● 摘要
有关川芎嗪（Ligustrazine,Lig）在心肌上的作用靶点，目前研究结果不 尽一致。但有肯定的证据说明，Lig作用心肌细胞后均引起细胞内钙浓度变化，而 产生这种作用的生物学基础尚未完全阐明。有关细胞内游离钙浓度变化的机制， 主要有细胞外钙离子内流和细胞内肌质网/肌浆网中钙释放两种途径。临床研究表 明，Lig的药理作用与其阻断细胞膜钙通道有关，且有实验证实Lig对成年大鼠心 室肌L-型钙通道电流有明显的抑制作用，且呈浓度依赖性和电压依赖性。因此Lig 曾被称为“一种新的钙拮抗剂”。但也有人认为，Lig不具备典型的钙拮抗剂特点， 而对受体中介钙释放有抑制作用，而其具体机制仍不清楚。本实验试图从细胞内 钙离子浓度变化机制出发，用已有的受体工具药，揭示Lig在心肌上的作用靶点及 其作用机制。 实验中采用生物多导记录仪，测定了与Caˉ2+密切相关的大鼠离体乳头肌收缩 力（FC）和收缩速度（V）的变化；在激光共聚焦显微镜下动态扫描了细胞内荧 光强度变化，以平均荧光强度变化表示细胞游离钙浓度（[caˉ2+]_i,）的相对水平。实 验中主要选用5类受体的激动剂和/或阻断剂。分别为钙通道激动剂A23187, L- 型钙通道阻断剂维拉怕米；α_1-受体特异阻断剂甲磺酸酚妥拉明，激动剂去氧肾上 腺素；β_1-受体特异阻断剂阿替洛尔；血管紧张素受体1（AT_1R）阻断剂撷沙坦； 以及肌浆网上IP_3R阻断剂肝素钠。以未加任何药物的心肌FC,V或细胞平均荧光 强度为基值，观察Lig作用后，以及以上受体工具药预处理，再累加Lig后，心肌 心肌FC,V或细胞平均荧光强度的变化。 实验结果发现： 1. Lig（200μg/ml）对大鼠乳头肌FC和V均有负性作用。 2. Lig（200μg/ml）可拮抗a；一受体激动剂去氧肾上腺素价（30μmol/L）助升高心肌 FC和V的作用。 3.肌浆网上IP_3R阻断剂肝素钠（100μg/ml）部分阻断了Lig（200μg/ml）对乳 头肌FC和V的负性作用，表明Lig（200μg/ml）的药理作用与其阻断IP3R相关。 4. ATiR阻断剂撷沙坦（1×10ˉ-5mol/L）预先作用乳头肌并没有抑制Lig（200μ g/ml）对乳头肌FC和V的负性作用。说明Lig（200μg/ml）降低FC和V可能与AT_1R 无关。而撷沙坦（1×10ˉ-6 mol/L）却阻断了Lig（30μmol/L）降低[Caˉ2+]_i的作用，表 示AT_1R是Lig（30 μmol/L）降低[Caˉ2+]_i的一个途径。所以有关AT_IR是否为Lig在 心肌上的靶点还需进一步证实。 5.β_1-受体特异阻断剂阿替洛尔（1×10ˉ-6 mol/L）部分阻断了Lig（200μg/ml） 对乳头肌FC和V的负性作用，且阿替洛尔（900μmol/L）可拮抗Lig（30 μmol/L） 降低[Caˉ2+]_i的作用。说明β_1-受体是Lig作用的一个靶点。 6. Lig （30 μmol/L）可显著降低细胞内[Caˉ2+]_i。 7. Lig （30 μmol/L）阻断了钙通道激动剂A23187升高心肌[Caˉ2+]_i的作用，而 L-型钙通道阻断剂维拉怕米（40 μmol/L）可阻断Lig （30 μmol/L）降低[Caˉ2+]_i的作 用。表明Lig （30 μmol/L）降低[Caˉ2+]_i与其抑制钙通道有关，且在心肌中可能主要 通过抑制L型钙通道而起作用。 8. α_1-受体特异阻断剂甲磺酸酚妥拉明（1×10ˉ-5mol/L）可拮抗Lig（30 μmol/L） 降低[Caˉ2+]_i的作用，而Lig（30μmol/L）阻断了α_1-受体激动剂去氧肾上腺素（1 ×10ˉ-4mo1/L）升高肌[Caˉ2+]_i的作用。表明Lig（30μmol/L）降低[Caˉ2+]_i的作用与心 肌细胞表面α_1-受体有关。 本实验的结果表明，Lig可能通过抑制L-型钙通道、α_1-受体和β_1-受体等途 径减少[Caˉ2+]_i，从而引起FC和V降低。而L-型钙通道、α_1-受体和β_1-受体等本 身兴奋后，均可不同程度引起外钙内流及内钙释放。心肌中，少量外钙内流又是 肌浆网钙释放的动力。由此推测，Lig可能通过降低L-型钙通道、α_1-受体和β_1- 受体等靶点的兴奋性，阻断外钙内流。从而切断了内钙释放的动力源，进而依次 降低[Caˉ2+]_i、FC和V的。同时发现，Lig可拮抗肌浆网上IP_3R阻断剂肝素钠的作 用而降低[Caˉ2+]_i。表明Lig也可直接作用于钙库，阻止内钙释放。而有关AT_1R是 否为Lig在心肌上的靶点，有待进一步证实。因为收缩力和[Caˉ2+]_i；测定2个实验 中结果不一致。