2018年华中科技大学附属梨园医院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1. 增色效应和减色效应。
【答案】增色效应是指将DNA 的稀盐溶液加热时,双螺旋结构解体,两条链分开,形成无规则线团,260nm 紫外吸收值升高。减色效应是指变性的DNA 在适当条件下,可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构,260nm 紫外吸收值降低。
2. 糖的有氧氧化(aerobic oxidation)。
【答案】糖的有氧氧化是指葡萄糖或糖原在有氧条件下氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。
3. 氨基酸的等电点。
【答案】
氨基酸的等电点是指氨基酸所带净电荷为零时所处溶液的
4.
转移核糖核酸
以
代表。
【答案】转移核糖核酸是一类携带激活氨基酸,将它带到蛋白质合成部位并将氨基酸整合到生长着的肽链上的RNA 。tRNA 含有能识别模板mRNA 上互补密码的反密码。
5. 梓檬酸转运系统(citrate transport system)。
【答案】柠檬酸转运系统是指线粒体内的乙酰CoA 与草酰乙酸缩合成柠檬酸,然后经内膜上的三羧酸载体运至胞质中,在柠檬酸裂解酶催化下,需消耗A TP 将柠檬酸裂解回草酰乙酸,后者就可用于脂酸合成,而草酰乙酸经还原后再氧化脱羧成丙酮酸,丙酮酸经内膜载体运回线粒体,在丙酮酸羧化酶作用下重新生成草酰乙酸,这样就可又一次参与转运乙酰CoA 的循环。
6. 内含肽(inteinh
【答案】内含肽是指在蛋白质拼接过程中被切除的肽段。
7. 基因载体(gene vector)。
【答案】基因载体是指外源DNA 片段(目的基因)进入受体细胞时,依靠的一个能将其带入细胞内,并载着外源DNA —起进行复制与表达的运载工具。
8. 蛋白质四级结构。
【答案】蛋白质的四级结构是指蛋白质的亚基聚合成大分子蛋白质的方式。维系四级结构的
力有疏水作用、氢键、范德华力、离子键。
二、问答题
9.
螺旋的稳定性不仅取决于肽链内部的氢键,而且还与氨基酸侧链的性质有关。室温下,在
溶液中下列多聚氨基酸哪些能形成螺旋?哪些能形成其他有规则的结构?哪些能形成无规则的结构?并说明其理由。
(1
)多聚亮氨酸(2
)多聚异亮氨酸(3
)多聚精氨酸(4
)多聚精氨酸(5
)多聚谷氨酸(6
)多聚苏氨酸(7
)多聚羟脯氨酸
【答案】(1)多聚亮氨酸的R 基团不带电荷,
适合于形成螺旋。 (2
)异亮氨酸的碳位上有分支,所以形成无规则结构。 (3
)在(4
)在(5
)在
时,所有精氨酸的R 基团都带正电荷,正电荷彼此相斥,使氢键不能形成,所时,精氨酸的R 基团不带电荷,
并且碳位上没有分支,所以形成螺旋。 时,谷氨酸的R 基团不带电荷,
并且碳位上没有分支,所以形成螺旋。
以形成无规则结构。
(6)因为苏氨酸(3碳位上有分支,
所以不能形成螺旋。
(7)脯氨酸和羟脯氨酸折叠成脯氨酸螺旋,
这脯氨酸螺旋是不同于螺旋的有规则结构。
10.真核生物染色体的线性复制长度是如何保证的?
【答案】真核生物线性染色体的两个末端具有特殊的结构,称为端粒,它由许多成串短的重复序列组成,
具有稳定染色体末端结构、防止染色体间末端连接和补偿复制过程中滞后链引物RNA 被水解留下的空缺,
因端粒酶可外加重复单位到
末端上,以维持端粒的长度。
RNA 末端上,
末端
端粒酶是一种含有RNA 链的逆转录酶,它能以所含的RNA 为模板来合成DNA 的端粒结构。其中RNA 链 通常含有1个半拷贝的端粒重复单位的模板。端粒酶可结合到端粒的模板的
末端识别DNA
的
末端碱基并相互配对,以RNA 链为模板使DNA 链延伸,合成一
个重复单位后酶再向前移动一个单位。真核生物就是依靠端粒酶的这种爬行复制保证线性染色体的复制长度。
11.在时,
(1)在为
的水解反应可以写成:
分子上新形成的电离基团,其其中有多少来自
的电离?
为
若总的自由能
(2)
和
分子上末端磷酸的为和由末端磷酸衍生的无机磷酸,
其
为
该无机磷酸的电离是否对总的有影响?
值(2.3),因此,它的
也无影响。另
为12.5,
在
时基本不电离,
因此它对
【答案】(1)根据公式
:
来自
电离对
电离产生的自由能为影响。新形成的酸性基团
(2
)由于
末端磷酸中最强的酸性基团在水解前后具有相同的
的影响可用公式计算:
一个酸性基团水解后酸
可见,
无机磷酸的电离对总的
有影响,其中自由能来自于无机磷酸。
12.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条小的条带。这一次染色方法是什么?为什么
会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质?
【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。
(2)既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此,可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱,以吸附核糖核酸酶,然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
大小的
大
条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这
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