2017年第四军医大学基础部分子生物学复试实战预测五套卷
● 摘要
一、名词解释
1． 重组修复
【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处，再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程，因为发生在DNA 复制之后，又称复制后修复。
2． 移码突变（frameshi Kmutation）
【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。
3． 反式剪切（Trans-splicing ）
【答案】反式剪切是指一种保守的mRNA 加工机制，已经在包括原生动物和多细胞动物等多种生物体中发现。SL 反式剪切是反式剪切的一种，是将一段相对保守的剪切引导序列（SL ）加到
前体mRNA 的5' 端作为一个外显子，从而提高成熟mRNA 的稳定性，并且可能参与翻译的起始。
4． DNA 解链温度（melting temperature, T m ）
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
5． Edman 降解（Edman degradation）
【答案】Edman 降解是指由P . Edman于1950年首先提出来的，最初用于N 端氨基酸残基分析，现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术，
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应，切下与之反应的那个氨基酸残基，这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基，而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基，又可参加第二轮反应，如此重复，就可以测出n 个残基的顺序。
二、简答题
6． 真核生物转录时mRNA 的Poly （A ）尾巴是如何加上的？
【答案】多聚A 尾的生成是多聚A 聚合酶的催化下，由A TP 聚合而成。但多聚A 尾形成并不是简单地加入A ， 而是先要在mRNA 前体的3' 末端11〜30核苷酸处有一段AAUAAA 保守序列，在U7-snRNP 的协助下识别， 由一种特异的核酸内切酶催化切除多余的核苷酸。随后，在多聚A 聚合酶催化下，发生聚合反应形成了:T 末端多聚A 尾。此过程中，RNA 为受体，A TP 为供体，需要Mg2+或Mna+及蛋白质参与作用。
7． 假如你得到一个据说通过改造并适合作为基因治疗载体的病毒，你将如何分析这种可行性？主要在哪些 方面做改造？你将如何测试改造后的病毒载体的效率和安全性？
【答案】（1）作为基因治疗载体的病毒的基本要求：
①能够感染多种生物的多种类型不同的细胞；
②易于改造并易于插入外源基因，能装配成病毒颗粒；
③能使外源基因完全整合到宿主细胞中，并且外源基因要有较高的表达水平；
④对人体安全。
（2）改造包括：
①改造病毒壳粒蛋白的抗原表位；
②减少病毒DNA 中非必需基因的表达；
③减少病毒载体的免疫反应及对细胞的毒性；
④改造所选择的目标基因的插入位点，便于目的基因的装载。
（3）测试病毒载体的效率与安全性：
①病毒载体的有效性表现在能够尽量多地将目的基因导入靶细胞并整合到宿主染色体上，因此可通过检测目的基因的含量来衡量。
②病毒载体的安全性表现在载体对细胞正常代谢的影响。因为病毒载体中可能产生有传染性、野型或辅助型 病毒，随机整合于宿主基因组中，活化癌基因或抑制癌基因失活；也有可能病毒载体自身编码的基因产物过度表达，引起细胞及机体不适的反应。
8． 原核与真核生物的核糖体组成有哪些异同点？
【答案】核糖体又称核蛋白体，由rRNA 和蛋白质组成，是指导蛋白质合成的大分子机器。原核与真核的核糖体 均由大小两个亚基组成。单核糖体有二个亚基，分别称为大亚基和小亚基。在原核细胞和真核细胞中核糖体的组 成见差异下表。
表
9． 生物体存在大量的mRNA 前体的选择性剪切过程。什么是选择性剪接，有几种方式?
【答案】（1）选择性剪接是指在mRNA 前体的剪接过程中，参加剪接的外显子可以不按其
线性次序剪接，内含子也可以不被切除而保留，即一个外显子或内含子是否出现在成熟mRNA 中是可以选择的一种剪接方式。此外，不同的启动子或不同的poly A加尾位点的选择，也可看作选择性剪接。
（2）选择性剪接的方式主要有4种:
①拼接产物缺失一个或几个外显子;
②拼接产物保留一个或几个内含子作为外显子的编码序列;
③外显子中存在5' 拼接点或3' 拼接点，从而部分缺失该外显子;
④内含子中存在5' 拼接点或3' 拼接点，从而使部分内含子变为编码序列。
10．简述原核生物和真核生物mRNA 的区别。
【答案】原核生物和真核生物mRNA 的区别表现在:
（1）特异性结构不同:真核生物的5' 端有帽子结构，大部分成熟的mRNA 还同时具有3' 一多聚A 尾巴，而原核生物一般没有这两种结构;
（2）编码能力不同:原核生物的mRNA 可以编码多个多肤，真核生物的只能编码一个; （3）顺反子类型不同:原核生物常以多顺反子的形式存在，真核一般以单顺反子形式存在; （4）起始密码子存在差异:原核生物一般以AUG 作为起始密码，有时以GUG , UUG 作为起始密码，真核几乎永远以AUG 作为起始密码;
（5）半衰期不同:原核生物mRNA 半衰期短，真核生物的mRNA 半衰期长;
（6）转录翻译的时序性不同:原核生物mRNA 的转录与翻译一般是同时进行的，而真核生物转录的mRNA 前体则需在转录后加工，成为成熟的mRNA ，且转录和表达发生在不同的时间和空间范围内。
11．用YAC 系统制作DNA 文库时，一般插入片段的长度是多少（范围即可，用kb 表示）？
【答案】YAC 克隆载体上含有着丝粒、端粒、选择标记基因、自主复制等序列，可携带插入的大片段DNA （100〜 lOOOkb ）在酵母细胞中有效地复制，如同微小的人工染色体，是基因组研究的有用工具。
三、论述题
12．何谓外显子，内含子及其结构特点和可变调控？
【答案】（1）定义
①外显子是指真核基因中能够编码蛋白质的序列；
rRNA 或tRNA ②内含子则是指存在于原始转录物或基因组DNA 中，但不存在于成熟mRNA 、
中的那部分 核苷酸序列。
（2）结构特点
①在大多数真核基因都是由外显子和内含子两部分交替排列而成的；
②外显子-内含子连接区有高度保守性和特异性碱基序列，几乎每个内含子端起始的两个碱