● 摘要
脊髓损伤后病理生理反应复杂，各种不利因素影响神经再生，神经生长因子（Nerve Growth Factor，NGF）能够促进修复后神经再生，但其半衰期短，不能长时间发挥功能性。本文的研究目的是，构建一种长时程缓释NGF壳聚糖支架，研究其理化特性及生物活性，为应用神经组织工程材料支架修复脊髓损伤提供理论基础和实验依据。本研究完全采用水为反应基质，对溶胀时间、溶胀条件进行研究，获得制备壳聚糖支架的最佳条件。进一步通过扫描电子显微镜（Scanning Electron Microscope，SEM）、X射线衍射分析仪（X-ray Crystal Diffractometer，XRD）、傅里叶变换红外光谱仪（Fourier Transform Infrared spectrometer，FTIR）以及热重分析（Thermo-Gravimetric Analyzer，TGA）等方法对制得的壳聚糖支架的理化特性进行表征。接着使用酶联免疫法（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA）研究包封NGF壳聚糖支架的缓释特性，最后通过鸡胚背根神经节（Dorsal Root Ganglion，DRG）培养方法验证经该支架缓释出的NGF的生物活性。研究结果表明，磁力搅拌条件下溶胀时间48h，为制备壳聚糖支架的最佳条件。与未经处理的壳聚糖相比，处理的壳聚糖支架结晶度有明显提高，并且制得的壳聚糖支架与蛋白质之间通过氢键相互连接。在体外培养条件下，包封NGF壳聚糖支架在长达16w的时间里，能够不断累积释放出NGF，且经包封NGF壳聚糖支架缓释出的NGF具有生物活性，能够显著提高DRG突起的生长长度。