2017年山西师范大学生命学院839分子生物学考研仿真模拟题
● 摘要
一、名词解释
1. Edman 降解(Edman degradation)
【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的,最初用于N 端氨基酸残基分析,现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术,
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应,切下与之反应的那个氨基酸残基,这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基,而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基,又可参加第二轮反应,如此重复,就可以测出n 个残基的顺序。
2. SDS 电泳(SDS-PAGE )
【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
3. 等电聚焦
【答案】
等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。
4. MissenseMutation
【答案】错义突变。错义突变是指DNA 分子中碱基对的取代,使得mRNA 的某一密码子发生变化,由它所编码的氨基酸基变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸序列也相应的发生改变的突变。
5. 穿梭载体(shuttle vector)
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
6. Blue-white screening
【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都
携带一段来自大肠杆菌的
序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后,
整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补
活性蛋白质。由
互补而产生的操纵子DNA 区段,
其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息,这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完,产生完整 细菌在诱导剂的作用下,在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
7. Attenuator
【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时,RNA 合成终止,起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的,其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度,典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。
8. 阻遏蛋白
【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质,在一定条件下与DNA 结合,一般具有诱导和阻遏两种类型。
9. DNA 解链温度(melting temperature, T m )
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
10.RNA 编辑(RNA editing)
【答案】RNA 编辑是指某些RNA ,特别是mRNA 前体的一种加工方式,如插入、删除或取代一些核苷酸残基,导致DNA 所编码的遗传信息发生改变,因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA 的变化。
二、填空题
11.2004年确定人类基因组含有_____碱基对和_____基因。
【答案】约30亿;约2.5万个
【解析】人类基因组计划于20世纪90年代启动,计划测定人类单倍体染色体组中约30亿碱基对序列,包括约3万个基因。
12.DNA —级结构测定方法主要有Sanger 建立的_____和
了 一种特殊底物,称_____。
【答案】双脱氧末端终止法;化学修饰法;ddNTP
【解析】传统DNA 测序法有Sanger 双脱氧终止法和化学修饰法。Sanger 双脱氧法是在DNA 测序反应中, 加入模板DNA (即待测序样本)、特异性引物、DNA 聚合酶、4种dNIP (带放射性标记)和一种ddNTP
。双脱氧ddNTP 取代常规的脱氧核苷酸(dNTP )掺入到寡核苷酸末端ddTTP 为链的末端,在该位置上发生了特异性的链终止效应,可以获得一系列全部以
终止残基的DNA 片段的电泳谱带模式。
13.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括_____、_____、_____。
【答案】成核;结构充实;最后重排
【解析】蛋白质折叠机制的首先成核理论的复性过如下:
(1)成核:最先形成α-螺旋及β-折叠片段,使变 性蛋白质从伸展、无活性状态(Us )转变
的_____。Sanger 法使用
成部分折叠,产生一些二级结构但仍无活性的状态(II );
(2)结构充实:从II 进一步折叠,近于完全,并具有活性,但仍存在着不正确异构体等的状态(In );
(3)最后重排:产生天然蛋白质构象(N )。
14.真核生物的DNA 含有许多重复序列,按其复性快慢可分为_____、_____和_____3类。
【答案】高度重复序列; 中度重复序列; 不重复序列
【解析】根据DNA 复性动力学研究,真核生物的DNA 序列可以分为3种类型:
(1)不重复序列:在一个基因组中一般只有一个或几个拷贝,占DNA 总量的40%~80%,在复性动力学中对应于慢复性组分;
14(2)中度重复序列:往往分散在不重复序列之间,重复次数为10~10,占DNA 总量的
10%~40%,在复性动力学中对应于中间复性组分;
(3)高度重复序列(卫星DNA ):由6~100个碱基组成,在DNA 链上串联重复成干上万次,占基因组的10%~60%,在复性动力学中对应于快复性组分。
15.SOS 应答系统是DNA 损伤修复的一个重要途径
,
【答案】LexA 阻遏;DNA 损伤修复
【解析】当细菌DNA 遭到破坏时,细菌会启动一个被称为SOS 的诱导型DNA 修复系统,但由于参与SOS DNA修复系统的许多基因分散在染色体的各个部位,都同时受到LexA 阻遏蛋白的抑制,平时表达水平很低; 而一般情况下,
基因表达并不完全受阻遏蛋白的阻遏,可以参与细菌中的SOS 体系的诱导表达,recA 基因的表达产物RecA 蛋白在这里的主要功能是通过引起LexA 阻遏蛋白的降解,从而解除它对DNA 损伤修复 相关基因转录的抑制。
16.在原核生物蛋白质合成中不能识别任何终止密码子的终止因子是_____,大肠杆菌释放因子1 (RHI )识别_____与_____。
【答案】RF3; UAG; UAA
17.分子生物学的研究内容主要包含_____、_____、_____三部分。
【答案】DNA 重组技术; 基因表达调控研究; 生物大分子结构功能
【解析】分子生物学研究的四个方面:
(1)DNA 重组技术——基因工程技术;
(2)基因表达调控研究——核酸生物学;
(3)生物大分子结构功能——结构分子生物学;
(4)基因组、功能基因组与生物信急学研究。
蛋白在这里的主要功能是通过引起_____蛋白的降解,从而解除它对_____相关基因转录的抑制。