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2017年暨南大学医学院814普通生物学之现代分子生物学考研冲刺密押题

  摘要

一、名词解释

1. 转录后加工(post-transcription processing)

【答案】转录后加工是指新合成的较大的前体RNA 分子,经过进一步的加工修饰,转变为具有生物学活性的、成熟的RNA 分子的过程,主要包括剪接、剪切和化学修饰。

2. DNA 解链温度(melting temperature, T m )

【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。

3. SDS 电泳(SDS-PAGE )

【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。

4. 密码子偏爱性(codon preference)

【答案】密码子偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率的现象。

5. 转座子

【答案】转座子是指存在于染色体DNA 上可自主复制和移位的基本单位,介导遗传物质的重排,即转座。

6. 基因组学

【答案】基因组学是指研究生物基因组和如何利用基因的一门科学,研究目标是认识基因组的结构、功能及进化, 弄清基因组包含的遗传物质的全部信息及相互关系。

7. polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,能同时合成若干条蛋白质多肽链。

8. DNA Fingerprint

DNA 指纹是指由于限制性酶切位点的改变或DNA 序列中重复序列等原【答案】DNA 指纹。

因,以及一些DNA 遗传标记的差异性,生物个体DNA 表现的个体间的差异,这些个体差异反映了个体的身份。利用DNA 指纹鉴定个体差异的技术为DNA fingerprinting,用于亲子鉴定。

9. 操纵子

【答案】操纵子是指原核生物基因中,多个功能上相关的结构基因串联排列在基因组序列中,构成信息区,连同上游启动区和操纵基因区及下游转录终止区一起构成的基因表达单位。

10.分子伴侣(molecular chaperone)

【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解,如热休克蛋白。

二、填空题

11.基因的分子生物学定义是:_____。

【答案】基因是产生一条多肤链或功能RNA 分子所必需的全部核苷酸序列。

12.研究蛋白质相互作用可以采用_____、_____、_____等方法。

【答案】酵母双杂交;免疫共沉淀;噬菌体展示

13.原核生物中的释放因子有三种,其中RF-1识别终止密码子_____、_____; RF-2识别_____、_____;真核中的释放因子只有_____一种。

【答案】UAA ; UAG; UAA; UGA; RF

14.含HTH 的DNA 结合蛋白多以_____结构插入DNA 双螺旋的_____以识别DNA 的特定序列。

【答案】a 螺旋;大沟

,近羧【解析】这一类蛋白质分子中有至少两个螺旋,中间由短侧链氨基酸残基形成“转折”

基端的

螺旋中氨基酸残基的替换会影响该蛋白质在DNA 双螺旋大沟中的结合。与DNA 相

互作用时,同源域蛋白的第 一、二两个螺旋往往靠在外侧,其第三个螺旋则与DNA 大沟相结合。

15.用于基因克隆载体的质粒都具有_____、_____和_____三种必需条件。

【答案】复制区;选择标记;多克隆位点

16.PCR 反应主要有_____、_____和_____三个步骤。

【答案】变性;退火;延伸

【解析】PCR 反应是模仿生物体内DNA 的复制过程,典型的PCR 反应包括以下三个过程: (1)变性:双链DNA 在高温条件下(90〜95°C )变成两条单链,作为DNA 复制的模板; (2)退火:单链DNA 在较低温度下(37〜60°C )与引物互补结合,形成杂交双链结构; (3)延伸:升温至70〜75°C , 结合模板上的引物在耐热DNA 聚合酶的催化下按5' —3' 方向延伸,合成 模板DNA 的互补链。

重复以上过程经过多次循环就得到所需要的目的DNA 片段。

三、简答题

17.假设某哺乳动物基因可能编码了脂肪酸脱氢酶,请在酵母细胞中设计试验研究该基因的功能。

【答案】(1) PCR 扩増哺乳动物该基因,接着对其进行克隆;

(2)将克隆完成的目的基因片段插入到酵母表达载体的相应启动子下;

(3)把构建好的携带目的基因的表达载体转化到酵母脂肪脱氢酶突变体中,观察结果。 脂肪酸脱氢酶突变体中,代谢活动异常,脂肪酸脱氢酶涉及的代谢反应终止,当含该基因的表达载体转化突变体后,相应代谢途径的生化反应恢复正常即说明该基因编码了脂肪酸脱氢酶,并执行了相应的功能。

18.简述P53基因“基因卫士”的功能。

【答案】p53基因是位于17号染色体,编码53kDa 的多肽,活性形式为同源四聚体。人类肿瘤中50%〜60%发 现有该基因的突变,一般是一对等位基因中的一个发生错义突变,造成蛋白质中单个氨基酸残基的替换。突变后的p53蛋白不仅自身失去功能,而且还能与野生型等位基因的产物正常的P53蛋白聚合成无功能的四聚体。p53蛋白是在各种组织中普遍存在的转录因子,当DNA 受到损伤时,引起p53蛋白半衰期延长和p53蛋內 活化,p53蛋白水平升高。P53蛋白活化后,可以激活靶基因的转录,其中一个重要的靶基因是期细胞周期抑制物p21,另一个是DNA 修复蛋白,因而使DNA 受损的细胞不再分裂,修复损伤而维持基因组的稳定。p53的另一个功能是促进细胞凋亡。所以该蛋白通过阻止DNA 受损细胞进入细胞周期,完成修复以及促进凋亡两条途径,使细胞周期停滞,起稳定基因组和抑制突变细胞产生的作用,从而抑制肿瘤发生。

19.真核生物蛋白质的翻译后加工有哪些?

【答案】(1)信号肽的切除:蛋白质除游离于胞浆内发挥作用外,还有一部分要分泌到细胞外和定位于膜系统中起作用。每一需要运输的多肽都含有一段氨基酸序列,称为信号肽,引导多肽至不同的转运系统,到达目的地后,信号肽将被切除。

(2)二硫键的形成:在mRNA 分子中,没有胱氨酸的密码子,而不少蛋白质分子中含有胱氨酸二硫键,有的还有多个,且二硫键是蛋白质的功能基团,它是通过两个半胱氨酸的巯基氧化而成的,有的在切除肽段前就已经形成。

(3)蛋白质的折叠:肽链的折叠在肽链合成没有结束时就已经开始。核糖体可保护30〜40个氨基酸长的肽链,当肽链从核糖体中暴露后便开始折叠,使线形多肽呈现一定的空间结构。三级结构的形成几乎和肽链合成的终止同时完成。蛋白质的折叠是从N 端开始的。

(4)糖基化作用使多肽变成糖蛋白:糖蛋白中的糖苷键有两类,一类是肽链上天冬酰胺侧链上的N 原子与寡聚糖核之间构成N-糖苷键;另一类是肽链上丝氨酸、苏氨酸侧链上的氧原子与寡聚糖核之间构成的0-糖苷键。通常在糖蛋白上发现的寡聚糖核是五聚糖。寡聚糖核是通过长萜醇的磷酸酯被带到蛋白质上的。高尔基体能对糖蛋白进行进一步的修饰和调整。