2018年上海中医药大学体育中心306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1. 结合蛋白质。
【答案】结合蛋白质是指除含有氨基酸外还含有其他化学成分(如糖、脂肪、核酸、磷酸及色素等),保证蛋白质的正常生物学活性的蛋白质分子。例如:核蛋白、糖蛋白、脂蛋白、金属蛋白、黄素酶、磷蛋白等。
2. 多聚核糖体(polysome )。
【答案】多聚核糖体是指合成蛋白质时,多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA 分子上,形成的似念珠状结构。在一个mRNA 分子上同时结合多个核糖体形成的结构,形成多聚核糖体可以提高翻译的效率。
3. 密码子(codon )。
【答案】密码子又称三联体密码子,是由mRNA 上每三个相邻的核苷酸构成的密码子,每一个密码子决定一个 氨基酸。
4. 基因内校正(intragenic suppressor)。
【答案】基因内校正是指发生在与起始突变相同的基因内的校正突变。
5. 皂化值(saponification number)。
【答案】皂化值又称皂化价,是皂化lg 脂肪所需的K0H 毫克数,它与脂肪(或脂酸)相对分子质量成反比。
6. 氨酰-tRNA 合成酶(aminoacyHRNAsynthetase )。
【答案】
氨酰
合成酶是指能高度特异地识别氨基酸和tRNA 两种底物的酶,反应消耗
的酶。
A TP 。催化氨基酸与tRNA
7. 蛋白聚糖。
8. 脂类(lipids )
【答案】脂类是指脂肪、类脂及其衍生物的总称。
【答案】蛋白聚糖是指由杂多糖与一个多肽链组成的杂化的大分子,多糖是分子的主要成分。
二、问答题
9. 先用巯基乙醇处理胰岛素使其二硫键断开,再移除巯基乙醇让二硫键重新形成;如果A 、B 两条肽链可以经由一或两个二硫键连接,总共有多少种不同的连接方式?
【答案】A 、B 两链分别有4个和2
个
通过一个二硫键将两链连接会有4×2=8种;形成
两个二硫键连接则有4×3=12种,故总共有8+12=20种不同的连接方式。
10.蛋白质跨膜运送有几种类型?
【答案】蛋白质跨膜运送包括:内吞或外排、通过内质网膜和通过线粒体等细胞器膜3种类型。
新生的分泌型蛋白的N 端存在一段富含疏水氨基酸的信号肽,它被胞浆中的信号识别蛋白识别,携带新生肽链并结合到内质网的停泊蛋白上,使新生肽链进入内质网,完成翻译后信号肽则被水解。
翻译后才进入线粒体等细胞器的蛋白质都含有一段带正电荷的序列-导肽,导肽既具有亲水性又具有疏水性,在其他因子的帮助下,导肽牵引蛋白质定向进入线粒体等细胞器。
11.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条小的条带。这一次染色方法是什么?为什么
会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质?
【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。
(2)既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此,可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱,以吸附核糖核酸酶,然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
(3)考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带,而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将
的核糖体蛋白与
的核糖核酸酶分开,
可使用凝胶过滤层析。
大小的
大
条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这
的
核糖核酸酶应该先流出来。
12.试述一碳单位代谢途径中最重要的两类载体及其生物学作用。
【答案】一碳单位的主要生理作用是作为嘌呤和嘧啶的合成原料,对氨基酸代谢和核苷酸代谢具有重要意义。一碳单位代谢中最重要的两类载体包括叶酸和S-腺苷甲硫氨酸。四氢叶酸是叶酸的重要衍生物,在氨基酸代谢、嘌呤和嘧啶合成中具有重要作用,从而对蛋白质和核酸的生物合成至关重要。SAM 在很多代谢反应中承担甲基的供体,可以用来合成如卵磷脂、肾上腺素、肉毒碱等,因此参与体内多种代谢过程,发挥着重要的生物学功能。
13.氨基酸可以通过哪些方式合成?举例说明之。
【答案】氨基酸可以通过直接氨基化、转氨作用和氨基酸互变合成: 直接氨基化:
转氨作用:
14.(1)
赖氨酸
氦基的百分数表示)
(2)
谷氨酸羧基的百分数表示)
【答案】(1
)在根据
时,
赖氨酸的方程
形式占(2
)在
时谷氨酸的. 羧基按下式解离:
根据Henderson-Hasselbalch 方程
按下式解离:
为4.3, 在
的谷氨酸稀溶液中,' 羧基中有多少去质子化?(以
为10.5, 在
的赖氨酸稀溶液中,
氨基中有多少被质子化?(以
15.从某生物材料中提取、纯化一种酶,按下列步骤进行纯化(见表), 计算所得酶的比活力、回收率和纯化倍数。
表