题目：桔梗植株再生体系的建立（附：山茱萸种质资源调查研究）

桔梗Platycodon grandiflorum (Jacq.) A. DC. (P. glaucum Nakai)属桔梗科（Campanulaceae），多年生草本植物，是一种常用的重要中药材，其根入药，有润肺、散寒、祛痰、排脓等功效，其中含有多种氨基酸与人体必需微量元素，以及大量亚油酸等不饱和脂肪酸，具有降压降脂、抗动脉粥样硬化等多种作用。本实验对桔梗组织培养进行了系统的研究，建立了其植株再生体系，并对液体培养条件下其生理活性和有效成分累积情况进行了研究，同时还探讨了桔梗总皂甙的提取条件，筛选了桔梗转基因过程中抗生素的浓度、除菌条件等。实验结果如下： 　　1. 利用桔梗叶片、茎段为外植体，对其开展了组织培养及植株再生的研究，筛选出了愈伤组织、不定芽、芽的增殖和生根的较佳培养条件，建立了比较简单可行的桔梗组织培养及植株再生体系，其中培养基MS+2,4-D 2mg/L + 6-BA 0.5mg/L + NAA 1mg/L +IAA 0.5mg/L上诱导叶片愈伤组织，诱导率可达95.9%；培养基MS+2,4-D 1mg/L + 6-BA 1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +IAA 0.5mg/L上诱导茎段愈伤组织，诱导率可达92.8%。论文还对桔梗愈伤组织的盐耐受性进行了初探。 2. 在桔梗愈伤组织液体培养条件下，对其组织细胞的增殖、生理活性和次生代谢产物含量进行了测定，为利用桔梗细胞大规模生产次生代谢产物奠定了一定的实验基础。 3. 优化了桔梗皂甙的提取方法、提取溶剂等条件，并采用薄层层析法进行了验证，较好的方法是用甲醇超声提取60min。 4. 测定了陕西境内三个桔梗主产地（商洛、汉中及安康）的桔梗药材的总皂甙含量，结果显示：商洛地区的桔梗皂甙含量略高于其它两个产地。 5. 以叶片、茎段为外植体，研究了不同抗生素对桔梗愈伤组织诱导及增殖的影响。结果表明，卡那霉素对桔梗愈伤组织的诱导及增殖有不同程度的抑制作用，头孢曲松钠对组织分化生芽有一定的抑制作用；不同外植体对抗生素的敏感程度不同，其中桔梗叶片对卡那霉素的敏感性高于茎段，而叶片与茎段对头孢曲松钠的敏感性几乎一致。 6. 筛选出了用于转基因过程适宜的抗生素浓度，得出：在以愈伤组织为外植体进行转化时，选择因子卡那霉素浓度应设定为25mg/L；在以茎段与叶片为外植体诱导愈伤组织进行转化时，选择因子卡那霉素浓度应该分别设定为50mg/L和25mg/L；以两者为外植体诱导不定芽进行转化时，选择因子卡那霉素浓度应该设定为50 mg/L（茎段为外植体）、25mg/L（叶片为外植体）；在进行抑菌处理时，建议将头孢曲松钠浓度设定为400 mg/L。 山茱萸(Cornus officinalis Sieb.Et Zucc)属山茱萸科（Cornaceae）落叶乔木，是一种常用的名贵中药材，其药用部分主要为干燥的果实。山茱萸具有降血糖、抗衰老、增强免疫机能的作用，可用于治疗失眠、糖尿病及其他炎症，药用价值极高。本文系统调查了山茱萸源产地陕西佛坪县境内现有资源状况，针对结果期不同产地、品种和时期的种实性状进行了研究，作出了初步的种质评价，为进行山茱萸的规范化种植(GAP)奠定了一定的基础。