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2017年第四军医大学基础部分子生物学复试仿真模拟三套题

  摘要

一、名词解释

1. 移码突变(frameshi Kmutation)

【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变,从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。

2. DNA 复性(DNA renaturation)

【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。

3. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

4. 感受态细胞(competent cell)

【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法(如CaCL 等化学试剂)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。

5. 同源重组(homologous recombination)

【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组,真核生物的非姐妹染色单体的交换,细菌的转化、转导和接合,噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。

二、简答题

6. 什么是RNA editing?简述其机制及意义。

【答案】(1)RNA 的编辑是指某些RNA ,特别是mRNA 的一种加工方式,编辑的结果导致DNA 所编码的遗传信息的改变。

(2)介导RNA 编辑的机制

①位点特异性脱氨基作用:载脂蛋白mRNA 中U →A ,谷氨酸受体蛋自mRNA 中A →I 都属于脱氨基作用的结果。分别由胞m 嘧啶和腺嘌呤脱氨酶所催化。

②尿嘧啶插入或删除:由于指导RNA 上存在一些未能配对的腺嘌呤,形成缺口,为插入尿嘧

啶提供了模板,反应完成后,指导RNA 从mRNA 上解离下来,而mRNA 则被用做翻译的模板。

(3)RNA 编辑的生物学意义

①校正作用:有些基囚在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA 编辑得以修复;

②调控翻译:通过编辑可以构建或去除起始密码子和终庄密码子,是基因表达调控的一种方式;

③扩充遗传信息:能够使基因产物获得新的结构和功能,有利于生物的进化。

7. 假如把拟南芥中所有涉及花发育的基因全部敲除,将所涉及玫瑰花发育的基因都置于相应拟南芥基因启 动子的调控之下并转到拟南芥中,这些转基因拟南芥会开出玫瑰花吗?为什么?

【答案】不会。因为植物器官的发育虽然主要是部分相关基因的时空特异性表达所导致的结果,但在发育过程中, 器官基因的差异表达,表达过程的调控,以及组织器官的形态构建等均会受到近旁组织甚至整个植株生长发育的影响。所以仅仅拟南芥的花的发育基因被替换,拟南芥也不会开花,其任何器官的发育过程都离不开植株自身的生长。

8. 人类基因组中具有编码功能的基因仅仅有3~5万左右,但是蛋白质种类超过10万种,请你说明其中的原因。

【答案】基因数目与蛋白质数目不对等,主要原因是:

(1)基因转录后修饰过程中的选择性剪切,使得一个基因形成了不同的转录本,翻译成多种蛋白质;

(2)蛋白质修饰作用,同一种蛋白质经过修饰以后,可以有不同的形式存在细胞中。

9. 原核生物DNA 聚合酶I 不同于聚合酶III 的酶活性是什么?

【答案】(1)DNA 聚合酶I 具有5' →3' 核酸外切酶功能,而DNA 聚合酶III 没有;

(2)DNA 聚合酶I 的生物学活性低,而DNA 聚合酶III 的生物学活性较高;

DNA 聚合酶I 的作用主要是保证DNA 复制的准确性,(3)而DNA 聚合酶III 主要负责链的

延长。

10.基因治疗比较难于推广应用的主要原因是载体。简述病毒载体和非病毒载体的优缺点并加以比较。

【答案】(1)病毒性载体

①优点:

a. 病毒性载体容量大、效率高、宿主范围广,并且易于分离制备;

b. 逆转录病毒载体介导的外源基因可以在靶细胞中永久表达。

②缺点:

a. 由于逆转录病毒载体是随机整合的,存在插入突变、激活癌基因的危险;

b. 有些病毒载体,如腺病毒载体,可能产生复制型腺病毒;

c. 宿主的免疫反应可能导致病毒载体表达短暂;

d. 病毒载体可能会引起机体免疫排斥。

(2)非病毒载体

①优点:

a. 非病毒载体较病毒载体的毒性和免疫反应低;

b. 使用简单、获得方便、便于保存和检验;

c. 携带的外源基因很少会整合到宿主基因组中;

d. 非病毒载体不受基因插入片断大小的限制。

②缺点:易被吞噬细胞系统及靶细胞溶酶体等选择性吞噬、降解。

11.真核生物单拷贝基因转录调控的Britten-Davidson 模型。 【答案】模型是1969年Britten 和Davidson 提出来的,该模型的组成:

,端存在着一段序列称为受体序列(位点)(1)结构基因:在该模型中称为生产基因(P )的

它可被某 种激活因子(A )所激活;

(2)整合基因是产生激活物的基因;

(3)感受位点(S )负责接受生物体对基因表达的调控信号,如在氨基酸饥饿、激素水平等条件影响下能诱 导整合基因合成激活物,而激活物的合成又受感受位点的控制。

这个模型和原核细胞调控模型不同之处,主要在于:每一个特定的受体顺序不是只结合于一个特定的基因组, 它在DNA 链上有重复顺序,各重复顺序可和多个分开的结构基因组结合,而一个结构基因(或结构基因组)又 可以有一个以上的受体顺序。因此一个激活蛋白可激活多个不同基因,而一个基因又可为多个激活蛋白所激活。

三、论述题

12.成功提取mRNA , 最关键的问题是什么,为什么? 从总RNA 中分离mRNA 的原理是什么?

【答案】(1)成功提取mRNA , 最关键的问题是抑制RNA 酶活性。因为mRNA 呈单链状,容易受到核酸酶的攻击。

(2)异硫氰酸狐法(TriZol )原理:TRIZOL 试剂中的主要成分为异硫氰酸肌和苯酚,其中异硫氰酸肌可裂解细胞,促使核蛋自体的解离,使RNA 与蛋自质分离,并将RNA 释放到溶液中。当加入氯仿时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA 进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA 与仍留在有机相中的蛋自质和DNA 分离开。水相层(无色)主要为RNA ,有机层(黄色)主要为DNA 和蛋自质。

13.随着表观遗传学和小分子RNA 的研究进展,许多人认为“中心法则”已经过时,请谈一下你对此观点的看法。

【答案】表观遗传学(epigenetics )是指研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下,基因表达了可遗传的变化的一门遗传学分支学科。表观遗传的现象很多,已知的有DNA 甲基化(DNAmethylation )、基因组印记(genomicimpriting )、母体效应(maternaleffects )、基因沉默(genesilencing )、核仁显性、休眠转座子激活和RNA 编辑(RNAediting )等。表现遗传学现象与小分子RNA 关系密切。

中心法则(geneticcentraldogma )是指遗传信息从DNA 传递给RNA ,再从RNA 传递给蛋白