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一、名词解释

1． 细胞水平调控。

【答案】细胞水平调控又称酶水平的调控或分子水平的调控，是一种最原始、最基础的调控机制，它主要是通过细胞内的酶来实现的。单细胞生物能通过细胞内代谢物及其他调节物质浓度的改变来影响各代谢途径中某些酶的 活性或酶的含量，以维持细胞的代谢及生长、繁殖等活动的正常进行；高等生物细胞中除了这些方式外，还可通 过酶和代谢物的区域化分布等方式对代谢进行调控，使代谢途径既不相互干扰又能相互配合地进行。

2． 活性中心

【答案】活性中心是指酶分子上与底物结合并直接催化底物变成产物的区域，它是一种三维实体结构，呈裂缝、裂隙或口袋状。

3． 盐析。

【答案】盐析是指在蛋白质溶液中加入大量中性盐而使蛋白质沉淀的现象。这是由于大量的盐离子可与蛋白质竞争溶液中的水分子，从而破坏蛋白质颗粒表面的水化层，失去水化层的裸露的蛋白质分子易于聚集而沉淀。

4． 活化能（）。

【答案】（由动力学推导出来的）活化能是指化学反应中，由反应物分子到达活化分子所需的最小能量。

5． 转录空泡（transcription bubble）。

【答案】转录空泡是指由RNA-pol 局部解开的DNA 双链及转录产物

DNA 模板链而组成的转录延长过程的复合物。

6． 转氨基作用。

【答案】转氨基作用是指在转氨酶的催化下，将成新的氨基酸和酮酸的过程。

7． 卫星DNA （satdliteDNA ）。

【答案】是指真核细胞染色体DNA 经氯化铯密度梯度离心，其高度重复序列因组成不同而在主带旁自成一条或数条条带

第 2 页，共 30 页 端一小段依附于氨基酸和酮酸之间的氨基进行移换，形

8． 酶的活性中心。

【答案】酶的活性中心酶分子中氨基酸残基的侧链有不同的化学组成，其中一些与酶的活性密切相关的化学基团称做酶的必需基团（essential group）。这些必需基团在一级结构上可能相距很远，但在空间结构上彼此靠近，组 成具有特定空间结构的区域，能和底物特异结合并将底物转化为产物。这一区域称为酶的活性中心（active center） 或活性部位（active site）。

二、问答题

9． 分离胸苷酸合成酶有缺陷的细菌突变株的一种经典的方法是使用胸腺嘧啶和三甲氧苄二氨嘧啶 （trimethoprim , —种二氢叶酸还原酶的抑制剂）处理正在培养基中生长的细菌。大多数细胞将被杀死，生存下来的细胞主要是胸苷酸合成酶有缺陷的突变株。

（1）什么样的表现型可让你确定这些突变株？

（2）以上所进行的选择的生化机理是什么？

（3）如果让你筛选胸苷酸合成酶有缺陷的哺乳动物细胞的突变株，以上程序需要作怎样的修改？

【答案】（1）测定生存下来的细菌细胞抽取物的胸苷酸合成酶的活性。或者将细胞放在含有胸腺嘧啶的培养基中培养，看是否能够成活。

（2）突变株细胞的胸苷酸合成酶没有活性，反而使得胞内的四氢叶酸不会被这个酶催化的反应消耗掉。而培养基中的胸腺嘧啶满足了 DNA 合成中对脱氧核苷三磷酸的需要。

（3）使用氨甲基蝶呤代替三甲氧苄二氨基嘧啶（trimethoprim ）, 因为trimethoprim 并不是哺乳动物细胞DHFR 的有效的抑制剂。

10．使用非变性凝胶电泳分离蛋白质时，蛋白质分子的大小、形状和电荷决定其在凝胶上的迁移率。而为何DNA 用限制性内切核酸酶切割得到线形的片段DNA 电泳时，决定其迁移率的主要是DNA 的大小，而与其形状、电荷无关？

【答案】电泳的DNA 通常用限制性内切核酸酶进行切割得到线性片段，因此DNA 的形状都是均一的。电荷对于DNA 也是恒定的，因为每一个核苷酸由于磷酸基团都有相同的电荷，因此DNA 具有均一的形状和荷质比，因此分离仅取决于DNA 分子大小，小片段电泳快，大片段电泳慢。

11．下列各种核酸酶的专一性及水解产物是什么？

（1）胰核糖核酸酶；（2）蛇毒磷酸二酯酶；（3）牛脾磷酸二酯酶；（4）大肠杆菌核酸外切酶I ; （5）大肠杆菌核酸外切酶III 。

【答案】将各种酶的底物、切点专一性及其产物列成如表:

表

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12．mRNA 、tRNA 、rRNA 在蛋白质生物合成中各具什么作用？

【答案】在蛋白质合成中，（1）mRNA 作为合成的模板；（2）tRNA 作为转运工具；（3）rRNA 和蛋白质结合的核糖体作为蛋白质合成部位。

13．糖酵解与发酵的区别是什么？

【答案】（1）糖酵解:淀粉或己糖在有氧或无氧状态下分解成丙酮酸，伴有少量

（2）发酵：微生物分解糖类产生酒精或乳酸。

14．为何耐热性的DNA 聚合酶在聚合酶链反应中具有很重要的地位？

【答案】聚合酶链反应的步骤需要使用较高的温度，使用耐热的RNA 聚合酶可以避免每一轮扩增时都补充新的聚合酶。如果聚合酶不耐热，补充新酶将是不可避免的。

15．螺旋的稳定性不仅取决于肽链内部的氢键，而且还与氨基酸侧链的性质有关。室温下，在溶液中下列多聚氨基酸哪些能形成螺旋？哪些能形成其他有规则的结构？哪些能形成无规则的结构？并说明其理由。

（1）多聚亮氨酸

（2）多聚异亮氨酸

（3）多聚精氨酸

（4）多聚精氨酸

（5）多聚谷氨酸

（6）多聚苏氨酸

（7）多聚羟脯氨酸 的生成。

【答案】（1）多聚亮氨酸的R 基团不带电荷，适合于形成螺旋。

（2）异亮氨酸的碳位上有分支，所以形成无规则结构。

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