2018年湖北中医药大学临床医学院306西医综合之生物化学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1. 编辑
【答案】 编辑是指在基因转录产生的
编辑。 分子中,由于核苷酸的缺失、插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成不同于基因序列中的编码信息,
这种现象称为
2. 脂类(lipids )
3.
【答案】【答案】脂类是指脂肪、类脂及其衍生物的总称。 (半胱谷氨酰胺)是由谷氨酸的Y-羧基与半胱氨酸的a-氨基缩合而成,这与蛋白质分子中的肽键不同。
4. 基本氨基酸。
【答案】组成蛋白质的常见氨基酸有20种,又称组成蛋白质的基本氨基酸,除R 为氢原子(即甘氨酸)外都是L-氨基酸。
5. 内含子(intron )。
【答案】内含子(intron )是指外显子之间的非编码序列。大多数真核生物基因的编码序列中间插有非编码序列, 编码序列称为外显子(exon )。
6. 蛋白质的等离子点。
【答案】蛋白质的等离子点是指蛋白质在不含任何其他溶质的纯水中的等电点,即在纯水中蛋白质的正离子数等于其负离子数时的pH 。
7. 抑制剂。
【答案】抑制剂是指能使酶的某些必需基团或酶活性部位中的基团的化学性质改变,而降低酶的催化活性,甚至使酶的催化活性完全丧失的物质。
8. 翻译(translation )。
【答案】翻译是指以mRNA 为模板合成蛋白质的过程。
二、问答题
9. 用增加盐离子强度的方法,从指定的离子交换柱上洗脱下列蛋白质,指出它们被洗脱下来的先后顺序,并说明其理由:
(1)细胞色素c , 溶菌酶,卵清蛋白,肌红蛋白(阴离子交换柱);
(2)细胞色素c ,胃蛋白酶,脲酶,血红蛋白(阳离子交换柱)。
【答案】离子交换柱层析主要根据物质所带的电荷不同而予以分离。一个蛋白质带的负电荷越多,它与阴离子交换剂结合越紧密,而与阳离子交换剂的结合能力愈弱。
(1)细胞色素c 的pl=10.6,溶菌酶pl=11.0,卵清蛋白pl=4.6,肌红蛋白pl=7.0。所以洗脱的先后顺序为:溶菌酶、细胞色素c 、肌红蛋白、卵清蛋白(阴离子交换柱)。
(2)细胞色素c 的pl=10.6, 胃蛋白酶脲酶pl=5.0, 血红蛋白pl=6.8.所以洗脱的先后顺序为:胃蛋白酶、脲酶、血红蛋白、细胞色素c (阳离子交换柱)。
10.某核苷酸水溶液在通过比色皿时,测得260nm 处的吸光度
苷酸的摩尔吸光系数
【答案】求该核苷酸的浓度。
生成,又有释放的反应,注已知该核 11.写出在柠檬酸循环中(要求写出结构式):(1)既有
明催化反应的酶。(2)只有生成,没有释放的反应,注明催化反应的酶。
的【答案】(1)满足条件的反应有两个,即异柠檬酸脱氢酶催化异柠檬酸脱氢、脱羧转变为-酮戊二酸的反应,以及α-
酮戊二酸脱氢酶复合物催化-酮戊二酸脱氢、脱羧转变为玻珀酰
反应。
(2)满足条件的反只有一个,即苹果酸脱氢酶催化苹果酸氧化为草酰乙酸的反应。
12.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么?为什么
会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质?
【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射
大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这
性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。
(2)既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此,可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱,以吸附核糖核酸酶,然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
(3)考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带,而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开,可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
13.什么是变偶假说?
【答案】变偶假说又称摆动假说。Crick 认为tRNA 上的反密码子的第一个碱基和mRNA 上密码子的第三个碱基的配对要求不很严格(即摆动性,wobble )。在tRNA 的反密码子中,除A 、G 、C 、U 4种碱基外,还经常出现次黄嘌呤(I )。I 的特点是它与U 、A 、C 三者之间都可形成配对。此外,tRNA 反密码子上的G 、U 可分别与密 码子上的U 、C 和G 、A 配对。
14.下面是某基因中的一个片段:
(1)指出转录的方向和哪条链是转录模板
(2)写出转录产物的序列
(3)RNA 产物的序列与有意义链的序列之间有什么关系?
【答案】(1)转录从右向左进行,即沿模板(负链)
(负链)是转录模板。
(2)转录产物为
(3)RNA 产物的碱基序列与有意义链(正链)相同,唯一的区别是U 替了正链的T , 因此通常以正链(有 意义链)来表示基因。
15.丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂,试分析加入草酰乙酸为什么能解除该抑制作用?
【答案】竞争性抑制(如本例中的琥珀酸)可经由增加底物浓度而解除,草酰乙酸(或该循环中的其他中间代谢物)可通过梓檬酸循环转化为琥珀酸,故可解除丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用。
16.在经由柠檬酸循环途径被氧化之前,柠檬酸必须先异构化成异柠檬酸,为什么?
【答案】与异柠檬酸的二级醇羟基相比,柠檬酸的三级醇发生氧化反应要难得多,因而该异构化反应为其氧化脱羧提供了一条更容易的途径。
的方向进行。上面写的那条链