2018年长江大学内科学306临床医学综合能力(西医)之生物化学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1． 蛋白质工程（protein engineering）。
【答案】蛋白质工程又称第二代基因工程，1981年由美国基因公司Ulmer 提出，是指通过对
蛋白质分子结构的合理设计，利用基因工程手段生产出具有更高活性或独特性质的蛋白质的过程。
2． 外周蛋白。
【答案】外周蛋白是指以非共价键结合于膜表面，可被高浓度的尿素、盐溶液洗脱的蛋白质。
3． 自身激活作用（auto catalysis）。
【答案】自身激活作用是指消化蛋白质的酶是以酶原形式存在，有活性的蛋白酶可以激活酶原转变为有活性的酶。
4． 单核苷酸。
【答案】单核苷酸是指核苷与磷酸缩合生产的磷酸酯。
5． 起始密码子。
【答案】起始密码是指指定蛋白质合成起始位点的密码子。最常见的起始密码子是蛋氨酸密码：AUG 。
6． 内源因子
【答案】内源因子是胃幽门黏膜分泌的一种糖蛋白，维生素只有与它结合才可能透过肠壁被吸收，且不被肠细菌破坏。缺乏内源因子可导致维生素的缺乏。
7． 小分子核内 RNA （small nuclear RNA, snRNA）。
【答案】小分子核内RNA 是指真核生物细胞核内一些序列高度保守的小分子RNA , 富含U ，与蛋白质构成复合 物snRNP , 参与mRNA 前体的拼接。
8． 密码子的偏爱性（codonbias ）。
【答案】密码子的偏爱性是指不同生物体对编码同一种氨基酸的不同密码子（同义密码子）的使用频率不同，即 对不同密码子的偏爱性不同。
二、问答题
9． 假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
10．为什么说乙醛酸循环是三羧酸循环的支路？
【答案】乙醛酸循环是一个存在于植物和微生物的有机酸代谢环，五步反应中有三步与柠檬酸循环中的一样，另有两步不同的是:异柠檬酸不经脱羧而直接被其裂合酶裂解成琥珀酸和乙醛酸（因而得名），后者再与另一分子乙酰-CoA 经苹果酸合酶催化缩合成苹果酸。总反应式:2乙酰-→琥珀酸+2C0ASH+NADH+表明，通过绕行柠檬酸循环中的两步脱羧反应，每轮乙醛酸循环可由两分子乙酰-CoA 净得一分子琥珀酸或草酰乙酸，后者既可进入柠檬酸循环代谢，亦可经由糖异生途径转化为葡萄糖。
乙醛酸循环的意义：（1）乙酰CoA 经由该循环可以和柠檬酸循环相偶联以补充其中间产物的缺失；
（2）乙醛酸循环是微生物利用乙酸盐作为碳源的主要途径之一；
（3）乙醛酸循环是萌发种子和油料植物等将脂肪转变为糖和氨基酸的途径。
大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这
11．鸟氨酸循环中的产物尿素中的两个氮原子分别来自于哪几种分子，为什么？
【答案】在鸟氨酸循环的过程中，尿素中的两个氮原子分别来自谷氨酸和天冬氨酸。整个过程需要消耗4个高能磷酸键。
12．以不同浓度的丙酮酸为底物，测定乳酸脱氢酶酶促反应速度得到以下一些数据（见表）:
表
（1）计算乳酸脱氢酶在该反应条件下的
（2）当丙酮酸浓度为
（3）当丙酮酸浓度为
【答案】⑴
（2）当
当
（3）
13．毒蛇的毒液中通常含有磷脂酶
之后对红细胞的功能有什么影响？
【答案】磷脂酶 值。 时，反应速度V 是多少？ 时，如果酶浓度加倍时，V 会是多大？
其作用磷脂酰胆碱的产物是什么？释放出来的产物进入血流的作用位点是磷脂2号位上的酯键，释放出来的是溶血磷脂，对红细胞的影响是能导致红细胞溶血。
14．什么是生物膜？研宄生物膜有何重要意义？
【答案】（1）生物膜是细胞质膜和细胞内膜系统的总称，生物膜是由极性脂和蛋白质组成的超分子复合物，厚约6〜10nm ，是构成细胞结构最基本的组分之一。
（2）真核细胞除了有把原生质与环境隔开的质膜外，还拥有复杂的细胞内膜系统，如核膜、内质网、高尔基体，线粒体膜、质体膜等。这些膜系统不仅是维持细胞内环境相对稳定的有高度选择性的半透性屏障，而且直接参与物质转运、能量转换、信息传递、细胞识别等重要的生命活动。细胞的形态发生、分化、生长、分裂以及细胞免疫、代谢调节、神经传导、药物和毒物的作用、生物体对环境的反应等，都与生物膜有密切的关系。因此，生物膜已经成为当前分子生物学，细胞生物学中最活跃的高科技研宄领域之一。
15．一个双螺旋DNA 分子中有一条链的A%=24%, C%=30%。
（1）说明这一条链上的（T+G）的摩尔分数；
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