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一、名词解释

1． 回复突变（re verse mutation / back mutation）。

【答案】回复突变是指发生在起始突变位点上，使原来的野生型表型得到恢复的第二次突变。

2． Edman 降解。

【答案】Edman 降解又称苯异硫氰酸酯法，是指从肽链的游离的

列的过程。末端测定氨基酸残基的序末端 氨基酸被PITC 修饰，然后从肽链上分离修饰的氨基酸，再用乙酸乙酯抽提后，可用层析等方法鉴定。余下一条 缺少一个氨基酸残基的完整的肽链再进行下一轮循环。

3． 信号识别颗粒（signal recognition particle）。

【答案】信号识别颗粒是在真核细胞的胞质内存在的一种由小分子RNA （7S rRNA ）和6种不同蛋白质共同组 成的复合物，它能特异地识别和结合信号肽，并与核糖体结合，暂时阻断多肽链的合成，进而与内质网外膜上的 SRP 受体结合，信号肽就可插入内质网进入内腔，被内质网

SRP 与受体解离并进入新 的循环，内膜壁上的信号肽酶水解。而信号肽后继肽段也进入内质网内

腔，并开始继续合成多肽链。SRP 使分泌性蛋白及早进入细胞的膜性 结构，能够正确的折叠、进行必要的后期加工与修饰并顺利分泌出细胞。

4． 光复活作用。

【答案】光复活作用是指因紫外线引起的胸腺嘧啶二聚化类的DNA 损伤，由于光解酶利用可见光的能量而得以 修复并使受损伤细胞存活的现象。

5． 进行性（processivity ）。

【答案】进行性是指聚合酶从模板链上解离下来之前所能添加的核苷酸数。

6． 蛋白质的营养价值（nutrition value of protein）。

【答案】蛋白质的营养价值是指各种蛋白质由于所含的氨基酸种类和数量不同而具有不同的营养价值，若体内所需的氨基酸的种类和量越多，则蛋白质营养价值越高。

7． Southernblotting 。

【答案】Southernblotting 即DNA 印迹，是指双链DNA 在凝胶电泳后变性为单链，转移并固定到特定滤膜（如硝酸纤维素膜）上，同标记的核酸探针杂交，根据杂交信号显示靶DNA 的存

在与位置。DNA 印迹可用于检测基因突变。

8． 氨基酸代谢池（amino acid metabolic pool）。

【答案】氨基酸代谢池是指食物蛋白质经消化而被吸收的氨基酸与体内组织蛋白质降解产生的氨基酸混在一起，分布于体内参与代谢。

二、问答题

9． 假如你从某一动物组织提取一份总RNA 样品，可采用一些什么方法检测它的质量（完整性）、纯度和浓度？并说明判断依据。

【答案】通过琼脂糖凝胶电泳结合EB 染色，观察RNA 的三条特征带是否都出现，以此判断样品RNA 的完整性。如果抽提过程中出现RNase 降解或机械损伤，那么RNA 三条带将不完整。可以根据EB 染色的深浅结合A26〇的吸光值综合判断浓度，因为EB 嵌入量和260nm 处的吸光值都与RNA 分子的多少成正比。RNA 制品的纯度通过的比值来判断，RNA 纯制品的比值在, 若比值偏低，则有可能被污染。

10．简述反转录酶及其性质，为什么说反转录酶是一种重要的工具酶？

【答案】反转录酶发现自逆病毒（反转录病毒）。这类病毒属正链RNA 病毒，在其生活周期中须经一种自身携 带的酶反转录酶（亦称逆转录酶），把RNA 基因组反转录成DNA 。然后这种病毒的双链DNA 形式整合到寄主 染色体上，经转录形成子代RNA （亦是mRNA ）。反转录酶有三种酶的活性：

（1）以RNA 为模板合成互补DNA 的DNA 聚合酶活性；

（2）以DNA 为模板合成DNA 的DNA 聚合酶活性；

（3）去掉RNA-DNA 杂合双链中RNA 链的RNaseH 活性。

由于大多数真核细胞产生的mRNA 都有多聚腺苷酸尾巴polyA , 这些mRNA 在寡聚胸腺嘧啶核苷酸oligodT 的引导下经反转录酶的作用产生cDNA ; 因此可以做成真核细胞的cDNA 文库。故反转录酶是一种重要的工具酶。

11．一个双螺旋DNA 分子中有一条链的A%=24%, C%=30%。

（1）说明这一条链上的（T+G）的摩尔分数；

（2）互补链上的A , C ，（A+C）的摩尔分数。

【答案】（1）已知A%=24%。C%=30%

所以这条链上（T+G）%=1-（A%+C%）=46%

（2）根据Chargaff 规则，A%=T%，C%=G%

所以互补链上T%=24%，G%=30%，（A+C）%=46%

12．结合肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线，简述动物体内的氧从肺中转运到肌肉中的过程。肺泡中的

是肌红蛋白的

【答案】当的比血 红蛋白的（26 Toir ）低得多，反映了肌红蛋白对氧的高亲和性。肌红蛋白和血红蛋白

下，如在肺部（大约100 为肌肉的毛细管中血红蛋白在肺泡中的Y 值是是20T 〇rr ,

血红蛋白的

在肌肉毛细管中的Y

值是时，肌红蛋白处于半饱和状态，所以在同样的条件下，肌红蛋白的生理作用直接与它们在低氧压下对氧的相对亲和性有关。当在高

约50 Torr以下的Toir ）时，肌红蛋白和血红蛋白对氧的亲和性都很高，两者几乎都被饱和了。然而当处于低于大时，肌红蛋白对氧的亲和性明显要比血红蛋白对氧的亲和性高得多。在肌

低血红蛋白对氧的亲和性低，所以红细胞中血红肉等组织的毛细管内，由于蛋白载有的很多氧被释放出来，释放出来的氧都可被肌肉中的肌红 蛋白结合。肌红蛋白和血红蛋白对氧亲和性的差异形成了一个有效地将氧从肺转运到肌肉的氧转运系统。

13．1-软脂酰-2-硬脂酰-3-月桂酰甘油与磷脂酸的混合物在苯中与等体积的水震荡，让两相分开后，问哪种脂质在水相中的浓度高？为什么？

【答案】磷脂酸在水相中的浓度高。因为磷脂酸分子中有极性端和非极性端，是两亲化合物，而且在水中形成稳定的微团。而三酰基甘油分子中没有极性端，不能形成微团。

14．如果一段DNA 序列GGTCGTT 上面一条链被亚硝酸处理，那么经过两轮复制以后，最可能的产物是什么？

【答案】亚硝酸是一种非特异性的脱氨基试剂，C 、A 、G 在亚硝酸的作用下分别转变为尿嘧啶、次黄嘌呤和黄 嘌呤。尿嘧啶与A 配对，所以经过两轮复制后，CG 碱基对变成TA 碱基对。次黄嘌呤与C 配对，所以经过两轮 复制后，AT 碱基对变成GC 碱基对。黄嘌呤依然与C 配对，

GGTCGTT 中的C 被亚硝酸 脱氨基， 所以不改变節对性质。经过两轮复制以后，将变成GGTTGTT 。

15．什么是呼吸链（电子传递链）？典型的呼吸链有哪些？

【答案】（1）呼吸链的含义：在生物氧化过程中，底物分子脱下的氢，经一系列中间传递体而到达分子氧。这种从底物氧化脱下的氢和电子沿着按一定顺序排列的一组电子传递体而传递到分子氧以生成水的过程，称为呼吸链。

（2）典型的呼吸链中要有两种：①NADH 的呼吸链；②的呼吸链。

16．参与IMP 合成的第一个酶利用Gin 作为氨基的供体而不是直接使用氨，这个现象在其他地方也能发现。为什么自然利用一个更耗能的过程（Gin 作为氨基供体需要消耗ATP ）?

【答案】参与IMP 合成的第一个酶实际上催化的是一种转氨基反应，该反应的机理是含有孤对电子的N 原子进行亲核进攻。然而在生理pH 下，氨被质子化，形成

孤对电子不再存在，从而使转氨基反应无法进行。利用Gin 作为氨基的供体就可以避免上述现象发生。