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2018年湖北省培养单位武汉物理与数学研究所610分子生物学之现代分子生物学考研基础五套测试题

  摘要

一、名词解释

1. 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)

【答案】聚合酶链式反应,简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 (包括分离)一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补,经过模板DNA 变性,模板DN Α-引物的配对,在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应,三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链,经多次循环后得到大量目标DNA 片。

2. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

3. DNA 解链温度(melting temperature, T m )

【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。

4. 反式作用因子

【答案】反式作用因子是指通过直接结合或间接作用于DNA 、RNA 等核酸分子,对基因表达发挥不同调节作用 (激活或抑制:)的各类蛋内质因子的总称,也称反式作用元件。

5.

【答案】即荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization ),是指一种利用非放射性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合

起来,通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。

6. polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,

能同时合成若干条蛋白质多肽链。

7. Blue-white screening

【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都

携带一段来自大肠杆菌的

序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后,

整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补

活性蛋白质。由

互补而产生的操纵子DNA 区段,

其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息,这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完,产生完整 细菌在诱导剂的作用下,在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。

8. Molecular Bescons

【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针,利用荧光标记探针的碱基配对原理,通过观察探针荧光显示或淬灭的现象,确定目的基因的分子标记。

9. TATA 框

【答案】TA TA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp(真核)或-10bp (原核)的一段保守性较高的序列,控制转录起始的准确性和频率,因共有序列为TATAAAA 而得名。

10.Gene Family

【答案】基因家族。基因家族是指一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因,可能由某一共同祖先基因(ancestral gene )经重复和突变产生。基因家族的成员可以串联排列在一起,形成基因族(gene cluster)或串联重复基因(tandemly repeated genes),如rRNA 、tRNA 和组蛋白的基因;有些基因家族的成员也可位于不 同的染色体上,如珠蛋白基因;有些成员不产生功能产物,这种基因称为假基因(Pseudogene )。

二、填空题

11.人线粒体基因组DNA 长度约为a._____kb,它所编码的基因按功能可分为b._____,e_____和d._____。

等三类。

【答案】17; rRNA基因;tRNA 基因;蛋白质基因

【解析】人线粒体基因组很小(16569bp ), 仅能编码2种rRNA , 22种tRNA 和13种蛋白质。

12.原核生物同源重组时,RecBCD 蛋白具有_____、_____、_____的活性。

【答案】核酸外切酶; 解旋酶; A TP 酶的活性。

RecB 、RecC 和RecD 三者构成在原核生物同源重组中的功能单位RecBCD 蛋白复合【解析】

物,它是一个多功能的酶系,具有依赖于ATP 的单链和双链DNA 外切酶的性质,因此又称为外切核酸酶V 能利用水解A TP 释放的能量使线型DNA 解旋,此外还呈现序列特异性的DNA 单链内切酶活性。

13.第一个被解析出晶体结构的蛋白是_____。

【答案】胰岛素

14.真核基因表达的调控可以在五种水平上进行,这五个水平是:a._____、b._____ 、c._____、d._____和e._____ ,其中最终决定蛋白质寿命的主要调节途径是f._____ 。

【答案】转录前表达调控;转录水平的调节;转录后水平的调节;翻译水平的调节;翻译后水平的调节;翻译后水平的调节

【解析】基因表达是指遗传信息的转录和翻译过程,它受到不同水平的调节。由于真核生物基因不组成操纵 子,不形成多顺反子mRNA , 所以,真核生物的基因表达受到多级调控系统的调节。

(1)转录前水平的调节主要指染色体DNA 的断裂、删除、扩増、重排、修饰和异染色质化等改变基因结 构和活性的过程。

(2)转录水平的调节包括染色质的活化和基因的活化,增强子通过改变染色质DNA 的结构而促进转录„

(3)转录后水平的调节包括转录产物的加工和转运的调节;通过+同方式的拼接可产生不同的mRNA 。

(4)翻译水平的调节主要是控制mRNA 的稳定性和有选择地进行翻译。

(5)翻译后水平的调节主要控制多肽链的加工和折叠,通过不同方式的加工可产生不同的活性多肽;细胞蛋白质的寿命与其成熟蛋白质N 端的氨基酸有关。

15.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接,这是因为天然染色体的末端存在_____结构。

【答案】端粒

三、判断题

16.诱变技术为研究酶的结构与功能提供了有力途径。( )

【答案】对

【解析】定向诱变手段一般为定点突变等。

17. 动物细胞中线粒体有自己的基因组,其编码基因可以在线粒体中完成转录和翻译过程。( )

【答案】错

【解析】线粒体内基因的转录可以在线粒体内完成,但是翻译有一部分只能在线粒体外完成,