2018年武汉大学高等研究院885分子生物学之现代分子生物学考研基础五套测试题
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一、名词解释
1． CpG 岛
CpG 岛是指在人类基因组中分布很不均一的CpG 双核苷酸在基因上成串出现所形成【答案】
的区段。CpG 岛经 常出现在真核生物的管家基因（house-keeping gene）基因的调控区，在其它地方出现时会由于CpG 中胞嘧啶甲基化引发碱基转换，引发遗传信息紊乱。
2． 无义突变（nonsensemutation ）
【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子（UAG 、UGA 、U 从）的突变，它使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽。
3． 穿梭载体（shuttle vector）
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
4． 重组修复
【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处，再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程，因为发生在DNA 复制之后，又称复制后修复。
5．
【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。
6． 同源重组（homologous recombination）
【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组，真核生物的非姐妹染色单体的交换，细菌的转化、转导和接合，噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。
7． 蛋白质印迹法（Western blotting）
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜（如硝酸纤维素膜、尼龙膜等）上，再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等，检测常用与特定蛋ft
结合的标记抗体或配体，由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
8． SDS 电泳（SDS-PAGE ）
【答案】SDS 电泳（SDS-PAGE ）是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定pH （碱性） 缓冲系统中分离的方法，主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
二、简答题
9． 简述cDNA 文库的构建过程。
【答案】cDNA 文库是指以细胞的全部mRNA 逆转录合成的cDNA 组成的重组克隆群体。从cDNA 文库可以获 得较完整的连续编码序列（不含内含子），便于表达成蛋白质。构建CDNA 文库的主要步骤包括：
（l ） mRNA 分离；
（2）cDNA 第一链合成；
（3）cDNA 第二链合成；
（4）载体与cDNA 的连接；
（5）噬菌体的包装及转染；
（6）cDNA 文库的扩增和保存。
10．试述RNA 生物合成的一般步骤及真核mRNA 的成熟加工过程。
【答案】（1） RNA 合成步骤：
①模板的识别。RNA 聚合酶结合到启动子序列上，结合部位DNA 双链局部解旋，形成转录泡；
②转录起始。合成RNA 链的最初2~9个核苷酸；
③转录延伸。RNA 聚合酶沿着DNA 分子链向前移动，解链区也随之移动，新生RNA 链不断增长并与模板 链在解链区形成RNΑ-DNA 杂合分子，其后DNA 恢复双螺旋；
④转录终止。RNA 聚合酶在Nus 因子等帮助下识别终止信号，释放聚合酶等转录相关蛋白。
（2）真核mRNA 成熟加工过程：
①新生mRNA 前体分子5端加上甲基化鸟苷酸帽，通常在转录完成前进行；
②RNA 聚合酶转录至终止信号处即有特异核酸内切酶将新合成的RNA 链切下，在3' 端加上一段polyA 尾；
③mRNA 的剪接，切除内含子并将外显子拼接；
④mRNA 内部还可发生甲基化，某些特殊情况下可保证mRNA 被重新编辑。
11．什么是套索状结构? 哪些类型RNA 的剪接中会形成该结构?
【答案】（1）套索状结构是在真核生物RNA 前体加工过程中，切除内含子时，通过2' ，5'-磷酸二酯键形成的一种带尾巴的环形中间结构。
（2）主要在前体mRNA 的剪接过程中会形成该结构。
12．简述双向电泳研究蛋白质组的优缺点。
【答案】（1）优点: ①双向电泳技术，特别是固相pH 梯度等电聚焦为第一向的双向电泳技术是当前分辨率最高，信息 量最大的电泳技术。目前，一次双向电泳最高可达11000个蛋白点的分辨率；
②双向电泳能将组织和细胞中成千上万种蛋白高分辨，高灵敏的分离以满足随后的质谱分析，结合质谱鉴定 技术可査明大型蛋白复合物各组分，与其他生物技术相结合，可以快速准确地发现和鉴定新的蛋白质。
（2）缺点:
①低拷贝蛋白质的鉴定受限；
②极酸或极碱蛋白的分离比较困难； ③分子质量极大或极小蛋白的分离较难；
④难溶蛋白的检测比较困难；
⑤由于蛋白多样性的存在，很难确定一张正常状态的图谱作为病理状态的对照；
⑥重复性仍然不理想；
⑦得到高质量的双向凝胶电泳需要精湛的技术。
13．简述基因芯片技术对分子生物学研究的意义。
【答案】（1）基因表达检测方面：能一次性检测数千个基因表达谱的差异。
（2）核酸突变的检测及基因组多态性方面：可用于核酸突变的检测，甚至可与生物传感器相结合，通过改 变探针阵列区域的电场强度可以检测到基因的单碱基突变，已经成功应用于人类基因组单核苷酸多态性的鉴定、 作图和分型、人线粒体基因组多态性的研究，酵母基因组作图等方面。
（3）技术难易程度方面，较其他技术更易固定大量核酸分子。
14．什么是Pribnow box?它的保守序列是什么?
【答案】（1）Pribnow box （TATA box ）是原核生物中，转录起始位点上游的一个由5~6个核苷酸组成的共有序列，是RNA 聚合酶中σ因子的结合位点，其中央大约位于起点上游10bp 处，所以又称为-10区。
（2）Pribnow box的保守序列是TATAAT 。
15．原核与真核生物的核糖体组成有哪些异同点？
【答案】核糖体又称核蛋白体，由rRNA 和蛋白质组成，是指导蛋白质合成的大分子机器。原核与真核的核糖体 均由大小两个亚基组成。单核糖体有二个亚基，分别称为大亚基和小亚基。在原核细胞和真核细胞中核糖体的组 成见差异下表。