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一、名词解释

1． 分子伴侣（molecular chaperone）

【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解，如热休克蛋白。

2． 基因超家族

【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性，并参考功能的相似性。

3． Transcriptome

【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。

4． 蛋白质组（proteome ）

【答案】蛋白质组是指一种生物或一个细胞、组织所表达的全套蛋ft 质（protein ）, 即包括一种细胞乃至一种生 物所表达的全部蛋白质。

5． Blue-white screening

【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都

携带一段来自大肠杆菌的

序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后，

整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补

活性蛋白质。由

互补而产生的操纵子DNA 区段，

其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息，这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完，产生完整 细菌在诱导剂的作用下，在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。

二、简答题

6． 简述RNA 原位杂交的主要实验过程及应用。

【答案】（1）主要实验过程

①利用放射性或非放射性（如地高辛、生物素等）标记的特异性探针与被固定的组织切片反应;

②放射性标记检测或者酶促免疫显色，对基因的表达产物在细胞水平上做出定性定量分析。 （2）应用

①用于检测动植物组织中某种特定基因的mRNA 的分布状况，从而了解该基因的表达模式；

②在基因分析和诊断方面能够进行定性、定位和定量分析。

7． 试述结合各种基因组学方法和已有数据还能进一步探索哪些生物学问题。

【答案】（1）以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学，有助于人们在基因组学、蛋白质组学、分子细胞生物学以及生物体水平上探宄生命现象，对疾病机理的阐明以及疾病的防治有重要应用意义。

（2）根据同源性方法将人类基因组与模式生物基因组进行比较，有助于分析人类基因的功能，也有助于区别人类和其他生物的本质差异，进而探索遗传的奥秘。

8． 原核生物DNA 具有哪些不同于真核生物DNA 的特征?

【答案】（1）结构简练。

原核生物DNA 分子的绝大部分是用来编码蛋白质的，非编码序列极少，没有真核细胞DNA 中大量存在着的非编码区和内含子。

（2）转录和翻译同时进行。

原核生物的转录和翻译几乎同时进行，其转录产物为多顺反子mRNA ; 而真核生物的转录在细胞核，翻译在细胞质，转录产物为单顺反子mRNA 。

（3）有重叠基因。

真核生物多为断裂基因，原核生物多为重叠基因，主要有三种情况:

①一个基因完全在另一个基因里面;

②部分重叠;

③两个基因只有一个碱基对是重叠的。

9． 有几种终止密码子？它们的序列和别名是什么？

【答案】（1）有三种终止密码子。

（2）它们的序列为UAA 、UGA 和UAG , 别名分别为赭石密码、琥珀密码和蛋白石密码。

10．阐述逆转录转座子与逆转录病毒的异同。

【答案】（1）相同点：都是以RNA 中介反转录为DNA , 将DNA 整合到靶基因姐上，有长末端重复序列（LTR ）。

（2）不同点：逆转录转座子在插入位点上形成短的正向重复序列，由于缺乏外壳蛋白基因，不能形成病毒颗粒，不会在细胞间发生转移，其中的非病毒超家族不能编码转座酶；逆转录病毒的转录以tRNA 为引物，DNA 整合到宿主染色体上的位点是随机的。

11．什么是上升突变? 什么是下降突变?

【答案】（1）上升突变是指发生在启动子序列上的增强结构基因转录水平的突变。突变后的启动子比现有的启动子更强，能使转录效率和转录量增加。

（2）下降突变是抬发生在启动子序列上的降低结构基因转录水平灼突变。突变后启动子可能不会阻止各个转录单位的起始，但起始效率可能变低并且可能使其邻近基因的转录量降低。

三、论述题

12．说说基因图位克隆法的原理和过程。

【答案】所有具有某种表现型的基因都可以通过基因图位克隆法克隆得到。

（1）基本原理

通过获析突变位点与已知分子标记的连锁关系来确定突变表型的遗传基本。

（2）过程

①通过构建遗传连锁图，将目的基因定位到某个染色体的特定位点，并在其两侧确定紧密连锁的RFLP 或 RAPD 分子标记。

②通过对许多不同生态型个体的大量限制性内切核酸酶和杂交探针的分析，找出与目的基因

距离最近的分子 标记，通过染色体步移技术将位于这两个标记之间的基因片段分离并克隆出来。

③根据基因功能互作原理鉴定目的基因。

13．在基囚操作实践中有哪些检测核酸和蛋白质相对分子质量的方法?

【答案】（1）凝胶电泳技术

当某种蛋白质或核酸分子被放置到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动，其迁移率与电场 强度和该分子本身所携带的净电荷数成正比。由于凝胶为无反应活性的稳定的支持介质，从而降低了对流速度，故迁移率又与分子的摩擦系数成反比（相对分子质量大小、极性、介质的粘度系数等）。

（2）双向电泳技术

双向电泳技术是分离混合蛋白质最常用的方法。该方法是依赖于蛋白质的等电点的不同和相对分子质量的不 同而构建的。运用等电聚焦和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，由于在电流的作用下，在以两性电解质为介质的电泳体系中，不同等电点的蛋白质会聚集在介质上不同的区域（等电点）从而被分离；SDS-蛋白质复合物在凝胶电 泳中的迁移率又由蛋白质的相对分子质量决定，这样就可把复杂的蛋白质混合物中的蛋白在二维平面上分离展开。

（3）质谱分析技术

质谱分析技术是一种超灵敏的鉴定技术。常用的

离得到的或

其他来源的蛋白质酶解成小肽段后与基质混合，将样品混合物点到金属靶表面上并使之干燥结晶，然后用激光轰 击，并使呈离子化气体状态的待分析物从靶表面喷射出去。离子化的气体中

这些气体肽段在电场中被加速后到达检测器的时间由肽段的每个分子带有一个或更多的正电荷，

的工作原理是：将从2-D 胶中分