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一、名词解释

1． 核酸内切酶（endonuclease ）与核酸外切酶（exonuclease ）。

【答案】核酸内切酶是核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶中能够水解核酸分子内磷酸二酯键的酶。

核酸外切酶是从核酸链的一端逐个水解核苷酸的酶。

2．

【答案】5-磷酸核糖在磷酸核糖焦磷酸激酶催化下与

酸生物合成提供磷酸核糖，它对于核苷酸代谢有重要意义。

3． 帽子结构（capstructure ）。

【答案】帽子结构是真核细胞中mRNA 的

焦磷酸与mRNA 的

常有三种类型端核苷酸相连，形成端有一段特殊的结构。它是由甲基化鸟苷酸经通

分别称为O 型、作用生成，为嘌呤核苷酸、嘧啶核苷I 型、II 型。0型是指末端核苷酸的核糖未甲基化；I 型是指末端一个核苷酸的核糖甲基化；II 型是指末端两个核苷酸的核糖甲基化。这里G 代表鸟苷，N 指任意核苷，m 在字母左侧表示碱基被甲基化，右上角数字表示甲基化位置，右下角数字表示甲基化数目，m 在字母右侧表示核糖被甲基化。这种结构有抗核酸外切酶的降解作用。在蛋白质合成过程中，它有助于核糖体对mRNA 的识别和结合，使翻译得以正确起始。

4． 氨基酸的活化。

【答案】在参与下由氨酰合成酶催化氨基酸与相应tRNA 形成氨酰的过程，是氨基酸的活化形式。

5． 辅酶和辅基。

【答案】辅酶是指与蛋白结合比较松弛的小分子有机物质，用透析的方法很容易将辅酶与酶蛋白分开。辅基是指以共价键与酶蛋白相结合的辅助因子，用透析法不能去除。

6． 核苷酸的补救合成途径。

【答案】核苷酸的补救合成途径是指利用核酸降解或进食等从外界补充的含N 碱基或核苷合成新的核苷酸的途径。

7． 基因内校正（intragenic suppressor）。

【答案】基因内校正是指发生在与起始突变相同的基因内的校正突变。

8． 亲和层析。

【答案】亲和层析是指利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别和结合能力建立起来的分离纯化技术。把待纯化蛋白质的特异配体共价连接到载体上，将此载体装入层析柱，对蛋白质混合物进行柱层析时，待纯化的蛋白质与 配体特异结合，吸附在层析柱上，而其他的蛋白质不能被吸附，通过洗脱可以除去，最后用含游离配体的溶液或 用改变了 pH 或离子强度的溶液将与配体结合的蛋白质洗脱下来

二、问答题

9． 糖酵解与发酵的区别是什么？

【答案】（1）糖酵解:淀粉或己糖在有氧或无氧状态下分解成丙酮酸，伴有少量的生成。（2）发酵：微生物分解糖类产生酒精或乳酸。

10．丙酮酸脱氢酶受磷酸化调节，其状态由作为丙酮酸脱氢酶系一部分的一种激酶和一种磷酸酶决定。已发现磷酸化的丙酮酸脱氢酶是没有活性的。缺乏磷酸酶的基因的小鼠在某些情况下表现出糖尿病的症状。假定你是一家制药公司研发部的主任，你愿意投入人力和物力进行进一步的研究吗（特别是它与2型糖尿病的关系）？如果你愿意，你会从哪方面着手？

【答案】缺乏磷酸酶将导致丙酮酸的堆积和乙酰CoA 的缺乏。于是，有更多的物质进入糖异生途径。糖酵解仍然能够进行，产生乳酸或丙氨酸。因此问题在于过于旺盛的糖异生，而不是不足的糖酵解。无论如何，这意味着丙酮酸脱氢酶受到激酶和磷酸酶的控制，这对稳定血糖水平十分重要。作为制药公司的主任应该紧紧抓住这一现象，特别它与2型糖尿病的关系做更多的研宄。目前，2型糖尿病患者的数目越来越多。导致2型糖尿病的原因不是胰岛素分泌不足，而是细胞对胰岛素缺乏反应。对于糖尿病，要做的是逆转基因敲除产生的表型，所以需要找到磷酸酶的激活剂或激酶的抑制剂，后者可能更容易发现。有趣的是，这样的基因敲除小鼠还能存活。如果是丙酮酸脱氢酶的基因完全失活，小鼠肯定不能存活，因为将不能从糖类合成脂质。由于哺乳动物含有三种丙酮酸脱氢酶的磷酸酶，所以体内的实际情况可能更加复杂。被敲除的如果是诱导型的，那么意味着只有在特定的条件下，糖尿病症状才能表现出来。

11．甘氨酸和谷氨酸在体内浓度较高，分析其原因。

【答案】两者是体内氨基酸合成与分解代谢的重要中间物质。甘氨酸是体内多种活性小分子的合成底物，如与谷胱甘肽、肌酸、胆碱、嘌呤、卟啉的合成都有关系。谷氨酸可与体内游离的氨结合形成谷氨酰胺进行转运，降低游离氨对机体的毒性。

12．试述使用酶作催化剂的优缺点。

【答案】（1）优点：

①专一性高，副反应很少，后处理容易。

②催化效率高，酶用量少。

③反应条件温和，可以在近中性的水溶液中进行反应，不需要高温、高压。

④酶的催化活性可以进行人工控制

（2）缺点：

①酶易失活，酶反应的温度、

②酶不易得到，价格昂贵。

③酶不易保存。

13．常见的呼吸链电子传递抑制剂有哪些？它们的作用机制是什么？

【答案】（1）鱼藤酮（rotenone ）、阿米妥（amytal ）以及杀粉蝶菌素A （piericidin-A ）, 它们的作用是阻断电子由NADH 向辅酶Q 的传递。鱼藤酮是从热带植物（Deni?e/Z中rica ）的根中提取出来的化合物，它能和NADH 脱氢酶牢固结合，因而能阻断呼吸链的电子传递。鱼藤酮对黄素蛋白不起作用，所以鱼藤酮可以用来鉴别NADH 呼吸链与

相竞争，从而抑制电子传递。

（2）抗霉素A （antimycin A）是从链霉菌分离出的抗菌素，它抑制电子从细胞色素b 到细胞色素的传递作用。

（3）氰化物、一氧化碳、叠氮化合物及硫化氢可以阻断电子由细胞色素向氧的传递作用，这也就是氰化物及一氧化碳中毒的原因。

14．嘌呤霉素和四环素都能抑制原核细胞蛋白质的生物合成，但嘌呤霉素的抑制效果低于同剂量的四环素，为什么？

【答案】抑制蛋白质的合成的作用点很多。

（1）抑制氨基酸的活化。例如，吲哚霉素是色氨酸的类似物。

（2）抑制蛋白质合成的起始，如氨基环醇类抗生素，链霉素与小亚基结合。

（3）抑制肽链的延伸。例如，四环素封闭小亚基的氨酰位点，氯霉素主要是与细菌核糖体的50S 亚基结合而抑制肽酰基转移反应。

（4）使翻译提前终止，如嘌呤霉素。

所以嘌呤霉素的抑制效果低于同剂量的四环素，嘌呤霉素可以合成蛋白质，但是四环素则不可以。

呼吸链。阿米妥的作用与鱼藤酮相似，但作用较弱，可用作麻醉药。杀粉蝶菌素A 是辅酶Q 的结构类似物，由此可以与辅酶Q 离子强度等要很好控制。