● 摘要
红枣（Zizyhpus Jujuba dates）是鼠李科枣属植物枣树(Zizyhpus Jujuba Mill)的果实，是我国特有的果品之一，富含维生素、矿物质等多种营养素及环磷酸腺苷（cAMP）、齐墩果酸等生物活性物质。本试验利用冬枣核为试验材料，进行冬枣核类黄酮的提取分离研究，并对其抗氧化、抗肿瘤生物功能进行了初步探讨，以期为红枣的综合加工利用、为从废弃植物材料中提取生物活性成分提供参考。因此，开展本课题的研究，为丰富食品科学知识及促进红枣产业化发展均具有重要的意义。
主要试验结果如下:
1.乙醇提取及超声波辅助提取是提取冬枣核类黄酮的理想方法。乙醇提取冬枣核类黄酮的最佳工艺参数为：乙醇浓度60%、料液比1:20、提取温度80℃、提取时间2h、提取次数二次，冬枣核类黄酮的提取量为1321.75mg/100g。超声波辅助提取冬枣核类黄酮最佳工艺参数为：60%乙醇、料液比1:20、超声温度80℃、超声波功率250W、提取时间60min、提取次数二次，冬枣核类黄酮的提取量为1344.81mg/100g。NaOH提取和纤维素酶提取冬枣核类黄酮不能达到良好的提取效果。
2. 大孔吸附树脂AB-8对冬枣核类黄酮具有较好的吸附和解吸能力，是一种适用于冬枣核类黄酮吸附分离的树脂。其纯化冬枣核类黄酮工艺参数为:样液浓度0.1-0.5mg/mL、pH值4.5、流速1mL/min、洗脱剂60%乙醇水溶液、洗脱剂用量3.5BV。经该工艺得到的冬枣核类黄酮的纯度为26.2%。
3. 冬枣核类黄酮具有体外抗氧化活性。冬枣核类黄酮能够有效清除DPPH和超氧阴离子自由基，对DPPH和超氧阴离子自由基的清除率随着浓度的升高，清除能力逐渐增强。在5-25μg/mL浓度范围内，对DPPH自由基的清除率为42.7-81.1 %，其IC50为6.5μg/mL。在20-120μg/mL浓度范围内，对超氧阴离子自由基的清除率为5.3-77.2%，其IC50为78.0μg/mL。 冬枣核类黄酮对DPPH和超氧阴离子自由基清除率具量效关系。
4. 冬枣核类黄酮具有抗肿瘤活性。MTT试验表明，冬枣核类黄酮可不同程度的抑制鼠脑胶质瘤C6和人胃癌MKN—45细胞的生长，且呈明显的剂量依赖性，随着剂量的增加，抗肿瘤作用增强。冬枣核类黄酮和抗癌化疗药物MTX联合用药具有协同效应，可增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，减少化疗药物的使用剂量。在倒置显微镜下观察到经冬枣核类黄酮处理的鼠脑胶质瘤C6和人胃癌MKN—45细胞的密度明显降低，细胞形态发生改变，细胞出现挛缩，体积变小，出现细长突触，正常形态的细胞减少。细胞克隆形成试验进一步表明，冬枣核类黄酮具有抗肿瘤活性。