2017年黑龙江大学072分子生物学复试实战预测五套卷
● 摘要
一、名词解释
1．
【答案】即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization ），是指一种利用非放射性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
2． DNA 的甲基化（DNAmethylation ）
【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰，它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体，将胞嘧啶转变为
3． 基因组学 甲基胞嘧啶的一种过程。
【答案】基因组学是指研究生物基因组和如何利用基因的一门科学，研究目标是认识基因组的结构、功能及进化， 弄清基因组包含的遗传物质的全部信息及相互关系。
4． 分子伴侣（molecular chaperone）
【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解，如热休克蛋白。
5． Non-Watson-Crickbasepairing
【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U，C-G 配对的一些碱基配对现象，如U-G 配对。
二、简答题
6． 什么是逆转座子? 有什么特征?
【答案】（1）逆转座子是指转座过程中需要由RNA 为中介，通过DNA 先转录为RNA ，又反转录成DNA 而进行转座的一类转座元件。
（2）逆转座子的特征
①逆转座子的整体结构与整合的反转录病毒极为相似，其主要特征之一是在两端具有长的同向末端重复序列（LTR ），而两个末端的每一个末端又各具备一个倒转重复序列。LTR 主要携带有转录起始和终止信号以满足转录及转录后的RNA 作为中介通过反转录完成转座的需要。
②逆转座子含有内部编码区，编码反转录病毒的种群专一性抗原和多蛋白相类似的蛋白质，与反转录病毒的主要区别在于它小具备编码外壳蛋白的env 基因，囚而不具备感染能力。
③根据内部编码区中内切酶编码区和反转录酶编码区的位置不同，通常把植物逆转座子划分为两组:一组的内切酶编码区在反转录酶区的下游端，称为Ty3/gypsy型; 另一组内切酶编码区在反转录酶编码区的上游端，称为Ty/copia型。
7． 用YAC 系统制作DNA 文库时，一般插入片段的长度是多少（范围即可，用kb 表示）？
【答案】YAC 克隆载体上含有着丝粒、端粒、选择标记基因、自主复制等序列，可携带插入的大片段DNA （100〜 lOOOkb ）在酵母细胞中有效地复制，如同微小的人工染色体，是基因组研究的有用工具。
8． 简述反义RNA 的调控机制。
【答案】（1）反义RNA
反义RNA 是指mRNA 互补的RNA 分子，能与特定的mRNA 配对并改变mRNA 的构想，从而抑制mRNA 的翻译。
（2）调控机制
① 与结合；阻碍mRNA 的成熟及其在胞浆内转运；
②与起始密码子结合阻止转录的启动；
③与SD 编码区配对，阻止核糖体在mRNA 上的移动；
④ 激活RNase , 加速靶RNA 的降解。
9． 说出凝胶滞缓实验的原理与应用。
【答案】（1）基本原理
蛋白质可以与DNA 结合后将大大增加其相对分子质量，而凝胶电泳中DNA 朝正电极移动的距离与其相对 分子质量的对数成正比，因此，没有结合蛋白的DNA 片段跑得快，而与蛋白质形成复合物的DNA 由于受到阻 滞而跑得慢。
（2）应用
①用于研究与蛋白质相结合的DNA 序列的特异性；
②用于确定带有放射性标记的DNA 分子中与蛋白直接发生相互作用的关键性碱基。
10．什么是SD 序列？其功能是什么？
SD 序列是mRNA 中用于结合原核生物核糖体的序列，【答案】（1）是存在于原核生物mRNA
起始密码子AUG 上游7〜12个核苷酸处的一段富含嘌呤的碱基序列。
（2） SD 序列的功能
①SD 序列与16S rRNA3’端反向互补，将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。
②SD 序列与16S rRNA 序列互补的程度以及从起始密码子AUG 到嘌岭片段的距离也都强烈
地影响翻译起 始的效率。由于不同基因的mRNA 有不同的SD 序列，它们与16S rRNA的结合能力也不同，所以它们可以控制单位时间内翻译过程中起始复合物形成的数目，最终控制着翻译的速度。
11．试述RNA 生物合成的一般步骤及真核mRNA 的成熟加工过程。
【答案】（1） RNA 合成步骤：
①模板的识别。RNA 聚合酶结合到启动子序列上，结合部位DNA 双链局部解旋，形成转录泡；
②转录起始。合成RNA 链的最初2~9个核苷酸；
③转录延伸。RNA 聚合酶沿着DNA 分子链向前移动，解链区也随之移动，新生RNA 链不断增长并与模板 链在解链区形成RNΑ-DNA 杂合分子，其后DNA 恢复双螺旋；
④转录终止。RNA 聚合酶在Nus 因子等帮助下识别终止信号，释放聚合酶等转录相关蛋白。
（2）真核mRNA 成熟加工过程：
①新生mRNA 前体分子5端加上甲基化鸟苷酸帽，通常在转录完成前进行；
②RNA 聚合酶转录至终止信号处即有特异核酸内切酶将新合成的RNA 链切下，在3' 端加上一段polyA 尾；
③mRNA 的剪接，切除内含子并将外显子拼接；
④mRNA 内部还可发生甲基化，某些特殊情况下可保证mRNA 被重新编辑。
三、论述题
12．列举参与DNA 复制的酶和相关的蛋白质及其功能。
【答案】（1）DNA 聚合酶:以DNA 为模板，以四种dNTP 为底物，催化新链小断延长，合成起始时需要引物提供3'-OH 。此外，DNA 聚合酶还有核酸外切酶活性。
（2）解旋、解链两类:包括解链酶、拓扑异构酶和单链DNA 结合蛋白。
①解链酶:能使碱基对之间的氢键解开，每解开一对碱基，需消耗2个A TP 。
②拓扑异构酶:能松弛超螺旋，克服扭结现象。拓扑异构酶I 在不需A TP 的条件下，能断开DNA 、双链中的一股，使DNA 分子变为松弛状态，然后切口再封闭; 拓扑异构酶II 能同时断开DNA 双股链，使其变为松弛状态，然后再将切日封闭，在利用A TP 时，还可以变松弛状态的DNA 分子变为负超螺旋结构。
③单链DNA 结合蛋白:保持模板处于单链状态，便于复制，同时还可防止复制过程中单链模板被核酸酶水解。
（3）引发酶:是一种特殊的RNA 聚合酶，该酶以DNA 为模板，催化一段RNA 引物的合成，复制时在RNA 引物的3'-OH 末端加上脱氧三磷酸核昔。
DNA 连接酶:连接DNA 链3'-OH 末端和另一DNA 链的5'-P 末端，（4）使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA 链连成完整的链。