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一、名词解释

1． 表达载体（expression vector）。

【答案】表达载体是指为使插入的外源DNA 序列可转录，进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体。

2． 无效合成（abortive synthesis）。

【答案】无效合成是指原核生物转录起始过程中，在进入真正的转录延伸之前，RNA 聚合酶往往会重复催化合 成并释放短的RNA 分子，长度一般在6核苷酸左右的现象。

3． 变偶假说。

【答案】变偶假说是指克里克为解释tRNA 分子如何去识别不止一个密码子而提出的一种假说。假说以为，反密 码子的前两个碱基（端）按照碱基配对的一般规律与密码子的前两个（

端的碱基形成氢键时，则可端）碱基配对，然而tRNA 反密码 子中第三个碱基，

在与密码子上

有某种程度的变动，使其有可能与几种不同的碱基配对。

4． 复制子（replicon ）。

【答案】复制子是指能够独立的从复制起点到复制终点所包含的DNA 序列进行复制的基因组单位。

5． 蛋白质的等离子点。

【答案】蛋白质的等离子点是指蛋白质在不含任何其他溶质的纯水中的等电点，即在纯水中蛋白质的正离子数等于其负离子数时的pH 。

6．

易化扩散

【答案】易化扩散又称促进扩散，是指物质从高浓度到低浓度由载体蛋白（即转运蛋白）介导的跨膜扩散，是自然发生的，不需要加入能量，是一种被动转运。

7． 氧化磷酸化。

【答案】氧化磷酸化是指在底物脱氢被氧化时，电子或氢原子在呼吸链上的传递过程中伴随ADP 磷酸化生成A TP 的作用。氧化磷酸化是生物体内的糖、脂肪、蛋白质氧化分解合成A TP 的主要方式。

8． 神经节苷脂（gangliosides ）。

【答案】神经节苷脂是由神经酰胺和至少含有一个唾液酸残基的寡糖组成，寡糖链与神经酰胺Q 上的羟基以糖苷键相连，主要存在于大脑灰质和神经节细胞。

二、问答题

9． 什么是变偶假说？

【答案】变偶假说又称摆动假说。Crick 认为tRNA 上的反密码子的第一个碱基和mRNA 上密码子的第三个碱基的配对要求不很严格（即摆动性，wobble ）。在tRNA 的反密码子中，除A 、G 、C 、U 4种碱基外，还经常出现次黄嘌呤（I ）。I 的特点是它与U 、A 、C 三者之间都可形成配对。此外，tRNA 反密码子上的G 、U 可分别与密 码子上的U 、C 和G 、A 配对。

10．什么是第二信使学说？如果你在研宄某种激素的作用机理的时候，你得到一种小分子物质，你如何证明它是一种新的第二信使？

【答案】（1）第二信使学说：水溶性激素不能自由地通过细胞膜，它们的受体位于靶细胞的表面。当它们与靶细胞膜上相应的受体结合后，形成的激素和受体复合物通过某种手段激活定位在细胞膜内侧的特定的酶，从而导致某些小分子物质的合成。这些小分子物质被释放到细胞质中

之后可代替原来的激素行使功能。如果把激素本身看成是第一信使

的小分子物质可以看成是第二信使。

（2）如果发现一种新的小分子物质，可以根据以下几个标准判断它是否是一种第二信使：①这种小分子物质能否模拟所研宄的激素发挥作用；②抑制该小分子降解的物质是否能够延长激素的作用时间；③小分子物质的类似物能否模拟激素的作用。

11．大肠杆菌既可以通过光复活系统，也可以通过核苷酸切除修复系统来修复由紫外线照射产生的嘧啶二聚体，如何通过实验区分这两种机制？

【答案】切除修复需要将嘧啶二聚体切除掉，换上正常的胸苷酸，而光复活机制是通过光复

活酶直接破坏嘧啶二聚体的环丁烷环而修复嘧啶二聚体。因此可以用标记的胸苷追踪修复过程，如果出现在修复后的DNA 分子上，则修复的方式是切除修复，否则就是光复活机制。

12．怎样确定双向复制是DNA 复制的主要方式，以及某些生物的DNA 采取单向复制？

【答案】通过放射自显影方法，在复制开始时，

先用低放射性的

菌。经数分钟后，

再转移到含有高放射性的

制起始区的放射性

标记密度比较低，感光还原的银颗粒密度就较低；继续合成区标记密度较高，银颗粒密度也较高。对于枯草杆菌、某些噬菌体和高等真核细胞的染色体等许多DNA 来说，都是双向复制，所以银颗粒的密度分布应该是中间密度低，两端密度高；

而对于大肠杆菌噬菌体

那么，被合成标记大肠杆的培养基中继续标记。这样在放射自显影图上，复质体和真核细

胞线粒体等某些DNA 来说，复制是单向的，则银颗粒的密度分布应该是一端高、一端低。

13．天冬氨酸转氨酶的活性在肝脏转氨酶中最高的生理意义是什么？

【答案】

氨基酸脱氨基作用产生的氨是有毒的。但是动物的肝脏能够通过尿素的合成解除氨的毒害作用。尿素分子中的两个氨基，一个来自L-谷氨酸脱氢酶催化L-谷氨酸氧化脱氨基产生，另一个则直接来自天冬氨酸。而天冬氨酸则是由天冬氨酸转氨酶催化生成的：

由于以尿素形式而被排泄的氨的一半必须经过天冬氨酸转氨酶催化，所以天冬氨酸转氨酶的活性最高的意义就在于此。

14．简述酶的诱导契合学说的要点。

【答案】酶分子活性部位的结构原来并非和底物的结构互相吻合，但酶的活性部位不是刚性的结构，它具有一定的柔性。当底物与酶相遇时，可诱导酶蛋白的构象发生相应的变化，使酶活性部位上有关的各个基团达到正确的 排列和定向，因而使酶和底物契合而结合成中问产物，并引起底物发生反应。

15．流感病毒是一种常见病毒，为什么流感病毒感染人体细胞后不会导致细胞的转化

（transform ） ?

【答案】流感病毒是一种负链RNA 病毒，在其生活周期中不会出现可以稳定存在于宿主细胞中的DNA 分子形式，因此不会转化宿主细胞。

16．如果有某一突变导致肝细胞中葡萄糖-6-磷酸酶的失活，这对机体利用葡萄糖为能源会有何影响？

【答案】由于该突变会导致肝细胞不能将葡萄糖输入血液，则除非以食物方式提供，那些依

赖葡萄糖的组织将无法行使其正常功能；换言之，该突变将导致肝细胞失去调控血糖稳态的作用。

三、论述题

17．作为生物化学实验室的新手，进入实验室后，首先你需要几周的时间刷瓶子和试管等，然后逐渐开始学习配制各种缓冲液和试剂。接下来你要开始一个蛋白质的纯化实验。实验目的是分离

， 即位于线粒体基质的柠檬酸合成酶一种参与柠檬酸循环的酶。根据上述要求请设计这个实验（包

括实验的材料，主要的实验设备仪器和药 品，蛋白质分离纯化的技术原理，描述具体的实验步骤，最后对实验可能获得的结果进行分析）。

【答案】（1）选择一定重量的富含线粒体的材料（如动物心脏），加入预冷适

量

的磷酸缓冲液，放入组织捣碎机内匀浆。破坏细胞膜释放细胞器。

（2）利用细胞器的密度不同，将匀浆分步差速离心获得线粒体。

（3）将线粒体重悬于缓冲液中，用超声波破碎仪破坏线粒体膜。