题目：应激性抑郁样行为发生中海马GABAA受体对Glu能系统和GABA能系统的调节

抑郁症(depression)是一种以情绪低落和快感缺失为主要特征的情感障碍性精神疾病，常伴有自杀倾向，严重威胁人类的健康和生命。单胺类递质失调学说是研究抑郁症发生机制及治疗的主要理论之一，但却不足以解释抑郁发生的全部现象。随着近年来对抑郁症发生机制的深入研究及临床实践均发现，抑郁症与多种神经递质失调有关，除单胺类神经递质的异常变化外，谷氨酸( glutamicacid，Glu)、γ-氨基丁酸( aminobutyricacid，GABA)等氨基酸类神经递质在抑郁症发生中也具有重要作用。

Glu是脑内主要的兴奋性神经递质，谷氨酸及其受体失调与抑郁症发生密切相关。海马内有丰富的Glu能神经元和GABA能神经元分布。研究表明，慢性应激使海马Glu水平显著升高，海马注射N-甲基-D-天冬氨酸( N-methyl-D -aspartic acid, NMDA) 受体激动剂能引起抑郁样行为，注射NMDA受体拮抗剂MK-801能明显改善应激引起的抑郁样行为表现。可见，海马Glu过量升高，NMDA受体过度激活是导致应激性抑郁样行为发生的重要途径。也有研究发现，NMDA受体和AMPA受体均参与应激性抑郁发生，只是二者作用不同，且相互影响。关于抑郁发生的更多研究结果证明，Glu及其受体失调可能是抑郁发生的重要原因之一，单胺类递质发挥抗抑郁作用的途径之一很可能通过调节Glu能神经系统实现。

GABA作为哺乳动物中枢神经系统中最重要的抑制性神经递质，在中枢约50%的突触以GABA为递质。GABA也是海马中间神经元的主要递质，参与调控胺类、肽类和氨基酸类等神经递质系统功能，与情感和精神活动密切相关。GABA与Glu关系十分密切，Glu在谷氨酸脱羧酶（Glutamic acid decarboxylase,GAD）催化下生成GABA, GAD调控GABA的合成，其活性决定脑组织GABA的水平。研究证明，应激性抑郁发生与海马Glu水平升高，NMDA受体过度激活有关，而GABA水平下降也是抑郁发生的原因之一。GABA受体包括GABAA受体、GABAB受体和GABAC受体三种类型。GABAA受体广泛分布于整个神经系统，是哺乳动物大脑中最重要的GABA受体。有研究结果提示突触和突触外GABAA受体可能都参与了抑郁症的发生，而且GABAA受体的不同亚基在抑郁发生中的作用不同。尽管有关抑郁发生中海马GABAA受体表达变化的研究结果并不一致，但激活GABAA受体有抗抑郁、抗焦虑作用。激活大鼠海马GABAA受体能够降低Glu水平，升高GABA水平，从而起到抗抑郁作用。提示调节Glu及GABA水平可能是GABAA受体抗抑郁的途径之一。此外，采用膜片钳电生理技术研究发现，GABAA受体能够抑制Glu离子型受体介导的全细胞电流。表明GABAA受体对Glu离子型受体的功能也有调控作用。

综上所述，激活GABAA受体有抗抑郁作用，其抗抑郁途径与Glu能系统及GABA能系统均有密切关系。海马是研究抑郁发生最为关注的脑区，Glu和GABA又是海马内主要的神经递质，研究海马内GABA能系统与Glu能系统之间的关系，对于揭示应激性抑郁样行为发生的海马内机制具有重要意义。然而，目前对于应激性抑郁发生中海马GABAA受体表达有何变化，GABAA受体是否通过调节GABA水平及其自身表达量亦或通过调节Glu 水平及其NMDA受体和AMPA受体的表达而发挥抗抑郁作用等并不清楚。

为了解决上述问题，本研究建立慢性不可预见性温和应激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）抑郁模型，采用微量注射的方法分别向海马注射GABAA受体激动剂Muscimol、GABAA受体拮抗剂Bicuculline和AMPA受体拮抗剂NBQX，通过行为学检测，并结合高效液相色谱法（high-performance liquid chromatography，HPLC）和Western blot实验检测海马Glu、GABA水平及GABAA受体、NMDA受体和AMPA受体亚基表达变化，从而探讨慢性应激抑郁发生中GABAA受体的抗抑郁途径。实验结果如下：

1.慢性不可预见性温和应激能诱发大鼠表现出明显的抑郁样行为，且海马Glu水平升高，GABA水平降低，Glu/GABA比值显著升高，GABAA受体、NMDA受体NR2B亚基和AMPA受体GluR2/3亚基表达量均显著下降；

2.CUMS诱导的抑郁样行为可被海马注射GABAA受体激动剂Muscimol显著改善，且海马GABA水平显著升高，而GABAA表达量无显著性变化；正常大鼠海马微量注射GABAA受体拮抗剂Bicuculline表现出明显的抑郁样行为，海马GABA水平显著降低，而GABAA表达量无显著性变化；

3.CUMS大鼠海马注射GABAA受体激动剂Muscimol后，海马Glu水平虽有所下降，但不具显著性，NMDA受体NR2B亚基和AMPA受体GluR2/3亚基的表达量明显升高；正常大鼠海马微量注射GABAA受体拮抗剂Bicuculline后，海马Glu水平显著升高，NMDA受体NR2B亚基和AMPA受体GluR2/3亚基表达量均明显下降；

4. CUMS大鼠海马注射GABAA受体激动剂Muscimol使海马Glu/GABA比值显著下降，正常大鼠海马微量注射GABAA受体拮抗剂Bicuculline后，海马Glu/GABA比值显著升高。

5. AMPA受体拮抗剂NBQX能够减弱GABAA受体激动剂Muscimol的抗抑郁作用。

以上结果表明，海马GABA能神经系统和Glu能神经系统功能紊乱及二者之间的平衡失调均是CUMS诱发抑郁样行为的重要原因。慢性不可预见性温和应激引起海马GABA水平及GABAA受体表达下降，Glu水平升高及其NMDA受体NR2B亚基和AMPA受体GluR2/3亚基表达下降导致抑郁发生； GABAA受体激动剂Muscimol能够提高海马GABA水平，降低Glu/GABA比值，升高NMDA受体NR2B亚基和AMPA受体GluR2/3亚基的表达量，从而调节Glu能兴奋性系统和GABA能抑制性系统之间的平衡，发挥抗抑郁作用；GABAA受体激动剂Muscimol的抗抑郁作用部分经AMPA受体实现。