种酶和蛋白质的协同参与，都涉及拓扑异构酶、解旋酶、单链结合蛋白、引物合成酶、DNA 聚合酶、连接酶等，DNA 聚合酶在组成和功能上与真核生物有很大的不同，原核的DNA 聚合酶III 复制时形成二聚体复合物，而真核的聚合酶保持分离状态;
（6）原核生物冈崎片段由DNA 聚合酶I 去除，以多联体的形式补齐末端，且原核生物的DNA 聚合酶I 具有5'-3' 外切酶活性。
7． 导肽运送蛋白质时具有哪些特点?
【答案】线粒体、叶绿体中绝大多数蛋白质及过氧化物酶体中的蛋白质是在导肽或前导肽（leaderpeptide ）的指导下进入这些细胞器中。这些蛋白质在细胞质基质中合成以后再转移到这些细胞器中，因此称为翻译后转移。该转移方式的特点：
（1）需要受体；
（2）消耗ATP 使多肽去折叠；
（3）需要分子伴侣（如热激蛋白
（4）要电化学梯度驱动；
（5）要信号肽酶切除信号肽；
第 3 页，共 29 页 ）帮助蛋白质正确折叠；
（6）通过接触点进入；
（7）非折叠形式运输。
8． 解释下列非编码RNA （non-codingRNA ）名词:
（1）核仁小RNA （small nucleolar RNA, snoRNA ）;
（2）干扰小RNA （small interfering RNA, siRNA ）;
（3）微RNA （microRNA , miRNA ）
【答案】非编码RNA 是指不被翻译成蛋白质的RNA ，如tRNA , rRNA.snoRNA , siRNA , siRNA 等，这些RNA 不被翻译成蛋白质，但是参与蛋白质翻译过程。
（1）snoRNA 是一个与特性化的非编码RNA 相关的大家族，由内含子编码，已证明有多种功能:
①反义snoRNA 指导rRNA 核糖甲基化;
②snoRNA 与其它RNA 的处理和修饰有关，如核糖体和剪接体核小RNA , gRNA 等。
siRNA 是由Dicer （2）（RNAase III家族中对双链RNA 具有特异性的酶）加工而成，是siRISC 的主要成员，激发与之互补的目标mRNA 的沉默。siRNA 有如下特点:
①长度约在22nt 左右，是双链RNA ，依赖Dicer 酶的加工，是Dicer 的产物，所以具有Dicer 产物的特点;
②生成需要Argonaute 家族蛋白存在; 是RISC 组分;
③siRNA 合成是由双链的RNA 或RNA 前体形成的;
④siRNA 一般是人工体外合成的，通过转染进入人体内，是RNA 干涉的中间产物;
⑤植物体内也存在内源的siRNA ;
⑥在作用位置上，siRNA 可作用于mRNA 的任何部位，并与mRNA 完全互补;
⑦在作用方式上，siRNA 只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控;
⑧siRNA 不参与生物生长，是RNAi 的产物，原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。 （3）miRNA 是含有茎环结构的miRNA 前体，经过Dicer 加工之后的一类非编码的小RNA 分子。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能, miRNA 被认为在调控发育过程中有重要作用。miRNA 的特点:
①广泛存在于真核生物中，是一组不编码蛋白质的短序列RNA ，它本身不具有开放阅读框架（ORF ）;
②通常的长度为20~24nt，但在3' 端可以有1~2个碱基的长度变化;
3' 端为轻基，③成熟的miRNA5' 端有一磷酸基团，这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能RNA
的降解片段区别开来;
④多数miRNA 还具有高度保守性、时序性和组织特异性。
9． 真核生物RNA 的转录后加工及其意义。
【答案】（1）RNA 转录后加工有:
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