2018年吉首大学医学院306西医综合[专业硕士]之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1． 复制叉
【答案】
复制叉是指 复制时，在链上通过解旋、解链和
解旋，同时合成新的蛋白的结合等过程形成链。 的Y 型结构。在复制叉处作为模板的双链
2． 蛋白质四级结构。
力有疏水作用、氢键、范德华力、离子键。
3． 糖异生（gluconeogenesis ）。 【答案】蛋白质的四级结构是指蛋白质的亚基聚合成大分子蛋白质的方式。维系四级结构的
【答案】糖异生是指非糖物质在细胞内净转变成葡萄糖的过程。
4． 糖异生作用。
【答案】糖异生作用是指非糖物质如乳酸、丙酮酸、甘油、脂肪酸及某些氨基酸在生物体内转化成葡萄糖或糖原的过程。
5． 摆动假说（wobble hypothesis）。
【答案】mRNA 上的密码子与tRNA 上的反密码子相互辨认，大多数情况是遵从碱基配对规律的。遗传密码的摆 动性是指出现不严格的配对的现象，tRNA 分子上有相当多的稀有碱基，例如次黄嘌呤（inosine , I）常出现于三 联体反密码子的
A 、C 、U 都可以配对。
6． 异头碳。
【答案】异头碳是指环化单糖的氧化数最高的碳原子。异头碳具有羰基的化学反应性。
7． 别嘌呤醇（allopurinol ）。
【答案】别嘌呤醇是指次黄嘌呤的结构类似物，可以抑制黄嘌呤氧化酶的活性，减少尿酸形成，用于治疗痛风。
8． 鞘憐脂（sphingomyelin ）。
【答案】鞘磷脂是由鞘氨醇、脂肪酸和磷酰胆碱（少数是磷酰乙醇胺）组成，主要存在于神经的髓鞘中。
第 2 页，共 33 页 端第一位，它和mRNA 密码子第3位的
二、问答题
9． 假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
10．简述双倒数法作图的原理和意义。
【答案】双倒数作图法是用实验方法测的最常用的简便方法。原理：
实验时可选择不同的
为
由此可求出的值（截距的负倒数），以表示底物浓度对酶促反应速度的影响。 测对应的v ; 作图，得到一个斜率为的直线，其截距则大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这
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11．现有600mg 分子量为132000的寡聚蛋白质，在弱碱性下进行2，4，-二硝基氟苯反应，反应完全后进行完全水解，发现含有5.5mg 的DNP-异亮氨酸（C11H1606N3）。问该蛋白质有多少条肽链？
【答案】DNP-异亮氨酸的分子量约为286。
（1）水解获得的DNP-异亮氨酸的毫摩尔数为5.5/286。由于2, 4-二硝基氟苯只与游离氨基端反应，所以600mg 的该寡聚蛋白质的肽链的毫摩尔数为5.5/286。
（2）该寡聚蛋白质的毫摩尔数为600/132000, 所以蛋白质所含的肽链的数目
为
4
12．写出甘油磷脂的结构通式，并标出：（1）非极性部分与极性部分；（2）被磷脂酶A2的水解的化学键。
【答案】如图所示
图
甘油磷脂又称磷酸甘油酯，最简单的磷酸甘油酯是由
架和为被脂肪酸酯化形成的产物为1，2-二酰基甘油-3-磷酸衍生而来，它的甘油骨甘油-3-磷酸，是其他甘油磷脂的母体化合物，它的磷酸基进一步被极性醇酯化，形成各种常见的甘油磷脂。甘油磷脂的酯键和磷酸二酯键能被磷脂酶专一地水解。
13．在下，水解成【答案】根据公式和的平衡常数为求该反应的
代入已知数据，则得
14．由P.Mitchell 提出的化学渗透学说的主要内容是什么？有哪些主要的证据支持化学渗透学说？
【答案】（1）P.Mitchell 提出的化学渗透学说的主要内容是：电子沿着呼吸链传递的时候，释放出自由能转变为跨膜（跨线粒体内膜或细菌质膜）的质子梯度。当质子通过
回到线粒体基质或细菌细胞质的时候，A TP 被合成了。
第 4 页，共 33 页 合酶