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2018年中南民族大学生命科学学院847分子生物学之现代分子生物学考研基础五套测试题

  摘要

一、名词解释

1. 蛋白质组和蛋白质组学(proteomeandproteomics )

【答案】蛋白质组是指一个细胞或一个机体的基因所表达的全部蛋白质。

蛋白质组学是指着眼于研究并解析生物体整个基因组所有遗传信息的学科,旨在阐明生物体全部蛋白质的表 达模式与功能模式,从整体的角度分析,鉴定细胞内动态变化的蛋白质的组成、结构、性质、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间、蛋白质与大分子之问的相互作用与联系,揭示蛋白质的功能与细胞生命活动的规律等。

2. TATA 框

【答案】TA TA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp(真核)或-10bp (原核)的一段保守性较高的序列,控制转录起始的准确性和频率,因共有序列为TATAAAA 而得名。

3. 核酸分子杂交(hybridization )

【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA (或RNA )片段,按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术,杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间,也可在RNA 与DNA 链之间 形成。

4. Edman 降解(Edman degradation)

【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的,最初用于N 端氨基酸残基分析,现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术,

其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应,切下与之反应的那个氨基酸残基,这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基,而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基,又可参加第二轮反应,如此重复,就可以测出n 个残基的顺序。

5. 断裂基因

【答案】断裂基因是指在真核生物结构基因中,编码某一个蛋白质不同区域的各个外显子并不连续排列在一起, 而常常被长度不等的内含子所隔离,形成镶嵌排列的断裂方式。所以,真核基因常被称为断裂基因。

6. 感受态细胞(competent cell)

【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法(如CaCL 等化学试剂)的处理后,细

胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。

7. 拓扑异构酶(topoisomerase )

【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶,其作用机制是先切断DNA ,让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。

8. Non-Watson-Crickbasepairing

【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U,C-G 配对的一些碱基配对现象,如U-G 配对。

二、简答题

9. 解释下列非编码RNA (non-codingRNA )名词:

(1)核仁小RNA (small nucleolar RNA, snoRNA );

(2)干扰小RNA (small interfering RNA, siRNA );

(3)微RNA (microRNA , miRNA )

【答案】非编码RNA 是指不被翻译成蛋白质的RNA ,如tRNA , rRNA.snoRNA , siRNA , siRNA 等,这些RNA 不被翻译成蛋白质,但是参与蛋白质翻译过程。

(1)snoRNA 是一个与特性化的非编码RNA 相关的大家族,由内含子编码,已证明有多种功能:

①反义snoRNA 指导rRNA 核糖甲基化;

②snoRNA 与其它RNA 的处理和修饰有关,如核糖体和剪接体核小RNA , gRNA 等。

siRNA 是由Dicer (2)(RNAase III家族中对双链RNA 具有特异性的酶)加工而成,是siRISC 的主要成员,激发与之互补的目标mRNA 的沉默。siRNA 有如下特点:

①长度约在22nt 左右,是双链RNA ,依赖Dicer 酶的加工,是Dicer 的产物,所以具有Dicer 产物的特点;

②生成需要Argonaute 家族蛋白存在; 是RISC 组分;

③siRNA 合成是由双链的RNA 或RNA 前体形成的;

④siRNA 一般是人工体外合成的,通过转染进入人体内,是RNA 干涉的中间产物;

⑤植物体内也存在内源的siRNA ;

⑥在作用位置上,siRNA 可作用于mRNA 的任何部位,并与mRNA 完全互补;

⑦在作用方式上,siRNA 只能导致靶标基因的降解,即为转录水平后调控;

⑧siRNA 不参与生物生长,是RNAi 的产物,原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。 (3)miRNA 是含有茎环结构的miRNA 前体,经过Dicer 加工之后的一类非编码的小RNA 分子。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能, miRNA 被认为在调控发育过程中有重要作用。miRNA 的特点:

①广泛存在于真核生物中,是一组不编码蛋白质的短序列RNA ,它本身不具有开放阅读框架

(ORF );

②通常的长度为20~24nt,但在3' 端可以有1~2个碱基的长度变化;

3' 端为轻基,③成熟的miRNA5' 端有一磷酸基团,这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能RNA

的降解片段区别开来;

④多数miRNA 还具有高度保守性、时序性和组织特异性。

10.简述可诱导和可阻遏的基因调控方式的区别。

【答案】(1)可诱导调节是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下,由原来关闭的状态转变为工作状态,即在某些物质的诱导下使基因活化的机制。

在可诱导的系统中,操纵子只有在诱导物存在时才开放。存在诱导物时,它与阻遏物结合,使之变构不再与操纵子结合,从而开启操纵子。没有诱导物时,阻遏物结合在操纵子上阻止结构基因的转录。酶的诱导是分解途 径所特有的,诱导物就是酶的底物或者底物类似物。

(2)可阻遏调节是指一些基因平时都是开启的,处在产生蛋白质或酶的工作过程中,由于一些特殊代谢物 或化合物的积累而将其关闭,阻遏了基因的表达的机制。

在可阻遏系统中,操纵子被终产物所关闭。存在终产物时,它结合到阻遏物上,改变后者的构象,使其能结合到操纵子上,关闭操纵子。不存在终产物时,阻遏物不能结合到操纵子上,因此操纵子开放。酶的阻遏是合成代谢的特点。

11.RNA 的结构有哪些特点?

【答案】(1)RNA 含有核糖和嗜咤,与DNA 不同,一般为单链长分子;

(2)RNA 不是双螺旋结构,但可通过自身链的折叠,在局部形成双螺旋结构;

(3)RNA 中Α-U , G-C 配对,未配对的区域可形成突起,也可自由旋转,并由于RNA 碱基和核糖磷酸骨架之间的相互作用,可折叠成复杂的三级结构。

12.简述新一代测序各平台的优点和缺点及适用领域。

【答案】见表。

表 新一代测序平台的优缺点及应用