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一、名词解释

1． Edman 降解（Edman degradation）

【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的，最初用于N 端氨基酸残基分析，现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术，

其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应，切下与之反应的那个氨基酸残基，这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基，而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基，又可参加第二轮反应，如此重复，就可以测出n 个残基的顺序。

2． DNA 解链温度（melting temperature, T m ）

【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。

3． 突变

【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变，主要包括碱基的增添、缺失或改变等，染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。

4． 双向电泳

【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。

5． 转座子

【答案】转座子是指存在于染色体DNA 上可自主复制和移位的基本单位，介导遗传物质的重排，即转座。

6． 等电聚焦

【答案】

等电聚焦 是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同，在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

7． 内含子（intron ）与外显子（exon ）

【答案】内含子（intron ）是指真核基因中的非编码序列，又称插入序列（IVS ），只转录，

在前体mRNA 加工时被剪切掉;

外显子（exon ）是指真核基因中的编码序列，是一个基因表达为多肤链的部分。

8． 单顺反子mRNA （monocistronic mRNA）和多顺反子mRNA （polycistronic mRNA）。

【答案】单顺反子mRNA 是指能翻译成一条肤链的信使核糖核酸（mRNA ）来自单顺反子; 多顺反子mRNA 是指两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸（mRNA ），多顺反子mRNA 一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。

9． 密码子偏爱性（codon preference）

【答案】密码子偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率的现象。

10．SDS 电泳（SDS-PAGE ）

【答案】SDS 电泳（SDS-PAGE ）是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定pH （碱性） 缓冲系统中分离的方法，主要用于测定蛋白质亚基分子质量。

二、填空题

11．SDS-PAGE 中，凝胶的单体为_____，_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷，肽链越长迁移速度越_____。

【答案】丙烯酰胺；甲叉双丙烯酰胺；负；慢

12．多肽翻译过程中，第一个被加入的氨基酸是_____。

【答案】甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸

【解析】作为多肽合成起始信号的密码子有两个：即甲硫氨酸的密码子（AUG ）和缬氨酸的密码子（GUG ） （极少出现）。在大肠杆菌中，起始密码子AUG 所编码的氨基酸并不是甲硫氨酸本身，而是甲酰甲硫氨酸，在真核生物中则是甲硫氨酸。

13．分子生物学的研究内容主要包含_____、_____、_____三部分。

【答案】DNA 重组技术; 基因表达调控研究; 生物大分子结构功能

【解析】分子生物学研究的四个方面:

（1）DNA 重组技术——基因工程技术;

（2）基因表达调控研究——核酸生物学;

（3）生物大分子结构功能——结构分子生物学;

（4）基因组、功能基因组与生物信急学研究。

14．证明DNA 是遗传物质的经典实验是Avery 的_____和Hershey 、Chase 的_____。

【答案】肺炎球菌在老鼠体内的毒性实验; T2噬菌体感染大肠杆菌实验

【解析】肺炎链球菌转化感染小鼠实验，得出转化因子是DNA 的结论; Hershey 的噬菌体侵

染细菌实验，进一步得出DNA 是遗传物质的载体的结论。

15．人线粒体基因组DNA 长度约为a._____kb，它所编码的基因按功能可分为b._____，e_____和d._____。

等三类。

【答案】17; rRNA基因；tRNA 基因；蛋白质基因

【解析】人线粒体基因组很小（16569bp ）, 仅能编码2种rRNA , 22种tRNA 和13种蛋白质。

16．真核基因表达的调控可以在五种水平上进行，这五个水平是：a._____、b._____ 、c._____、d._____和e._____ ，其中最终决定蛋白质寿命的主要调节途径是f._____ 。

【答案】转录前表达调控；转录水平的调节；转录后水平的调节；翻译水平的调节；翻译后水平的调节；翻译后水平的调节

【解析】基因表达是指遗传信息的转录和翻译过程，它受到不同水平的调节。由于真核生物基因不组成操纵 子，不形成多顺反子mRNA , 所以，真核生物的基因表达受到多级调控系统的调节。

（1）转录前水平的调节主要指染色体DNA 的断裂、删除、扩増、重排、修饰和异染色质化等改变基因结 构和活性的过程。

（2）转录水平的调节包括染色质的活化和基因的活化，增强子通过改变染色质DNA 的结构而促进转录„

（3）转录后水平的调节包括转录产物的加工和转运的调节；通过+同方式的拼接可产生不同的mRNA 。

（4）翻译水平的调节主要是控制mRNA 的稳定性和有选择地进行翻译。

（5）翻译后水平的调节主要控制多肽链的加工和折叠，通过不同方式的加工可产生不同的活性多肽；细胞蛋白质的寿命与其成熟蛋白质N 端的氨基酸有关。

三、简答题

17．简述基因定点突变的原理与实验过程。

【答案】（1）基本原理：通过聚合酶链式反应（PCR ）等方法向目的DNA 片段（可以是基因组，也可以是质粒） 中引入所需变化（通常是表征有利方向的变化），包括碱基的添加、删除、点突变等。目前，主要采用两种PCR 方法，重叠延伸技术和大引物诱变法，在基因序列中进行定点突变。

（2）实验过程

由采用的两种不同方法得到不同的实验过程

①重叠延伸技术

首先将模板DNA 分别与引物对（正向诱变引物FM 和反向引物R2）和2 （正向引物F2和反向诱变引物RM ）退火，通过和2反应扩增出两种靶基因片段；FMR2和RMF2片段在