2017年华中科技大学生命科学与技术学院821生化与分子生物学之现代分子生物学考研冲刺密押题
● 摘要
一、名词解释
1． 转录单位（transcription unit）
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。
2． 无义突变（nonsensemutation ）
【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子（UAG 、UGA 、U 从）的突变，它使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽。
3． MissenseMutation
【答案】错义突变。错义突变是指DNA 分子中碱基对的取代，使得mRNA 的某一密码子发生变化，由它所编码的氨基酸基变成另一种的氨基酸，使得多肽链中的氨基酸序列也相应的发生改变的突变。
4． Non-Watson-Crickbasepairing
【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U，C-G 配对的一些碱基配对现象，如U-G 配对。
5． 密码子偏爱性（codon preference）
【答案】密码子偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率的现象。
6． SDS 电泳（SDS-PAGE ）
【答案】SDS 电泳（SDS-PAGE ）是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定pH （碱性） 缓冲系统中分离的方法，主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
7． 编码链（coding strand）
【答案】编码链是指DNA 双链中含编码蛋白质序列的那条链，与模板链互补，也称有义链（sensestrand ）或正链。其序列与信使核糖核酸相同，只是信使核糖核酸中的U （尿嘧啶）组成与
编码链中的T （胸腺嘧啶）组成相区别。
8． 核酶（ribozyme ）
【答案】核酶也称核糖酶、核酸类酶、酶RNA 、类酶RNA , 是指具有催化功能的RNA 分子，通过催化靶位点RNA 链中磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物RNA 分子，从而阻断基因的表达。
9． 断裂基因
【答案】断裂基因是指在真核生物结构基因中，编码某一个蛋白质不同区域的各个外显子并不连续排列在一起， 而常常被长度不等的内含子所隔离，形成镶嵌排列的断裂方式。所以，真核基因常被称为断裂基因。
10．Blue-white screening
【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都
携带一段来自大肠杆菌的
序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后，
整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补
活性蛋白质。由
互补而产生的操纵子DNA 区段，
其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息，这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完，产生完整 细菌在诱导剂的作用下，在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
二、简答题
11．假如你得到一个拟南芥突变体，表型是花发育不正常，但是发生突变的基因不属于所有已知的花参与花形态建成的基因，你如何研究这个基因在拟南芥花发育中的功能？你觉得这个问题有可能吗（即确实存在这样的 基因吗）？
【答案】（1）可能确实存在这样的基因，原因如下：
①这个基因可能是没有被发现的一个新的基因，所以目前尚未发现其同源基因。
②这个基因可能表达为花的发育过程中的某个信号通路因子。
（2）研究该基因的方法：
①克隆该野生型基因，然后转入突变体中看花的表型能否恢复。
②检测该基因的时空表达模式，以及表达产物在细胞中的定位，同时分析基因序列中是否包含有某些功能域， 以推测该基因的功能。
③找出与该基因表达的蛋白有相互作用的其他蛋白，以推测该基因的功能。
12．真核与原核生物基因转录有哪些差异?
【答案】真核与原核生物基因转录的差异有:
（1）RNA 聚合酶不同:原核生物只有一种RNA 聚合酶，而真核生物有3种以上RNA 聚合酶进行不同类型的转录，合成不同类型的的RNA ;
（2）初级转录产物不同:原核生物的初级转录产物大多是编码序列，而真核生物转录产物除了编码序列，还含有大量的内含子序列;
（3）转录后加工不同:原核生物的初级转录产物几乎无需加工就可直接作为翻译模板，而真核生物转录产物需经转录后加工，如剪接、修饰等，才能成为成熟的mRNA ;
（4）转录翻译的时序性不同:原核生物细胞中转录与翻译几乎是同步在细胞中进行，真核生物mRNA 的合成与蛋白质的合成则发生在不同的时空范畴内。
13．简述双脱氧链终止法进行DNA 测序的原理和方法。
【答案】（1）原理：双脱氧的核苷酸是人造的分子，这种分子糖环的基基团，而在天然分子中糖环的
互补配对原则是天然三磷酸核苷酸，用它的但是，若进入的核苷酸是双脱氧的，则由于
复制终止。
（2）方法：将待测序的单链DNA 的模板、引物、四种单脱氧碱基和DNA 聚合酶分成四管，在四管反应系 统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，只要双脱氧碱基掺入链端，该链就停止延长，链端掺入单脱氧碱基的片段
可继续延长。如此每管反应体系中便合成以共同引物为
脱氧碱基为
，根据片段
不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基）
片段的碱基排列顺序。
14．简述RNAi 原理以及在分子生物学领域应用的前景。
【答案】（1）基本原理
是利用双链小RNA 高效、特异性降解细胞内同源mRNA 从而阻断靶基因表达，使细胞
出现靶基因缺失的表型。
（2）的应用前景
主要是维持基因组稳定、抑制转基因表达和保护基因组免受外源核酸侵入。
①基因功能分析：
②信号传导通路研究；
③新的药物靶标的工具；
④基因治疗；
15．简述新一代测序各平台的优点和缺点及适用领域。
【答案】见表。
表 新一代测序平台的优缺点及应用
和碳上都没有了轻g 基连接。碳上有一个羟基。在DNA 复制过程中，新掺入的碱基按碱基磷酸基团同生长链的前一个核苷酸的没有羟基而影响下一个磷酸二酯键的形成，导致DNA 端，以双端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后，分四个泳道进行电泳，以分离长短端的双脱氧碱基，便可依次阅读合成
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