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一、名词解释

1． 活性蛋氨酸。

【答案】活性蛋氨酸又称S-腺苷甲硫氨酸（SAM ），是一种活性甲基供体。是ATP 与蛋氨酸在酶的催化下生成的。

2． 亲和层析。

【答案】亲和层析是指利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别和结合能力建立起来的分离纯化技术。把待纯化蛋白质的特异配体共价连接到载体上，将此载体装入层析柱，对蛋白质混合物进行柱层析时，待纯化的蛋白质与 配体特异结合，吸附在层析柱上，而其他的蛋白质不能被吸附，通过洗脱可以除去，最后用含游离配体的溶液或 用改变了 pH 或离子强度的溶液将与配体结合的蛋白质洗脱下来

3． 谷胱甘肽。

【答案】谷胱甘肽是存在于动植物和微生物肽键，由谷氨酸的竣基与半胱氨酸的氨基缩合而成。显然这与蛋白质分子中的肽键不同。由于GSH 中含有一个活泼的疏基，很容易氧化，二分子GSH 脱氢以二硫键相连形成 氧化型的谷胱甘肽（GSSG ）。

4． 异促效应。

【答案】异促效应是指非底物分子的调节物对别构酶的调节作用。

5． Edman 降解。

【答案】Edman 降解又称苯异硫氰酸酯法，是指从肽链的游离的

列的过程。末端测定氨基酸残基的序末端 氨基酸被PITC 修饰，然后从肽链上分离修饰的氨基酸，再用乙酸乙酯抽提后，可用层析等方法鉴定。余下一条 缺少一个氨基酸残基的完整的肽链再进行下一轮循环。

6． 鞘憐脂（sphingomyelin ）。

【答案】鞘磷脂是由鞘氨醇、脂肪酸和磷酰胆碱（少数是磷酰乙醇胺）组成，主要存在于神经的髓鞘中。

7． 糖酵解。

【答案】

糖酵解是将葡萄糖降解为丙酮酸并伴随着生成的一系列反应，是一切生物有机

葡萄糖转换体普遍存在的葡萄糖降解途径。该反应过程由10步酶促反应组成，通过该途径，

为丙酮酸，同时净生成

8． 盐析。 在有氧无氧条件下均可进行。

【答案】盐析是指在蛋白质溶液中加入大量中性盐而使蛋白质沉淀的现象。这是由于大量的盐离子可与蛋白质竞争溶液中的水分子，从而破坏蛋白质颗粒表面的水化层，失去水化层的裸露的蛋白质分子易于聚集而沉淀。

二、问答题

9． 已知有一系列酶反应，这些反应可使苹果酸转变为4分子的应顺序。

【答案】

总反应式：

10．分离胸苷酸合成酶有缺陷的细菌突变株的一种经典的方法是使用胸腺嘧啶和三甲氧苄二氨嘧啶 （trimethoprim , —种二氢叶酸还原酶的抑制剂）处理正在培养基中生长的细菌。大多数细胞将被杀死，生存下来的细胞主要是胸苷酸合成酶有缺陷的突变株。

（1）什么样的表现型可让你确定这些突变株？

（2）以上所进行的选择的生化机理是什么？

（3）如果让你筛选胸苷酸合成酶有缺陷的哺乳动物细胞的突变株，以上程序需要作怎样的修改？

【答案】（1）测定生存下来的细菌细胞抽取物的胸苷酸合成酶的活性。或者将细胞放在含有胸腺嘧啶的培养基中培养，看是否能够成活。

（2）突变株细胞的胸苷酸合成酶没有活性，反而使得胞内的四氢叶酸不会被这个酶催化的反应消耗掉。而培养基中的胸腺嘧啶满足了 DNA 合成中对脱氧核苷三磷酸的需要。

（3）使用氨甲基蝶呤代替三甲氧苄二氨基嘧啶（trimethoprim ）, 因为trimethoprim 并不是哺

除了外，这些反应并不净摄取或产生其他代谢中间产物。请写出这些酶反

乳动物细胞DHFR 的有效的抑制剂。

11．请你解释下列现象：细菌调节嘧啶核苷酸合成的酶是天冬氨酸一氨甲酰转移酶，而人类调节嘧啶核苷酸合成酶主要是氨甲酰磷酸合成酶。

【答案】氨甲酰磷酸合成酶参与两种物质的合成，即嘧啶核苷酸的生物合成和精氨酸的生物合成（或尿素循环）。在细菌体内，由于细菌无细胞器，嘧啶核苷酸和精氨酸的合成发生在相同的地方，若调节嘧啶核苷酸合成的酶是 天冬氨酸一氨甲酰转移酶，则该酶对嘧啶核苷酸合成的控制将会影响到精氨酸的正常合成。而人细胞中有两种氨甲酰磷酸合成酶，一种位于线粒体内参与尿素循环或精氨酸的合成，另一种位于细胞质，参与嘧啶核苷酸合成。

12．假如生物体内参与DNA 复制的DNA 聚合酶跟参与RNA 合成的RNA 聚合酶一样，不需要引物、可以从头合成DNA ，那么你预测对DNA 复制的结果会有哪些影响？

【答案】对DNA 复制的结果会有以下影响：

以RNA 为引物，一方面可以避免在DNA 合成的起始阶段，处于配对状态的碱基数少而不能形成稳定 的双螺旋结构，错配率高，另一方面RNA 引物容易被识别并切除，重新填补上适当的DNA 片段，这可以提高 DNA 复制的忠实性。

如果生物体内参与DNA 复制的DNA 聚合酶不需要引物、可以从头合成DNA ，那么DNA 复制的忠实 性将下降，尤其是在DNA 合成的起始阶段，而且由于没有引物，不需要切除引物，因此不会造成线性DNA 复 制过程中的末端萎缩问题。

13．简要回答DNA 复制的一般特征

【答案】DNA 复制的一般特征有：（1）半保留复制semiconservative replication）; （2）生长点形成复制叉；（3） 双向性（bidirection ）; （4）半不连续性（semidiscontinu ）; （5）复制起点有多个短重复序列；（6）复制必须有引物；（7）多种酶参与；（8）复制具有高度忠诚性

14．请解释脂肪肝产生的原因？

【答案】脂肪肝是过多的甘油三酯在肝组织积存。正常情况下，甘油三酯与磷脂、载脂蛋白等结合成VLDL 分泌入血，如果磷脂合成原料缺乏，如必需脂肪酸、胆碱缺乏，甲基化作用障碍，甘油三酯不能形成VLDL 释出肝细胞，在肝细胞内积存而形成脂肪肝。另外，酗酒也可以引起脂肪肝，因为大量乙醇在肝脏脱氢可使比值升高，也减少脂肪酸的氧化，引起积累。

15．在嘌呤核苷酸的从头合成中，5-磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶是一种别构酶，它控制着嘌呤核苷酸合成的速 度，并且受终产物AMP 和GMP 的反馈抑制。嘌呤核苷酸也能通过补救途径合成。当E. coli在含有腺嘌呤核苷 的介质中生长时，嘌呤核苷酸的从头合成可因GMP 抑制而关闭。为什么？

【答案】腺嘌呤核苷可以降解成次黄嘌呤。次黄嘌呤可通过补救途径合成IMP , 这一反应是由

IMP 可转变成GMP 。GMP 水平的升高能抑制5-磷酸次黄嘌呤—鸟嘌呤 磷酸核糖转移酶催化的。