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2018年华中科技大学计划生育研究所306西医综合之生物化学考研基础五套测试题

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2018年华中科技大学计划生育研究所306西医综合之生物化学考研基础五套测试题(一) . ... 2

2018年华中科技大学计划生育研究所306西医综合之生物化学考研基础五套测试题(二) . ... 8

2018年华中科技大学计划生育研究所306西医综合之生物化学考研基础五套测试题(三) . . 15

2018年华中科技大学计划生育研究所306西医综合之生物化学考研基础五套测试题(四) . . 20

2018年华中科技大学计划生育研究所306西医综合之生物化学考研基础五套测试题(五) . . 26

一、名词解释

1. zinc finger。

【答案】Zincfinger (锌指结构)最早发现于转录因子TF^IA,为5SrRNA 基因转录所必需,是反式作用因子DNA 结合结构域中的一种基序结构,含一至多个重复单位。每一锌指单位约有30个氨基酸残基,

形成一个反向平行

基和

螺旋上两个组氨酸残基与

中,两个发夹,

随后是一个螺旋,由片层上两个半胱氨酸残螺旋上的氨基酸构成四面体配位结构。另一种类型是在其DNA 结合结构域锌簇,每个锌离子与四个半胱氨酸残基构成四面体结构。其中,

残基参与识别不同的DNA 。

2. 初级转录物(primarytranscripts )。

【答案】初级转录物是指基因转录的直接产物,一般没有功能,需要经历转炉后加工过程才能成为有功能的产物。

3. 肽键(peptidebond )。

【答案】

肽键是由一个氨基酸的

氨基与另一个氨基酸的羧基失水缩合而形成的酰胺键,是肽和蛋白质一级结构的基本化学键。

4. 分子伴侣(molecular chaperon)。

【答案】分子伴侣是指帮助细胞内大多数蛋白质正确折叠的特殊蛋白质。

5. 泛肽途径。

【答案】泛肽途径又称碱性系统,是指生物体内广泛存在的细胞内的蛋白降解系统,主要降解短寿命蛋白质和反常蛋白。

6. 肽链外切酶。

【答案】肽链外切酶是指从氨基端和羧基端逐一±也将肽链水解成氨基酸的酶类,包括氨肽酶和羧肽酶。

7. gel filtration chromatography。

【答案】gel filtration chromatography (凝胶过滤层析)是指利用具有一定孔径范围的多孔凝胶的分子筛作用对生物大分子进行分离的层析技术,即固定相的网孔对不同相对分子质量的样品

成分具有不同的阻滞作用,使之以不 同的速度通过凝胶柱,从而达到分离的目的。凝胶过滤又称“分子筛层析”和“凝胶排阻层析”。

8. 促进扩散。

【答案】促进扩散是指不需要消耗代谢能量,小分子物质利用膜两侧的电化学势梯度而通过膜上的载体蛋白或离子通道进行转运的方式。

二、问答题

9. 胰脱氧核糖核酸酶可以随机地水解溶液中的DNA 的磷酸二酯键,但是作用于染色体DNA 只能使之有限水解,产生的DNA 片段长度均为200bp 的倍数。请解释。

【答案】真核生物染色体DNA 含有核小体结构,核小体是由大约200bp 的DNA 双链围绕组蛋白核心组成的,彼此相连形成念珠状结构,即染色体DNA 。围绕组蛋白核心的DNA 不被DNaseI 水解,而核小体与核小体之间起连接作用的DNA

的磷酸二酯键对

约200bp 的DNA 片段。

10.什么是生物膜?研宄生物膜有何重要意义?

【答案】(1)生物膜是细胞质膜和细胞内膜系统的总称,生物膜是由极性脂和蛋白质组成的超分子复合物,厚约6〜10nm ,是构成细胞结构最基本的组分之一。

(2)真核细胞除了有把原生质与环境隔开的质膜外,还拥有复杂的细胞内膜系统,如核膜、内质网、高尔基体,线粒体膜、质体膜等。这些膜系统不仅是维持细胞内环境相对稳定的有高度选择性的半透性屏障,而且直接参与物质转运、能量转换、信息传递、细胞识别等重要的生命活动。细胞的形态发生、分化、生长、分裂以及细胞免疫、代谢调节、神经传导、药物和毒物的作用、生物体对环境的反应等,都与生物膜有密切的关系。因此,生物膜已经成为当前分子生物学,细胞生物学中最活跃的高科技研宄领域之一。

11.先用巯基乙醇处理胰岛素使其二硫键断开,再移除巯基乙醇让二硫键重新形成;如果A 、B 两条肽链可以经由一或两个二硫键连接,总共有多少种不同的连接方式?

【答案】A 、B 两链分别有4个和2

个通过一个二硫键将两链连接会有4×2=8种;形成两个二硫键连接则有4×3=12种,故总共有8+12=20种不同的连接方式。

12.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?

如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?

敏感,因此水解产生长

你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的

种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条

小的条带。这一次染色方法是什么?为什么

会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质? 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这

【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。

(2)既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此,可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱,以吸附核糖核酸酶,然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。

(3)考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带,而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。

为了将

的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开,

可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。

13.dUTPase 或DNA 连接酶活性有缺陷能够刺激重组的发生。为什么?

【答案】DNA 重组首先需要DNA 链发生断裂。如细胞内的dUTPase 活性有缺陷,则细胞内的dUTP 的浓度就比较高,在DNA 进行复制的时候,dUTP 代替dTTP 参入到子链中的可能性就大大提高,而细胞内碱基切除修复系统会识别错误参入的尿苷酸,在切除修复的时候,需要将DNA 链切开。显然dUTP 参入的机会越大,DNA 链 断裂的机会就越大,因而重组的可能性就提高。如果DNA 连接酶活性有缺陷,同样会使DNA 链断裂的机会提 高,所以同样能够刺激重组的发生。

14.—种纯酶按质量算含亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%,试计算其最低相对分子质量(亮氨酸和异亮氨酸的相对分子质量均为131)。

【答案】由于亮氨酸;

异亮氨酸

131—18=113。以亮氨酸为例计算有

对分子质量为

15.细胞的膜结构在代谢调节中起什么作用?

【答案】(1)控制跨膜离子浓度和电位梯度;

(2)控制细胞和细胞器的物质运输;

因此该纯酶至少含有2个亮氨酸和蛋白质相对分子质量,则该纯酶的最低相3个异亮氨酸;又因为这两种氨基酸的相对分子质量均为131,故其相应残基的相对分子质量为