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一、名词解释

1． 基因超家族

【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性，并参考功能的相似性。

2． 单顺反子mRNA （monocistronic mRNA）和多顺反子mRNA （polycistronic mRNA）。

【答案】单顺反子mRNA 是指能翻译成一条肤链的信使核糖核酸（mRNA ）来自单顺反子; 多顺反子mRNA 是指两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸（mRNA ），多顺反子mRNA 一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。

3． 移码突变（frameshi Kmutation）

【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。

4． 阻遏蛋白

【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质，在一定条件下与DNA 结合，一般具有诱导和阻遏两种类型。

5． Transcriptome

【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。

6． 转录单位（transcription unit）

【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。

7． 双向电泳

【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。

8． Edman 降解（Edman degradation）

【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的，最初用于N 端氨基酸残基分析，现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术，

其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应，切下与之反应的那个氨基酸残基，这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基，而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基，又可参加第二轮反应，如此重复，就可以测出n 个残基的顺序。

二、填空题

9． SDS-PAGE 中，凝胶的单体为_____，_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷，肽链越长迁移速度越_____。

【答案】丙烯酰胺；甲叉双丙烯酰胺；负；慢

10．含HTH 的DNA 结合蛋白多以_____结构插入DNA 双螺旋的_____以识别DNA 的特定序列。

【答案】a 螺旋；大沟

【解析】这一类蛋白质分子中有至少两个螺旋，中间由短侧链氨基酸残基形成“转折”，近羧基端的

螺旋中氨基酸残基的替换会影响该蛋白质在DNA 双螺旋大沟中的结合。与DNA 相互作用时，同源域蛋白的第 一、二两个螺旋往往靠在外侧，其第三个螺旋则与DNA 大沟相结合。

11．限制性内切酶的切割方式有三种类型，分别是_____、_____和_____。

【答案】对称轴侧切割；对称轴侧；对称轴处切割

【解析】就切割位点相对于对称轴的位置而言，限制性内切酶切割方式有三种：（1）在对称

轴侧切割产生粘端；（2）在对称轴侧切割产生粘端；（3）在对称轴处切割产生平端。

12．蛋白质组学研究某一物种、个体、器官、组织或细胞在特定条件、特定时间所表达的全部蛋白质图谱。通常采用_____方法将蛋白质分离，然后采用_____技术进行鉴定。

【答案】双向电泳；质谱

三、简答题

13．假如你得到一个据说通过改造并适合作为基因治疗载体的病毒，你将如何分析这种可行性？主要在哪些 方面做改造？你将如何测试改造后的病毒载体的效率和安全性？

【答案】（1）作为基因治疗载体的病毒的基本要求：

①能够感染多种生物的多种类型不同的细胞；

②易于改造并易于插入外源基因，能装配成病毒颗粒；

③能使外源基因完全整合到宿主细胞中，并且外源基因要有较高的表达水平；

④对人体安全。

（2）改造包括：

①改造病毒壳粒蛋白的抗原表位；

②减少病毒DNA 中非必需基因的表达；

③减少病毒载体的免疫反应及对细胞的毒性；

④改造所选择的目标基因的插入位点，便于目的基因的装载。

（3）测试病毒载体的效率与安全性：

①病毒载体的有效性表现在能够尽量多地将目的基因导入靶细胞并整合到宿主染色体上，因此可通过检测目的基因的含量来衡量。

②病毒载体的安全性表现在载体对细胞正常代谢的影响。因为病毒载体中可能产生有传染性、野型或辅助型 病毒，随机整合于宿主基因组中，活化癌基因或抑制癌基因失活；也有可能病毒载体自身编码的基因产物过度表达，引起细胞及机体不适的反应。

14．增强子的作用有哪些?

【答案】（1）增强效应十分明显。

（2）增强效应与位置和取向无关。

（3）大多为重复序列。

（4）增强效应一般具有组织或细胞特异性。

（5）没有基因专一性。

（6）许多增强子还受外部信号的调控。

15．简述I 、II 类内含子的剪接特点。

【答案】（1）I 类内含子的剪接

主要是转酯反应，剪接反应实际上是发生了两次磷酸二酯键的转移。

①第一步转酯反应由一个游离的鸟苷或鸟苷酸（GMP , GDP 或GTP ）介导，其3'-OH 作为亲核集团攻击内含子5' 端的磷酸二酯键，从上游切开RNA 链，在第二步转酯反应中，上游外显子的自由3'-OH 作为亲核基团攻击内含子3' 位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子完全被切开，上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键重新连接;

②I 类自剪接内含子剪切后释放出线性内含子，而不是一个套索状结构。

（2）II 类内含子的剪接

①II 类自剪接内含子的转酷反应无须游离鸟普酸或鸟苷，而是由内含子本身的靠近3' 端的腺苷酸2'-OH 作为亲核基团攻击内含子的5' 端的磷酸二酯键，从上游切开RNA 后形成套索装结构，再由上游外显子的自由3'-OH 作为亲核基团攻击内含子3' 位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子被完全切开，上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键重新连接;

（2）II 类自剪接内含子剪切后释放出套索状结构的内含子。