● 摘要
摘要 本文比较了两种经HPLC鉴定的连翘叶中苷类成分的抗疲劳作用,为有效的开发利用连翘叶这种尚未得到充分利用的资源提供实验依据。
连翘中的苷类成分主要为连翘苷和连翘酯苷,本实验先从连翘叶中以大孔吸附树脂柱层析法制备FSG,再用HPLC测定四个产物中连翘苷和连翘酯苷的含量,最后选择其中两种有效成分含量较高的苷类成分进行抗疲劳实验。
在FSG抗疲劳实验中,采用小鼠力竭游泳运动模型,通过测定SOD、MDA等指标来评价FSGⅡ和FSGⅢ的药效;并用免疫组化法(SABC法)研究小鼠CuZn-SOD基因表达的变化;最后在透射电子显微镜下观察FSG对力竭小鼠心肌、肝组织和股四头肌形态学结构的影响。
结果显示:
1. 本实验所得FSGⅡ和FSGⅢ中连翘苷和连翘酯苷的含量均很高,故推测FSGⅡ和FSGⅢ应有良好的药效。FSGⅡ连翘苷的含量略高于FSGⅢ,但得到FSGⅢ所需洗脱剂为低浓度的乙醇,水溶性良好,且成本低廉,故FSGⅢ有良好的开发价值。
2. FSGⅡ和FSGⅢ能提高小鼠的运动能力,延长游泳至力竭的时间,FSGⅡ和FSGⅢ比较,前者药效稍好。
3. FSGⅡ和FSGⅢ能提高力竭游泳小鼠红细胞中Hb含量及其CAT活性,FSGⅡ和FSGⅢ比较,前者药效稍好。推测FSG中可能有某种可以刺激Hb合成的物质。
4. FSGⅡ和FSGⅢ能帮助力竭运动后恢复小鼠的血糖,并降低BUN含量,FSGⅡ和FSGⅢ比较,前者药效稍好。
5. FSGⅡ和FSGⅢ有提高心肌、肝脏和股四头肌T-SOD和CuZn-SOD活性,降低MDA的作用,从而减少自由基对组织细胞的损害。从药效上看FSGⅡ稍优于FSGⅢ。
6. FSGⅡ和FSGⅢ能促进小鼠糖原合成,提高肝糖原和肌糖原含量,加快了糖储备的恢复。
7. 免疫组化结果显示,FSGⅡ和FSGⅢ能提高小鼠心肌和股四头肌中CuZn-SOD的表达,其趋势与用分光光度法测得CuZn-SOD活性基本一致。
8. 透射电子显微镜观察结果显示,运动对照组小鼠心肌细胞、肝细胞和股四头肌细胞均受到严重损伤,出现了细胞肿胀、闰盘损伤、线粒体肿胀等一系列状况。而FSGⅡ和FSGⅢ能有效减少运动引起的各组织细胞损伤,使其恢复到接近安静组的状态。
以上的结果说明,FSGⅡ和FSGⅢ均能清除自由基,提高机体抗氧化酶系统活力,降低脂质过氧化的发生,提高机体糖储备,从而发挥抗疲劳的作用,但两者相比,单从药效上来看,FSGⅡ要略好一些,其可能的原因在于连翘苷多于后者。但是制备FSGⅢ的成本较FSGⅡ小,且FSGⅢ也具有良好的药效,故综合来看,FSGⅢ具有更好的应用前景。