2018年中南民族大学生命科学学院847分子生物学之现代分子生物学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1． 密码子偏爱性（codon preference）
【答案】密码子偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率的现象。
2． Attenuator
【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时，RNA 合成终止，起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的，其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度，典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。
3． 突变
【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变，主要包括碱基的增添、缺失或改变等，染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。
4． 反式剪切（Trans-splicing ）
【答案】反式剪切是指一种保守的mRNA 加工机制，已经在包括原生动物和多细胞动物等多种生物体中发现。SL 反式剪切是反式剪切的一种，是将一段相对保守的剪切引导序列（SL ）加到
前体mRNA 的5' 端作为一个外显子，从而提高成熟mRNA 的稳定性，并且可能参与翻译的起始。
5． 双向电泳
【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。
6． 阻遏蛋白
【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质，在一定条件下与DNA 结合，一般具有诱导和阻遏两种类型。
7． 转座子
【答案】转座子是指存在于染色体DNA 上可自主复制和移位的基本单位，介导遗传物质的重排，即转座。
8． RNA 编辑（RNA editing）
【答案】RNA 编辑是指某些RNA ，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA 所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA 的变化。
二、简答题
9． 已知真核生物的核糖体由4种rRNA 和80多种不同的核糖体蛋白组成，为什么真核生物细胞内rRNA 的基因拷贝数远多于核糖体蛋白的基因？
【答案】一方面，细胞内的RNA 的半衰期比蛋白质要短得多，要行使功能必须有大量基因不断表达。另一方面，细胞内要合成蛋白质需要合成mRNA , 通过mRNA 翻译成蛋白原，而mRNA 可以经过核糖体阅读多次，所以只要一次转录就能产生大量同样的蛋白质，但rRNA 直接转录过来行使功能，无法一次转录产生大量同样的行使功能的rRNA 。一个mRNA 可以翻译多个核糖体蛋白，一个rRNA 只能自己构成核糖体成分。
10．请你谈一谈对“RNA 世界”假说的认识。
【答案】“RNA世界”假说是由美国哈夫大学学者W. Gilbert （吉尔伯特）1986年提出的。该假说认为RNA 可能是生命起源中最初初相生命大分子，初期的自我复制系统可能由RNA 单独构成。在40亿年前的太古代，地球上某些地方已经诞生了 RNA 自我复制系统一一 “RNA世界”，之后RNA 不但能与无机物合成，而且能与原始 地球上出现的蛋白质互相作用，迎来它们的共生
RNA 时代一 “RNA—蛋白质世界”，逐渐形成原始生命。接着以RAN 为模板合成DNA 和蛋白质，
又将大多数催化功能交给具有更高活性的蛋白质，将遗传物质传递功能交给了在化学性上更稳定的DNA 。
11．简述抗终止子的调控机制。
【答案】抗终止子是能够在特定位点阻止转录终止的一类蛋白质。依赖因子的终止子上游有抗终止信号，抗终
止蛋白、因子均能与RNA 聚合酶结合，但不能同时与之结合。在RNA 聚合酶到达终止子之前遇到抗终止序列， 抗终止蛋白与RNA 聚合酶结合，使得因子不能与RNA 聚合酶结合，从而不能终止RNA
的转录而形成抗终止效应。
12．鸟枪测序法的技术原理是什么？
【答案】鸟枪法测序的基本原理：随机挑选带有基因组DNA 的质粒做测序反应，然后在计算机的帮助下，运用一些基于图论的近似算法进行序列拼接。
13．什么是完全基因敲除和条件基因敲除？
【答案】（1）完全基因敲除
完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性；
（2）条件基因敲除
条件基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。
14．真核生物DNA 的复制在哪些水平上受到调控?
【答案】真核细胞DNA 的生活周期可分为4个时期:G 1, S , G 2和M 期。G 1是复制预备期，S 为复制期，G 2为有丝分裂准备期，M 为有丝分裂期。DNA 复制只发生在S 期，有3个水平的调控:
（1）细胞生活周期水平的调控
又称限制点调控，它决定细胞是停留在G 1还是进入S 期;
（2）染色体水平调控
它决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序在S 期进行复制;
（3）复制子水平的调控
它决定复制的起始与否，这种调控从单细胞生物到高等生物是高度保守的。
15．真核生物转录时mRNA 的Poly （A ）尾巴是如何加上的？
【答案】多聚A 尾的生成是多聚A 聚合酶的催化下，由ATP 聚合而成。但多聚A 尾形成并不是简单地加入A ， 而是先要在mRNA 前体的3' 末端11〜30核苷酸处有一段AAUAAA 保守序列，在U7-snRNP 的协助下识别， 由一种特异的核酸内切酶催化切除多余的核苷酸。随后，在多聚A 聚合酶催化下，发生聚合反应形成了:T 末端多聚A 尾。此过程中，RNA 为受体，ATP 为供体，需要Mg2+或Mna+及蛋白质参与作用。
16．tRNA 是如何转运活化的氨基酸至mRNA 模板上的？
【答案】（1）由于tRNA 的氨基酸臂上存在特定的识别密码可以为氨酰-A 合成酶所识别，在该酶的催化下， 将相应地氨基酸活化，形成氨酰tRNA （起始氨基酸为Met-tRNAf 或fMet-tRNAf ）。
（2）氨酰tRNA 结合GTP 的起始因子IF2-GTP （或延伸因子EF-Tu-GTT ）结合形成三元复合物。
（3）该氨酰tRNA 上的反密码子通过碱基互补配对的原则识别mRNA 上相应的密码子与起始复合物的P （A ）位点结合（只有第一个活化的氨基酸进入P 位点，链延伸过程中，氨酰tRNA 均进入A 位点），这样就将活化的 氨基酸至mRNA 模板上。
三、论述题
17．说说Gateway 大规模克隆技术原理及基本操作流程。
【答案】（1）基本原理
利用X 噬菌体进行位点特异性DNA 片段重组，实现不需要传统酶切连接过程，将基因快速克隆和载体间平行转移。