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一、名词解释

1． 同源重组（homologous recombination）

【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组，真核生物的非姐妹染色单体的交换，细菌的转化、转导和接合，噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。

2． 阻遏蛋白

【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质，在一定条件下与DNA 结合，一般具有诱导和阻遏两种类型。

3． DNA Fingerprint

DNA 指纹是指由于限制性酶切位点的改变或DNA 序列中重复序列等原【答案】DNA 指纹。

因，以及一些DNA 遗传标记的差异性，生物个体DNA 表现的个体间的差异，这些个体差异反映了个体的身份。利用DNA 指纹鉴定个体差异的技术为DNA fingerprinting，用于亲子鉴定。

4． 重组修复

【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处，再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程，因为发生在DNA 复制之后，又称复制后修复。

5． 核酸分子杂交（hybridization ）

【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质，使来源不同的DNA （或RNA ）片段，按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术，杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间，也可在RNA 与DNA 链之间 形成。

6． Molecular Bescons

【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针，利用荧光标记探针的碱基配对原理，通过观察探针荧光显示或淬灭的现象，确定目的基因的分子标记。

7． Telomerase

【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶，其中RNA 作为

模板序列，指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。

8． 转录单位（transcription unit）

【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。

二、简答题

9． 真核生物蛋白质的翻译后加工有哪些？

【答案】（1）信号肽的切除：蛋白质除游离于胞浆内发挥作用外，还有一部分要分泌到细胞外和定位于膜系统中起作用。每一需要运输的多肽都含有一段氨基酸序列，称为信号肽，引导多肽至不同的转运系统，到达目的地后，信号肽将被切除。

（2）二硫键的形成：在mRNA 分子中，没有胱氨酸的密码子，而不少蛋白质分子中含有胱氨酸二硫键，有的还有多个，且二硫键是蛋白质的功能基团，它是通过两个半胱氨酸的巯基氧化而成的，有的在切除肽段前就已经形成。

（3）蛋白质的折叠：肽链的折叠在肽链合成没有结束时就已经开始。核糖体可保护30〜40个氨基酸长的肽链，当肽链从核糖体中暴露后便开始折叠，使线形多肽呈现一定的空间结构。三级结构的形成几乎和肽链合成的终止同时完成。蛋白质的折叠是从N 端开始的。

（4）糖基化作用使多肽变成糖蛋白：糖蛋白中的糖苷键有两类，一类是肽链上天冬酰胺侧链上的N 原子与寡聚糖核之间构成N-糖苷键；另一类是肽链上丝氨酸、苏氨酸侧链上的氧原子与寡聚糖核之间构成的0-糖苷键。通常在糖蛋白上发现的寡聚糖核是五聚糖。寡聚糖核是通过长萜醇的磷酸酯被带到蛋白质上的。高尔基体能对糖蛋白进行进一步的修饰和调整。

（5）非末端氨基酸残基的修饰：丝氨酸、苏氨酸残基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸等的甲基化；谷氨酸和天冬氨酸的羧基化。

（6）末端修饰：真核生物多肽的N 末端都是甲硫氨酸，通常N 末端的第一个甲硫氨酸以及更多的N 末端氨基酸残基要被除去。真核生物多肽的N 末端残基还要进一步乙酰化，羧基端的再修饰也时有发生。

（7）前体修饰：有些蛋白质生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的，经过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子。

10．最初的宿主是猩猩，而猩猩与人类的基因组几乎完全相同。问为何

不同的危害？人类是否可借助猩狸抵御具有对的免疫

所以人体若感染则会终生携带，且

大量复制，产生大量的病毒颗粒，就会造成感染细胞死亡，引起一系列的

在这两种生物中有的方式防治？ 共存。而人类机体虽然也【答案】（1）因为猩猩体内可以对活病毒产生免疫应答，能与反应，但大多数情况下机体的免疫力不足以清除潜伏期不定，

一旦

病症。

（2）

人类借可以助猩猩抵御已有科学家

在建立相关的模型，用于HIV 的病理和免疫机理研究，以及抗HIV 药物试验和疫苗研制^

11．什么是完全基因敲除和条件基因敲除？

【答案】（1）完全基因敲除

完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性；

（2）条件基因敲除

条件基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。

12．简述真核细胞内核小体的结构特点。

【答案】核小体是染色体的基本结构单位，由DNA 和组蛋白构成。核小体的结构特点:

（1）每个核小体单位包括200bp 左右的DNA 和一个组蛋白八聚体以及一个分子的组蛋白H 1

（2）组蛋白八聚体构成核小体的核心颗粒，由H 2A. ，H 2B ，H 3和H 4各两个分子所形成。 （3）有146bp 的DNA 分子直接以左手方向盘绕在八聚体颗粒的表面，其余的DNA 片段连接相邻的核小体。

（4）一个分子的组蛋白H 1与DNA 结合，锁住核小体DNA 的进出口，从而稳定了核小体的结构。

13．蛋白质的方式防治因为猩猩的基因与人类的同源性很高。目前实验原理与主要步骤。

【答案】（1）实验原理

利用与GST 融合蛋白质探针蛋白质亲和结合，从可溶性蛋白质库中纯化一个未知蛋白质，再

通过GST 与谷 胱甘肽偶联的琼脂糖球珠的结合收集相互作用蛋白质，从而分离出蛋白质复合物。

（2）主要步骤

① GST 融合蛋白先与下列蛋白溶液之一孵育（a. 单一明确的重组蛋白；b. 细胞裂解蛋白混合液；c. 体外 翻译cDNA 表达得到的未知蛋白）；

②混合液与谷胱甘肽琼脂糖球珠在4°C 反应2h ，离心得沉淀；

③沉淀加入2 X蛋白Loading Buffer煮沸，离心，取上清进行SDS-PAGE 电泳；

④考马氏亮兰对SDS-PAGE 胶进行染色，观察特异沉降的蛋白带，接着进行质谱分析确定沉降的蛋白；

⑤电泳后的胶做Western Blot来确定沉降的蛋白中是否有目的蛋白。

14．什么是弱化作用？

【答案】弱化作用是一种转录翻译调控机制，核糖体沿着mRNA 分子的移动的速率决定转录是进行还是终止。如在操纵子中存在