2018年重庆大学创新药物研究院657药学综合之现代分子生物学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1． Transcriptome
【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。
2． 核酶（ribozyme ）
【答案】核酶也称核糖酶、核酸类酶、酶RNA 、类酶RNA , 是指具有催化功能的RNA 分子，通过催化靶位点RNA 链中磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物RNA 分子，从而阻断基因的表达。
3． 转录后加工（post-transcription processing）
【答案】转录后加工是指新合成的较大的前体RNA 分子，经过进一步的加工修饰，转变为具有生物学活性的、成熟的RNA 分子的过程，主要包括剪接、剪切和化学修饰。
4． Edman 降解（Edman degradation）
【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的，最初用于N 端氨基酸残基分析，现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术，
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应，切下与之反应的那个氨基酸残基，这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基，而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基，又可参加第二轮反应，如此重复，就可以测出n 个残基的顺序。
5． TATA 框
【答案】TA TA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp（真核）或-10bp （原核）的一段保守性较高的序列，控制转录起始的准确性和频率，因共有序列为TATAAAA 而得名。
6． MissenseMutation
【答案】错义突变。错义突变是指DNA 分子中碱基对的取代，使得mRNA 的某一密码子发生变化，由它所编码的氨基酸基变成另一种的氨基酸，使得多肽链中的氨基酸序列也相应的发生改变的突变。
7． 转录单位（transcription unit）
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基
因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。
8． 编码链（coding strand）
【答案】编码链是指DNA 双链中含编码蛋白质序列的那条链，与模板链互补，也称有义链（sensestrand ）或正链。其序列与信使核糖核酸相同，只是信使核糖核酸中的U （尿嘧啶）组成与编码链中的T （胸腺嘧啶）组成相区别。
二、简答题
9． 简述原核基因转录后调控的不同方式。
【答案】（1） mRNA 自身结构元件对翻译起始的调控
①起始密码子的突变会大大降低翻译效率；
②AUG 上游的一段非翻译区上SD 区域与起始密码子见的距离影响翻译效率；
③mRNA 的二级结构影响核糖体与mRNA 的结合，从而影响了翻译的效率。
（2）mRNA 稳定性对转录水平的影响
mRNA 分子被降解的可能性取决于它们的二级结构，mRNA 被降解翻译效率自然下降。 （3）调节蛋白质的调控作用
mRNA 特异性抑制蛋白则通过与核糖有些mRNA 编码的蛋白质可激活靶基因的翻译，相反，
体竞争结合 mRNA 分子来抑制翻译的起始。
（4）反义RNA 的调节作用
反义RNA 与特定的mRNA 互补配对来抑制mRNA 的翻译。
（5）稀有密码子对翻译的影响
由于细胞内稀有密码子的tRNA 较少，不易获得，因而延长了核糖体在mRNA 上行经的时间，从而降低了翻译的效率；
（6）重叠基因对翻译的影响
偶联翻译可能是保证两个基因产物在数量上相等的重要手段。
（7）翻译的阻遏
复制酶可以作为翻译阻遏物来调控蛋白质的合成。
（8）魔斑核苷酸水平对翻译的影响 魔斑核苷酸即分子，当细胞缺乏氨基酸时产生魔斑核苷酸，可在很大范围内做出如抑制核糖体和其他大分子合成的应急反应，活化某些氨基酸操纵子的转录表达，抑制与氨基酸转运无关的系统，活化蛋白水解酶等，以节省或开发能源，以渡过难关。
10．DNA 以何种方式进行复制? 如何保证DNA 复制的准确性?
【答案】（1）双链DNA 的复制大都以半保留方式进行的，即双螺旋的DNA 分子解螺旋后，分别作为模板，按照碱基互补配对原则，在DNA 聚合酶的作用下合成新的互补链，形成了两个
DNA 分子的DNA 复制方式。通过θ型、滚环型或D 环型等以复制叉的形式进行。
①线性DNA 双链的进行双向复制
线性DNA 在复制中，当RNA 引物被切除后，留下5' 端的部分单链DNA 不能为DNA 聚合酶所作用，使子链短于母链，因此，线性DNA 复制子末端的复制需要有下列特殊的机制:
a. 将线性复制子转变为环状或多聚分子。
b. 在DNA 末端形成发夹式结构，使该分子没有游离的末端。
c. 在某种蛋白质（如末端蛋白）的介入下，在真正的末端上启动复制。
②环状双链DNA 的复制
可分为θ型、滚环型和D 环型几种类型。
a. θ型
复制的起始点涉及DNA 双链的解旋和松开，形成两个方向相反的复制叉。从一个起点开始，同时向两个方向进行复制，当两个复制方向相遇时，复制就停止。
b. 滚环型
DNA 的合成由对正链原点的专一切割开始，是单向复制的一种特殊方式，在噬菌体中很常见。
所形成的自由5' 端被从双链环中置换出来并为单链DNA 结合蛋白所覆盖，使其3'-OH 端在DNA 聚合酶的作用下不断延伸。在这个过程中，单链尾巴的延伸与双链DNA 的绕轴旋转同步进行。
c.D —环型
单向复制的一种特殊方式，叶绿体和线粒体DNA 、采用这样的机制。双链环在固定点解开进行复制，但两条链的合成是高度不对称的，最初仅以一条母链作为新链合成的模板，迅速合成出互补链，另一条链则成为游离的单链环（即D 环）。
（2）维持DNA 复制准确性的因素:
①内因
a. 按碱基配对原则进行DNA 链的合成。
b.DNA 聚合酶对碱基的识别作用，有利于选择正确的碱基掺入引物末端。
c.DNA 聚合酶对底物的识别作用，可以先识别引物最后一个碱基是否正确，后识别掺入的dNTP 是否正确。
d.DNA 聚合酶具有3' →5' 外切酶的作用，可以校正阅读。
e.RNA 引物最终被切除，提高了复制准确性。
f. 复制完成后对错配碱基进行修复的酶系统。
②外因
a. 浓度对核苷酸还原酶活性的调控，确保细胞内四种dNTP 在浓度上的平衡;
b.Mn 2+和Mg 2+的比例等。
11．什么是DNA 的T m 值? 它受哪些因素的影响?
【答案】（1）DNA 的T m 值即DNA 的解链温度，是指DNA 在加热变性过程中，紫外光吸