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一、名词解释

1． A 位点（aminoacylsite ，acceptor site）和 P 位点（peptidyl site）。

【答案】A 位点即氨酰基位点，是新掺入的氨酰是延伸中的肽酰

2． 剪接体

的结合位点。

等）和蛋白质因子（约100

的结合位点；P 位点即肽酰基位点，

【答案】

剪接体是指由小核

多种）动态组成识别RNA 前体的剪接位点并催化剪接反应的核糖核蛋白复合体。

3． DNA 损伤（DNAdamage ）。

【答案】DNA 损伤是指发生在DNA 分子上的任何化学改变。

4． 质粒（plasmid ）。

【答案】质粒是一种在细菌染色体以外的遗传单元，一般由环形双链DNA 构成，其大小从1 至

5． RNA interference （RNA 干扰）。

【答案】RNAinterferenceCRNA 干扰）即RNAi ，是指与靶基因同源的双链RNA 诱导的特异性转录后基因表达 沉默的现象，其作用机制是双链RNA 降解产生的小干扰RNA （siRNA ）与同源的靶mRNA 互补结合，导致mRNA 降解而抑制基因表达。RNAi 技术广泛用于基因功能研宄和重大疾病的基因治疗。

6． 卫星DNA （satdliteDNA ）。

【答案】是指真核细胞染色体DNA 经氯化铯密度梯度离心，其高度重复序列因组成不同而在主带旁自成一条或数条条带

7． 外周蛋白。

【答案】外周蛋白是指以非共价键结合于膜表面，可被高浓度的尿素、盐溶液洗脱的蛋白质。

8． 可逆沉淀反应。

【答案】可逆沉淀反应，又称不变性沉淀，是指在发生沉淀反应时，蛋白质虽已析出，但是其分子内部结构未发生显著变化，沉淀因素去除后，能再溶于原来的溶剂中的沉淀反应，如盐析作用。

二、问答题

9． 使用非变性凝胶电泳分离蛋白质时，蛋白质分子的大小、形状和电荷决定其在凝胶上的迁移率。而为何DNA 用限制性内切核酸酶切割得到线形的片段DNA 电泳时，决定其迁移率的主要是DNA 的大小，而与其形状、电荷无关？

【答案】电泳的DNA 通常用限制性内切核酸酶进行切割得到线性片段，因此DNA 的形状都是均一的。电荷对于DNA 也是恒定的，因为每一个核苷酸由于磷酸基团都有相同的电荷，因此DNA 具有均一的形状和荷质比，因此分离仅取决于DNA 分子大小，小片段电泳快，大片段电泳慢。

10．列举5种不同的能与tRNA 结合或相互作用的细胞成分。

【答案】（1）氨酰体的P 部位；

（3）细菌核糖体A 部位；

（4）核糖体，含有同tRNA 专一结合的A 部位，P 部位和E 部位； （5）mRNA , 它能通过密码子与反密码子间形成的碱基配对使氨酰

与mRNA 结合。

11．为什么凯氏定氮法只能粗略检测蛋白质含量? 请写出一种不増加设备的情况下就能排除杂氮的影响的方法？

【答案】凯氏定氮的原理是用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并被过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定 （16%）, 可由氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。该方法是测定化合物或混合物中总氮量 的一种方法，并且受到滴定等因素的影响，所以只能粗略检测蛋白质含量。

排除杂氮影响，可以把待处理样品溶解，溶解后用三氯乙酸沉淀蛋白质，测定沉淀部分可以排除杂氮的影响。

12．概述B 族维生素在糖代谢中的重要作用。

【答案】B 族维生素主要以辅酶形式参与糖代谢的酶促反应过程，当其缺乏时会导致糖代谢障碍。

（1）糖酵解途径，甘油醛-3-磷酸脱氢生成1，3-二磷酸甘油酸时需要维生素PP 参与； （2）糖有氧氧化，丙酮酸及旷酮戊二酸氧化脱羧需要维生素和硫辛酸参与；异柠檬酸氧化脱羧需要维生素

参与；

维生素

维生素PP 、泛酸

和真核生物

能同携带氨基酸的tRNA 结合，并在链延长时将其转运到

合成酶，它能同tRNA 结合并催化氨酰-tRNA 的合成；

能与起始氨酰

结合，并在翻译起始阶段将其插入到核糖

（2）细菌IF 2和真核生物

（3）磷酸戊糖途径，Glc-6-P 及6-磷酸葡萄糖酸脱氢需要维生素PP 参与；

（4）糖异生途径中需要维生素PP 及生物素参与。

13．有一段mRNA 为突变，使肽链变为：

（1）缺失发生在哪一个密码子中？ （2）原来的密码子中缺失的是哪一个碱基？ （3）野生型mRNA 中碱基顺序是怎样的？

（4）如果G 插入到缺失的碱基位置，那么这个mRNA 的顺序是什么？ 【答案】（1）首先根据氨基酸顺序排出野生型mRNA 可能的碱基序列： 氨基酸顺序：mRNA 喊基序列：

突变后从Thr 开始氨基酸顺序不同于野生型，说明从第二个密码子开始发生框移。 （2）突变后Thr 变为Pro , 而Pro 密码子为为ACC ，突变是由于第一位碱基A 缺失造成的。

（3）Thr 密码子A 的缺失导致框移突变第二个密码子变为CCU ，编码Pro ; 突变型中Ser 是由Phe 变来的，可据此推测出Phe 的密码子为UUC , 移码后变成UCA 。同理，可推断出野生型中编码He 的密码子为AUA , 移 码后变为编码Tyr 的UAU ; Trp唯一的密码子UGG 变为编码Gly 的GGN 。因此，野生型这一段mRNA 的序列为：AUGACCUUCAUAUGG 。

（4）A 缺失后在该位置插入G , 该序列变为：AUGGCCUUCAUAUGG ，它编码的氨基酸顺序为：

14．RNA 酶为什么只能水解RNA , 不能水解DNA?

【答案】RNA 酶是在一个碱性的微环境中发挥作用的酶，RNA 的磷酸酯易于被碱水解，这是因为RNA 的核糖上有产生核苷糖无

RNA

酶的

以便于从核糖催化，

提供质子生成嘧啶核糖

在碱的作用下形成磷酸三酯，而磷酸三酯极不稳定，随即水解，

核苷酸和

核苷酸。DNA 的脱氧核

作为碱，

作生成

环磷酸酯。该环磷酸酯继续水解产生

从而可以推断在野生型中编码Thr 的密码子

编码，原黄素能使这一段mRNA 发生单一碱基缺失推测：

不能形成碱水解的中间产物，故对碱有一定的抗性。

是通过广义酸碱进行催化作用。第一步生成环磷酸酯上除去一个质子，

与磷酸形成

一个

环磷酸酯

OH 。第二步打开环形磷酸环，

这些作用正相反

然后作为一种酸作为酸而

为碱，水分子进入提供一个质子给

磷酸产物。

给磷酸形成三角双锥结构，此物质在