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题目:防己黄芪汤中生物碱及皂苷的质量控制及抗氧化、抑菌活性研究

关键词:防己黄芪汤,生物碱,皂苷,抗氧化活性,抑菌活性

  摘要


防己黄芪汤出自于张仲景的《金匮要略》首见于《痉湿病》篇,是固表益气、祛风利湿的经典良方。全方由防己、黄芪、白术、甘草四味药按照4:5:3:2的君臣佐使配伍理论而成,在临床应用中常加入生姜和大枣。李彦所著的《防己黄芪汤组方配伍探讨》一文中写道,从中医理论角度探讨可知,该方确是不可多得的良方。
研究证实防己黄芪汤具有抗炎、镇痛、利尿、降血脂、调整免疫、抗凝血、抗动脉硬化、减肥、抗辐射、抗急性肾功能损伤等作用。临床具体应用为风湿性心脏病、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、慢性肾炎、肺心病、急性肾炎、脚气水肿、肥胖病、荨麻疹、狐臭等。截至目前,防己黄芪汤的研究多见于药理药效及临床疗效观察方面,其物质基础成分研究尚且无人问津。鉴于上述情况,笔者就该方物质基础成分中的总生物碱、总皂苷的含量进行了系统测定,并对该方的抗氧化活性及抑菌活性进行了研究。
在防己黄芪汤的物质基础成分研究过程中,笔者建于余亚纲的复方系统研究三元设计方法及罗国安的有效部位群理论将该方中的总生物碱及总皂苷分为水溶性、醇溶性、脂溶性三大部分,并分别对其进行了含量测定,以期为该方的质量控制提供依据。实验数据表明,防己黄芪汤中脂溶性生物碱的可控含量为0.1509 g.ml-1,提取率仅为10.78%;而醇溶性生物碱的可控含量则达到0.5821 g.ml-1,提取率为41.58%;脂溶性皂苷的含量较低,为0.1444g.ml-1,提取率为10.31%;醇溶性皂苷的含量相对较高,为0.9318 g.ml-1,提取率为66.56%;水溶性皂苷则为0.5410g.ml-1,提取率为38.64%。
对于防己黄芪汤的体外抗氧化活性研究,笔者选用清除2,2一二苯代苦味阱DPPH自由基能力、还原能力、清除羟基自由基能力三种体系,并设计BHT为阳性对照。由实验结果可知,防己黄芪汤的三种极性提取物的清除DPPH自由基能力和还原能力均低于阳性对照BHT,但是在清除羟基自由基体系研究中,三种极性提取物的清除能力均大于阳性对照BHT,且水溶性提取物的清除率最为高,当质量浓度为0.0781mg.ml-1时,BHT阳性对照的清除率仅为85.50%,而醇溶性提取物的清除率为89.71%、脂溶性提取物的清除率为87.52%、水溶性提取物的清除率则达到94.13%;这表明防己黄芪汤具有良好的清除羟基自由基能力。
在防己黄芪汤的抑菌活性研究过程中,笔者选用了包括藤黄八叠球菌、白色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、肺炎链球菌、大肠杆菌、葡萄球菌等在内的9种菌种作为供试菌种,并选用青霉素、链霉素为阳性对照。由实验结果可知,脂溶性提取物的抑菌效果较另外两种极性提取物最强,尤其是对白色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、肺炎链球菌、藤黄八叠球菌等菌种,其抑制作用与青霉素、链霉素相当;水溶性提取物对藤黄八叠球菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、大肠杆菌的抑菌效果较差,对葡萄球菌的抑菌效果较好与链霉素相当;醇溶性提取物对除大肠杆菌外的另外八种菌均有抑菌作用,尤其是对白色葡萄球菌,其抑菌效果较链霉素强而弱于青霉素,由此可知,复方防己黄芪汤具有一定的抑菌作用。
    本文首次对防己黄芪汤的基础物质成分进行了含量测定,并对该方的抗氧化活性、抑菌活性进行了研究,旨在了解该方的物质基础成分及基础药效,为该方的临床用药提供参考,为该方的二次开发、新药研制奠定基础。