题目：水温与雌二醇对大鲵生长和性腺分化的影响

大鲵（Andrias davidianus）是我国特有的有尾两栖动物，也是世界现存两栖类中体形最大、寿命最长的古老动物，素有“活化石”之称。学者们虽然在形态、分类、生态、行为、发育、遗传、生理、生化、保护、养殖与疾病等多个学科领域对大鲵进行了研究，但有关不同水温与不同浓度的外源雌二醇对其生长发育及其性腺分化的影响，以及性腺分化后芳香化酶在精巢及卵巢内的表达情况，迄今还未见有相关报道。本文采用解剖学、组织学与免疫组织化学技术，对大鲵的性别决定及其机制进行了定性、定量及实验研究，旨在定向诱导大鲵性腺分化尤其向雌性分化，筛选出定向培育雌鲵的最佳水温、时间及雌二醇处理浓度。通过测定雌、雄大鲵性腺中芳香化酶的表达量，旨在探寻雌雄大鲵性腺中芳香化酶分布及其表达量的差异，进而初步探讨芳香化酶表达情况在大鲵性腺分化中的可能作用机制。对这些问题进行深入地研究和回答，对于解决人工养殖中大鲵性别比例严重失调问题、促进大鲵这个新兴产业可持续健康发展等具有重要的实践价值，对于了解大鲵性别分化机制、使这个古老物种得以种族延续、种质资源得到有效保护等也具有重要的理论意义。

主要研究结果及结论如下：
1. 水温与外源雌二醇对大鲵生长的影响。大鲵在3个不同水温梯度条件下，生长速度差异极显著（P＜0.01），高水温组大鲵的生长最快，中水温组次之，自然河道水温组下生长最慢。在中水温条件下，雌二醇处理对大鲵生长有一定的促进作用，在高水温条件下，雌二醇对大鲵生长具有一定的抑制作用，且雌二醇处理时间越长，抑制作用越强，处理剂量越大抑制作用也越大。
2. 水温与外源雌二醇对大鲵性腺分化的影响。①在出膜约240 d时，中水温组的大鲵生殖腺均未分化，而高水温组的大鲵卵巢已经明显分化为皮质和髓质，精巢内已经有较为明显的生精小叶及其腔隙、精巢间质，表明在大鲵适宜生活水温范围内，较高水温能促进大鲵生殖腺的分化，使其分化时间明显提前。此外，出膜时间基本相同的大鲵，体重相对大的一般为雄性，体重相对小的一般为雌性。②高水温条件下的清水组，雌性率为50.0%；高水温条件下用雌二醇处理40 d、E2A组的雌性率为87.5%，E2C组的雌性率达100%，表明在高水温条件下，大鲵性腺的分化易受外源雌二醇的影响，在一定剂量雌二醇诱导下，大鲵性腺能够全部分化为雌性。

3. 本文认为，在大鲵性腺分化的敏感期，用适当浓度的外源雌二醇处理大鲵幼苗，同时适当提高培育温度，既能大幅度提高雌鲵比例，又能加快大鲵生长发育的速度。

4. 雌性大鲵培育较为理想的方案。依据使幼鲵“雌性比例高、生长速度快”的原则，经过综合分析，本文认为较为理想的雌性大鲵培育方案应该同时满足如下条件：①雌二醇开始处理时间在大鲵出膜后的性别分化敏感期；②培育水温保持在高水温；③雌二醇处理浓度使用E2A。

5. 芳香化酶在大鲵性腺中的表达。在出膜约240 d或380 d时，大鲵卵巢与精巢组织中均有芳香化酶的阳性表达，卵巢中芳香化酶的表达量大于精巢中的表达量。大鲵卵巢芳香化酶免疫阳性反应主要分布于表面上皮与卵泡细胞中，且表面上皮芳香化酶的表达量大于卵泡细胞。大鲵精巢芳香化酶免疫阳性反应主要分布于间质细胞与支持细胞中，且间质细胞中芳香化酶的表达量大于支持细胞。与出膜约240 d时的大鲵相比，出膜约380 d时的大鲵性腺中芳香化酶的表达量明显增加，表明随着性腺的发育，芳香化酶的表达量也在增加。