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2017年华南理工大学医学院878生物化学与分子生物学之现代分子生物学考研导师圈点必考题汇编

  摘要

一、名词解释

1. tmRNA

【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子,它兼具tRNA 和mRNA 的特点,在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体,在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上,一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息,一方面终止蛋白质的合成,释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。

2. SDS 电泳(SDS-PAGE )

【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。

3.

【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件,它位于特定的mRNA 区域,可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物,继而发生构象重排,影响mRNA 活性。

4. 等电聚焦

【答案】

等电聚焦 是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

5. Nonsence mutation

【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换,使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种,致使肽链的合成提前终止,肽链缩短,产生无活性的多肽片段的突变。

6. 阻遏蛋白

【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质,在一定条件下与DNA 结合,一般具有诱导和阻遏两种类型。

7. 反式作用因子

【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子,对基因表达发挥不同调节作用 (激活或抑制:)的各类蛋内质因子的总称,也称反式作用元件。

8. 转座子

【答案】转座子是指存在于染色体DNA 上可自主复制和移位的基本单位,介导遗传物质的重排,即转座。

9. 操纵子

【答案】操纵子是指原核生物基因中,多个功能上相关的结构基因串联排列在基因组序列中,构成信息区,连同上游启动区和操纵基因区及下游转录终止区一起构成的基因表达单位。

10.Transcriptome

【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ,即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。

11.Non-Watson-Crickbasepairing

【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U,C-G 配对的一些碱基配对现象,如U-G 配对。

12.顺式作用元件

【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。

二、简答题

13.转座作用有哪些遗传学效应?

【答案】(1)引起插入突变:各种IS 、Tn 转座子都可以引起插入突变。如果插入位于某操纵子的前半部分,就可以造成极性突变,导致该操作子的后半部分结构基因的表达失活。

(2)转座产生新的基因:如果转座子上带有抗药性基因,它一方面造成靶DNA 序列上插入突变,同时也使该位点产生抗药性。

(3)转座产生染色体畸变:当复制性转座发生在宿主DNA 原有位点附近时,往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组,引起DNA 的缺失或倒位。若同源重组发生在两个正向重复转座区之间,就导致宿主染色体DNA 缺失; 而当重组发生在两个反向重复转座区之间,则引起染色体DNA 倒位。

(4)转座引起生物进化:由于转座作用,使一些原来在染色体上相距甚远的基因组合到一起,构建成一个操纵子或表达单元,也可能产生一些具有新的生物学功能的基因和蛋白分子(如复合式转座子)。

14.说出免疫共沉淀实验的原理与过程,比较酵母双杂交技术和免疫共沉淀技术在研究蛋

白质相互作用方面的优缺点。 【答案】(1)免疫共沉淀

①优点

a. 参与相互作用蛋白是天然状态;

b. 蛋白的相互作用是在自然状态下进行的;

c. 分离得到的蛋白复合物是天然状态的。

②缺点

a. 灵敏度不高,检测不到低亲和力和瞬时的蛋白质-蛋白质相互作用;

b. 相互作用的蛋白质需要第三者来连接;

c. 方法存在冒险性,必须根据实验预测结果选择检测抗体,若预测不正确,实验就得不到结果。

(2)酵母双杂交系统

①优点

a. 不用纯化蛋白质等繁琐步骤;

b. 结果真实性高,其在活细胞中进行;

c. 检测灵敏度高,可检测存在于蛋白质之间的微弱的和瞬时作用;

d. 可分析不同部位、不同细胞蛋白,可采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA 文库来进行分析。

②缺点

a. 其蛋白间的相互作用定位于细胞核内,而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等不能在核内无法进行;

b. 某些辅助蛋白限制了某些细胞外蛋白和细胞膜受体蛋白等的研究;

c. 存在着“假阳性”。

15.简述乳糖操纵子的调控模型。

【答案】(1)基本组成部分

依次排列着

①启动子;

②阻遏基因;

③操纵基因;

④ 结构基因:依次编码半乳糖苷酶、半乳糖苷透性酶和

(2)调控过程

①乳糖的负控诱导

a. 乳糖不存在时,阻遏蛋白阻碍结合到操纵区,阻碍RNA 聚合酶与启动子P 的结合,下游结构基因无法转录。

硫半乳糖苷转乙酰基酶三种酶。