2018年华中科技大学武汉光电国家实验室821生化与分子生物学之现代分子生物学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1． MissenseMutation
【答案】错义突变。错义突变是指DNA 分子中碱基对的取代，使得mRNA 的某一密码子发生变化，由它所编码的氨基酸基变成另一种的氨基酸，使得多肽链中的氨基酸序列也相应的发生改变的突变。
2． DNA 的甲基化（DNAmethylation ）
【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰，它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体，将胞嘧啶转变为
3． 重组修复 甲基胞嘧啶的一种过程。
【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处，再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程，因为发生在DNA 复制之后，又称复制后修复。
4． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。
二、填空题
5． 在分子生物学发展史上，两次获得诺贝尔奖的科学家是英国著名的_____，他的两项贡献分别是_____和_____。
【答案】Sanger ; 蛋白质序列分析; DNA 序列分析法
【解析】Sanger 利用纸电泳及层析技术首次阐明胰岛素的一级结构，开创了蛋白质序列分析的先河，获1958年诺贝尔化学奖; 1980年，Sanger 和Gilbert （英）设计出一种测定DNA 分子内核苷酸序列的方法，而获得诺贝尔化学奖。
6． 许多氨基酸都有多个密码子，除了_____只有一个密码子外，其余都有一个以上密码子。
【答案】色氨酸和甲硫氨酸
【解析】根据三个核苷酸组成一个密码子的原则，4种核苷酸可以组成64个密码子，其中UAA 、UAG 、UGA 为终止密码子，剩余61个代表20种氨基酸，除了色氨酸（UGG ）和甲硫氨酸（Met ）只有一个密码子以外，其余都有一个以上密码子。
7． PCR 反应主要有_____、_____和_____三个步骤。
【答案】变性；退火；延伸
【解析】PCR 反应是模仿生物体内DNA 的复制过程，典型的PCR 反应包括以下三个过程： （1）变性：双链DNA 在高温条件下（90〜95°C ）变成两条单链，作为DNA 复制的模板； （2）退火：单链DNA 在较低温度下（37〜60°C ）与引物互补结合，形成杂交双链结构； （3）延伸：升温至70〜75°C , 结合模板上的引物在耐热DNA 聚合酶的催化下按5' —3' 方向延伸，合成 模板DNA 的互补链。
重复以上过程经过多次循环就得到所需要的目的DNA 片段。
8． 真核生物的DNA 含有许多重复序列，按其复性快慢可分为_____、_____和_____3类。
【答案】高度重复序列; 中度重复序列; 不重复序列
【解析】根据DNA 复性动力学研究，真核生物的DNA 序列可以分为3种类型:
（1）不重复序列:在一个基因组中一般只有一个或几个拷贝，占DNA 总量的40%~80%，在复性动力学中对应于慢复性组分;
14（2）中度重复序列:往往分散在不重复序列之间，重复次数为10~10，占DNA 总量的
10%~40%，在复性动力学中对应于中间复性组分;
（3）高度重复序列（卫星DNA ）:由6~100个碱基组成，在DNA 链上串联重复成干上万次，占基因组的10%~60%，在复性动力学中对应于快复性组分。
三、简答题
9． 为什么真核生物中转录与翻译无法偶联？
【答案】真核生物mRNA 是在细胞核内合成的，而翻译是在细胞质中进行的，因此，mRNA 只有被运送到细胞质部分，才能翻译生成蛋白质。真核生物的mRNA 开始合成时，是不成熟的hnRNA , 需要通过一系列加工过程以后才能成为成熟的mRNA 。这些过程包括内含子的剪接、端加帽子结构、端加尾等。由于RNA 转录后需要一系列的加工过程，因此，转录与翻译无法偶联。
10．tRNA 是如何转运活化的氨基酸至mRNA 模板上的？
【答案】（1）由于tRNA 的氨基酸臂上存在特定的识别密码可以为氨酰-A 合成酶所识别，在该酶的催化下， 将相应地氨基酸活化，形成氨酰tRNA （起始氨基酸为Met-tRNAf 或
fMet-tRNAf ）。
（2）氨酰tRNA 结合GTP 的起始因子IF2-GTP （或延伸因子EF-Tu-GTT ）结合形成三元复合物。
（3）该氨酰tRNA 上的反密码子通过碱基互补配对的原则识别mRNA 上相应的密码子与起始复合物的P （A ）位点结合（只有第一个活化的氨基酸进入P 位点，链延伸过程中，氨酰tRNA 均进入A 位点），这样就将活化的 氨基酸至mRNA 模板上。
11．简述cDNA 文库的构建过程。
【答案】cDNA 文库是指以细胞的全部mRNA 逆转录合成的cDNA 组成的重组克隆群体。从cDNA 文库可以获 得较完整的连续编码序列（不含内含子），便于表达成蛋白质。构建CDNA 文库的主要步骤包括：
（l ） mRNA 分离；
（2）cDNA 第一链合成；
（3）cDNA 第二链合成；
（4）载体与cDNA 的连接；
（5）噬菌体的包装及转染；
（6）cDNA 文库的扩增和保存。
12．什么是弱化作用？
【答案】弱化作用是一种转录翻译调控机制，核糖体沿着mRNA 分子的移动的速率决定转录是进行还是终止。如在操纵子中存在
少，翻译通过两个相邻trp 密码子的速度慢，当4区被转录完（1） 低色氨酸浓度：
成时，核糖体 才进行到1区（或停留在两个相邻的Trp 密码子处），这时的前导区结构是2-3配
对，不形成3-4配对的终止结 构，所以转录可继续进行，直到将印操纵子中的结构基因全部转录。
（2）高色氨酸浓度：核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在4区被转录之前，核糖体就到达2区， 这样使2-3不能配对，3-4区可以自由配对形成茎-环状终止子结构，转录停止
，
合成终止。
13．导肽运送蛋白质时具有哪些特点?
【答案】线粒体、叶绿体中绝大多数蛋白质及过氧化物酶体中的蛋白质是在导肽或前导肽（leaderpeptide ）的指导下进入这些细胞器中。这些蛋白质在细胞质基质中合成以后再转移到这些细胞器中，因此称为翻译后转移。该转移方式的特点：
（1）需要受体；
（2）消耗ATP 使多肽去折叠；
（3）需要分子伴侣（如热激蛋白
（4）要电化学梯度驱动；
）帮助蛋白质正确折叠；